השגת תאי סרטן שחלות ראשוניים מדגימות מוצקות: שיטה לתרבית תאי סרטן שחלות אפיתל מדגימות גידול בשחלות

תאי אפיתל הנמצאים על פני השטח החיצוניים של השחלה עלולים לעבור טרנספורמציה ממאירה לתאים סרטניים שיכולים לגדול לגידולי שחלות.

כדי לבודד את תאי סרטן השחלות האפיתל הללו או EOCs, התחל בלקיחת דגימת גידול בשחלות וטחון אותה לחתיכות קטנות. העבירו את החתיכות הטחונות לצינור המכיל מאגר עיכול בתוספת אנזים הפרוטאז הרצוי.

פרוטאזות אלו מפרקות את חלבוני המטריצה החוץ-תאית בתוך הרקמה, ומשחררות תאי EOC, אריתרוציטים וכמה פיברובלסטים מנותקים לתרחיף.

סנן את תמיסת התאים דרך מסננת כדי להפריד את התאים הבודדים התלויים מחתיכות רקמה לא מנותקות. צנטריפוגה את התרחיף כדי לגלול את תאי ה-EOC, אריתרוציטים ופיברובלסטים. יש להשליך את הסופרנטנט המכיל אנזים.

השעו מחדש את כדור התא למצע גידול אפיתל והעבירו אותו לצלחת תרבית. דגרו את התרבית כדי לאפשר לתאי ה-EOC והפיברובלסטים להיצמד לבסיס הצלחת בזמן שהאריתרוציטים צפים במדיה.

הסר את האריתרוציטים התלויים על ידי רענון המדיה. עם הזמן, המדיה מאפשרת צמיחה סלקטיבית של תאי EOC על פני פיברובלסטים ליצירת שכבה אחת של תאי סרטן שחלות ראשוניים.

אספו את הדגימה מחדר הניתוח והעבירו אותה על קרח למעבדה. עדיין בתוך המיכל המועבר, הנח את הדגימה במכסה בטיחות ביולוגי. העבירו את הדגימה מצינור חרוטי של 50 מיליליטר לצלחת פטרי בגודל 60 מילימטר על 60 מילימטר המכילה 10 מיליליטר PBS טרי קר כקרח.

לאחר מכן,