יצירת צמתים עצביים-שריריים באמצעות מכשיר מיקרופלואידי

התחל עם מכשיר מיקרופלואידית מצופה פולימר הכולל בארות מחוברות זו לזו הנושאות תאי מראה המחוברים באמצעות מיקרו-חריצים.

זרע תאי אב עצביים לבארות של תא אחד.

אפשר להם לנדוד לתעלה המחוברת ולדבוק בפולימר.

כיסוי עם מצע גידול לקידום התבגרות עצבית לנוירונים מוטוריים.

בתא הנגדי, זרעו את הבארות בתאי אב שריר, הנודדים ונצמדים לתעלה המחוברת זו לזו.

החלף את המדיום במדיום התמיינות, הגורם לאיחוי של תאי אב שריר ויוצר תאי שריר מרובי גרעינים.

הוסף מדיום התמיינות נוירונים המכיל גורמי גדילה לתא המכיל תאי שריר.

בינתיים, הוסף חצי נפח של מדיום נטול גורמי גדילה לתא המכיל תאים עצביים.

גורמי הגדילה ונפח גבוה יותר של מדיום בתא הנגדי מקדמים את הנוירונים המוטוריים להרחיב את תהליכיהם דרך המיקרו-חריצים.

תהליכים עצביים אלה מתחברים לאחר מכן לתאי השריר ויוצרים צמתים עצביים-שריריים.

כדי לצלחת את תאי האב העצביים, או NPCs, במכשיר המיקרופלואידי, הסר DPBS משתי בארות בצד אחד של המיקרו-חריצים במכשיר באמצעות פיפטה של 200 מיקרוליטר. כדי לזרוע בסך הכל 250,000 NPCs ב-60 עד 100 מיקרוליטר של תווך נוירונים מוטוריים ביום 10 לכל מכשיר בבאר הימנית העליונה, זרע מחצית מתרחיף התא קרוב לפתח התעלה בזווית של 45 מעלות.

השהה למספר שניות כדי לאפשר לתרחיף התא לזרום דרך התעלה לפני הוספת המחצית הנותרת של תרחיף התא בבאר התחתונה. השתמש בעט כדי לסמן