-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biochemistry
זרימת עבודה של "לכידת פני התא" לכימות ללא תוויות של פרוטאום פני התא
זרימת עבודה של "לכידת פני התא" לכימות ללא תוויות של פרוטאום פני התא
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
“Cell Surface Capture” Workflow for Label-Free Quantification of the Cell Surface Proteome

זרימת עבודה של "לכידת פני התא" לכימות ללא תוויות של פרוטאום פני התא

Full Text
3,259 Views
06:31 min
March 24, 2023

DOI: 10.3791/64952-v

Akul Naik1, Sanjeeva Srivastava1,2, Arun P. Wiita1,3,4

1Department of Laboratory Medicine,University of California, San Francisco, 2Department of Biosciences and Bioengineering,Indian Institute of Technology Bombay, 3Deptartment of Bioengineering and Therapeutic Sciences,University of California, San Francisco, 4Chan Zuckerberg Biohub

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol describes a workflow for characterizing the cell surface proteome of various cell types, focusing on antigen identification. It includes steps for protein enrichment, sample preparation, and mass spectrometry analysis.

Key Study Components

Area of Science

  • Proteomics
  • Cell Biology
  • Cancer Research

Background

  • Understanding cell surface proteins is crucial for identifying specific antigens.
  • Cell membrane proteins can serve as targets for immunotherapies.
  • Optimizing sample input is essential for accurate results.
  • This protocol can be applied to various cell types, including tumor cells.

Purpose of Study

  • To enrich and analyze cell surface proteins from whole cell lysates.
  • To identify antigens specific to different cell types.
  • To explore potential targets for cancer immunotherapy.

Methods Used

  • Cell surface protein enrichment techniques.
  • Sample preparation for mass spectrometry.
  • LC-MS/MS analysis for protein identification.
  • Data processing with specialized software.

Main Results

  • Successful enrichment of cell membrane proteins.
  • Identification of unique antigens on tumor cells.
  • Demonstration of the protocol's effectiveness through iterative optimization.
  • Potential for discovering novel cancer immunotherapy targets.

Conclusions

  • The protocol provides a reliable method for studying cell surface proteomes.
  • It highlights the importance of optimizing experimental conditions.
  • Findings could lead to advancements in cancer treatment strategies.

Frequently Asked Questions

What is the main goal of this protocol?
The main goal is to characterize the cell surface proteome and identify specific antigens on various cell types.
How can this protocol be applied in cancer research?
It can be used to identify antigens on tumor cells that may serve as targets for immunotherapies.
What techniques are used in this workflow?
The workflow includes cell surface protein enrichment, mass spectrometry analysis, and data processing.
Why is sample optimization important?
Optimizing sample input is crucial for achieving accurate and reliable results in proteomic analysis.
Who demonstrates the procedure in the video?
The procedure is demonstrated by Akul Naik, a junior specialist from the laboratory.

כאן, אנו מתארים זרימת עבודה של פרוטאומיקה לאפיון פרוטאום פני התא של סוגי תאים שונים. זרימת עבודה זו כוללת העשרת חלבון על פני התא, הכנת דגימה לאחר מכן, ניתוח באמצעות פלטפורמת LC-MS/MS ועיבוד נתונים עם תוכנה מיוחדת.

פרוטוקול זה מאפשר לנו לחקור אנטיגנים הנמצאים על פני התא של סוגי תאים שונים כדי למצוא אנטיגנים ספציפיים לסוג התא או הרקמה הזה. הטכניקה שאנו מציגים כאן מאפשרת העשרה של חלבוני קרום התא מתוך ליזאט של תא שלם, בסופו של דבר לניתוח על ידי פרוטאומיקה מבוססת ספקטרומטריית מסה. אז יישום ספציפי אחד של פרוטוקול זה הוא ליישם אותו על תאי גידול כדי לחפש אנטיגנים הנמצאים על פני השטח של אותם תאים סרטניים ולא תאים נורמליים שיכולים לשמש כמטרות חדשות לאימונותרפיה של סרטן.

דבר אחד שיש לציין לגבי פרוטוקול זה הוא שיכול להיות חשוב לייעל את קלט הדגימה שלך לניסוי המעניין שלך. לכן ייתכן שיידרשו מספר איטרציות או טיטרציות כדי למצוא את התנאים האופטימליים. אז מי שידגים את ההליך יהיה אקול נאיק, מומחה זוטר מהמעבדה שלנו.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

לכידת פני התא כימות ללא תווית פרוטאום פני התא ספקטרומטריית מסה פרוטאומיקה תאי גידול אימונותרפיה לסרטן גלולת תאים עם תווית ביוטין מאגר ליזה שרף אגרוז NeutrAvidin סעפת ואקום מאגר כביסה דגירה של ליזאט צינור מיקרוצנטריפוגה קושר חלבון

Related Videos

Labelling סלקטיבי של חלבונים על פני קרום התא באמצעות CyDye DIGE צבעים פלואוריד מינימלי

14:43

Labelling סלקטיבי של חלבונים על פני קרום התא באמצעות CyDye DIGE צבעים פלואוריד מינימלי

Related Videos

15.7K Views

Glycopeptide לכידת לפרוטאומיקה פני התא

10:11

Glycopeptide לכידת לפרוטאומיקה פני התא

Related Videos

11.8K Views

זרימת עבודה עבור גבוהה תוכן, כימות תא יחידה של פלורסנט סמנים מUniversal מיקרוסקופים נתונים, הנתמכים על ידי תוכנות קוד פתוחות

09:57

זרימת עבודה עבור גבוהה תוכן, כימות תא יחידה של פלורסנט סמנים מUniversal מיקרוסקופים נתונים, הנתמכים על ידי תוכנות קוד פתוחות

Related Videos

13.6K Views

טכניקה ללא תווית להדמית החלל-הזמן של פרשות תא בודדת

09:09

טכניקה ללא תווית להדמית החלל-הזמן של פרשות תא בודדת

Related Videos

9.1K Views

זיהוי של חלבונים קושרי מולקולה קטנים בסביבה נייד Native ידי תיוג Live- תא Photoaffinity

10:49

זיהוי של חלבונים קושרי מולקולה קטנים בסביבה נייד Native ידי תיוג Live- תא Photoaffinity

Related Videos

13.4K Views

פרוטאום עמוק פרופיל על ידי תיוג Isobaric, מקיף כרומטוגרפיה נוזלית, ספקטרומטר מסה תוכנה בסיוע כמת

10:37

פרוטאום עמוק פרופיל על ידי תיוג Isobaric, מקיף כרומטוגרפיה נוזלית, ספקטרומטר מסה תוכנה בסיוע כמת

Related Videos

12.8K Views

ויבתר חלבון רב מתחמי איתות על ידי טיהור זיקה קומפלמנטציה ריאקציה דו-מולקולרית (BiCAP)

06:45

ויבתר חלבון רב מתחמי איתות על ידי טיהור זיקה קומפלמנטציה ריאקציה דו-מולקולרית (BiCAP)

Related Videos

8K Views

ללא תווית הדמיה של יחיד חלבונים מופרש מתאי חי דרך iSCAT מיקרוסקופ

10:55

ללא תווית הדמיה של יחיד חלבונים מופרש מתאי חי דרך iSCAT מיקרוסקופ

Related Videos

18.6K Views

פרוטאום ברוחב כימות של תיוג הומוגניות ברמת מולקולה בודדת

08:29

פרוטאום ברוחב כימות של תיוג הומוגניות ברמת מולקולה בודדת

Related Videos

6.6K Views

Immunoprecipitation ללא תווית של זרימת עבודה בהיקפים גדולים של החברה ליצירת פרופיל רב-ממדי של Interactome גרעינית

11:19

Immunoprecipitation ללא תווית של זרימת עבודה בהיקפים גדולים של החברה ליצירת פרופיל רב-ממדי של Interactome גרעינית

Related Videos

17.2K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code