Tecniche di Blotting

In questo video, descriviamo il test del dot blot per quantificare un genoma virale. L'intensità del segnale è direttamente correlata alla quantità di DNA virale nel campione.

Questo video descrive la tecnica del dot-blot per determinare il livello di metilazione del DNA nei condrociti umani in vitro tramite il blotting di campioni di DNA su una membrana di nylon e la successiva visualizzazione utilizzando anticorpi monoclonali. Questo aiuta a determinare il fenotipo dei condrociti nelle varie fasi della coltura.

Questo video dimostra una tecnica quantitativa di dot blot, o QDB, per la quantificazione assoluta delle proteine di interesse in un campione di tessuto. Le proteine nel campione sono immobilizzate sulla membrana di nitrocellulosa all'interno dei pozzetti di una piastra QDB. Utilizzando anticorpi specifici per la proteina bersaglio marcati con un enzima perossidasi, un substrato chemiluminescente viene ossidato per produrre luce, che viene misurata per determinare la concentrazione proteica del...

Il video dimostra una tecnica di western blotting basata sulla normalizzazione totale delle proteine per quantificare l'espressione della proteina bersaglio in un campione. Utilizzando la colorazione proteica totale del campione, viene eseguita un'analisi raziometrica per determinare il livello di espressione relativa della proteina bersaglio.

Il video descrive una tecnica di western blotting a singola cellula che identifica la composizione di singole cellule catturate su un chip di western blotting a singola cellula in una sospensione eterogenea. La tecnica rileva l'intensità di fluorescenza del fluoroforo marcato con un marcatore proteico specifico per la cellula bersaglio.

Questo video descrive il western blotting basato sulla chemiluminescenza di lisati immunoprecipitati. La tecnica aiuta a determinare l'elaborazione e l'attivazione delle proteine. Il segnale chemiluminescente rilevato è proporzionale al livello di elaborazione delle proteine durante la sua attivazione.

In questo video, descriviamo la tecnica di Southern blotting per identificare eventi di ricombinazione omologa nel genoma di cellule staminali embrionali di topo utilizzando sonde radiomarcate. Le regioni del DNA contenenti eventi di ricombinazione omologa appaiono come bande distinte quando la membrana contenente il DNA legato alla sonda è esposta ai raggi X.

In questo video, dimostriamo il northern blot, una tecnica di ibridazione per rilevare e quantificare i microRNA (miRNA) dall'RNA totale estratto dal tessuto vegetale.