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Bioengineering

Modello murino di ulcere da pressione dopo la ferita del midollo spinale

Published: March 9, 2019 doi: 10.3791/58188

Summary

Qui, descriviamo un metodo semplice per indurre le ulcere di pressione di pelle clinicamente rilevanti (PUs) in un modello murino di ferita del midollo spinale (SCI). Questo modello può essere utilizzato in studi pre-clinici a schermo per diverse terapie per guarigione PUs nei pazienti di SCI.

Abstract

Ulcere da pressione (PUs) sono comuni debilitanti complicazioni della ferita traumatica del midollo spinale (SCI) e tendono a verificarsi nei tessuti molli intorno prominenze ossee. C'è, tuttavia, poco conosciuto circa l'impatto della SCI sulla guarigione di ferite della pelle nel contesto dei modelli animali in impostazioni sperimentali controllate. In questo studio, un modello di mouse semplice, non invasivo, riproducibile e clinicamente rilevanti di PUs nel contesto della completa SCI è presentato. Topi del maschio adulto (Balb/c, vecchio 10 settimane) erano rasati e depilati. Post-depilazione (24h), topi sono stati sottoposti a laminectomia seguita da transection completo del midollo spinale (vertebre T9-T10). Subito dopo, una piega di pelle sul retro dei topi è stata sollevata e intramezzata fra due dischi magnetici, tenuti in posizione per successivo 12 h, creando così una zona ischemica che sviluppata in un PU nei giorni successivi. Le aree ferite ha dimostrato edema del tessuto ed epidermico scomparsa dall'applicazione del post-magnete di giorno 3. PUs spontaneamente sviluppato e guarito. La guarigione era, tuttavia, più lento nei topi SCI rispetto per non-SCI topi di controllo quando la ferita è stata creata sotto il livello della SCI. per contro, si è osservata nessuna differenza nella guarigione tra topi di non-SCI SCI e controllo quando la ferita è stata creata sopra il livello di SCI. Questo modello è uno strumento potenzialmente utile per studiare la dinamica di sviluppo di PU pelle e guarigione dopo SCI, nonché di testare approcci terapeutici che possono aiutare a guarire queste ferite.

Introduction

Ulcere da pressione (PUs) sono complicazioni importanti secondarie di traumatico SCI1. PUs sono localizzate le lesioni alla pelle e/o tessuti sottostanti che di solito si verificano sulle prominenze ossee dove il peso corporeo è concentrato mentre il paziente è seduto o sdraiato1. La pelle, grasso e muscolo sono esposti a questa pressione costante che conduce allo sviluppo di ischemia localizzata, l'infiammazione dei tessuti, danni meccanici e necrosi2,3.

Lo sviluppo di PUs è influenzato da diversi fattori locali, tra cui l'entità della pressione e taglio, caricamento di durata, l'umidità della pelle e temperatura, longevità di infortuni e igiene generale della pelle. Ci sono anche fattori sistemici che svolgono un ruolo, come condizione fisica generale, osso e morfologia del tessuto del muscolo e forza4, età del paziente, misure ematologiche, sesso e fattori anche socio-economici tra cui lo stato civile, istruzione, e reddito4,5.

La prevenzione ed il trattamento di PUs rimangono sfide significative nei pazienti di SCI. Pazienti di SCI si sviluppano PUs in ~ 30-40% dei casi, con un tasso di re-avvenimento del 60-85%, probabilmente a causa del debole tessuto cicatriziale e la mancanza di sensazione protettiva1. Così, PUs spesso porta a ri-ospedalizzazione dei pazienti di SCI e nel complesso rappresentano un onere finanziario significativo (80% solo più vs SCI) al sistema di assistenza sanitaria5,6,7,8,9 , 10.

Al meglio della nostra conoscenza, ci sono stati studi in controllato impostazioni sperimentali per studiare l'impatto di SCI sul processo di guarigione PU a causa della mancanza di idonei modelli animali. Qui, un modello riproducibile e clinicamente rilevanti del mouse di PU in pelle è descritto. Questo modello può essere utilizzato per studiare la dinamica dell'inizio di PU e la guarigione successiva, nonché per testare potenziali approcci terapeutici per prevenire PU o migliorare PU guarigione nel contesto di SCI.

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Protocol

Tutti gli animali gestione e le procedure chirurgiche sono state eseguite in conformità con un protocollo approvato dal comitato di uso e Rutgers University istituzionale Animal Care. Topi sono stati alimentati dieta standard e acqua ad libitum.

1. preparazione di strumenti chirurgici e Non chirurgici

  1. Sterilizzare gli strumenti chirurgici e non chirurgici in autoclave.
  2. Pulire il tavolo operatorio chirurgico con etanolo al 70% e caldo un rilievo di riscaldamento a 37 ° C.
  3. Collocare il dissipatore di calore sul tavolo operatorio e coprirlo con teli chirurgici sterili.
    Nota: In tutte le procedure di sopravvivenza, la tecnica "No Touch" è usata qui per mantenere la sterilità.

2. preparazione di animali e di eseguire la laminectomia spinale T9-T10

  1. Procurarsi i topi (Balb/c) 10-settimana-vecchio maschio adulti. Indurre l'anestesia in ogni animale con un inizio di inalatore con isoflurano 5% e quindi diminuire a 2-3% per mantenere la sedazione per il resto delle procedure.
  2. Confermare la completa anestesia suscitando nessuna risposta ad una stimolazione di nocicezione pizzico indotto coda/zampa.
  3. Radersi i capelli sopra il dorsum (testa alla coda) con un clipper elettrico e quindi applicare la crema depilatoria (3 min) per rimuovere i capelli rimanenti. Infine, lavare il dorsum con esecuzione di macchia di acqua/bagnato e restituire gli animali nelle loro gabbie.
    Nota: Ciò è necessario per evitare ulteriori irritazioni alla pelle e contaminazione chimica al momento del ferimento di pelle
  4. Il giorno successivo, applicare unguento oftalmico per le cornee per proteggere gli occhi dalla disidratazione durante la procedura chirurgica e poi, strofinare la pelle con 3 preparazioni alternative di betadine scrub e 70% di etanolo.
  5. Con un bisturi, è necessario eseguire un'incisione della pelle (~1.0-1.5 cm) lungo la linea mediana sul retro a livello delle vertebre T8-T12.
    Nota: Il livello delle vertebre viene identificato mediante il conteggio indietro la vertebra da T13 utilizzando la posizione delle nervature di galleggiante che corrispondono al T13 vertebra11,12.
  6. Deselezionare il tessuto adiposo sottocutaneo per ottenere accesso ai muscoli di paraspinal e poi li sezionava lentamente per esporre i processi spinous e le lamine su entrambi i lati.
    Nota: Fare questa procedura con molta attenzione per evitare il sanguinamento in eccesso o qualsiasi lesione al midollo spinale, a questo punto.
  7. Eseguire un laminectomy per esporre la colonna vertebrale (vertebre T9-T10) di staccando delicatamente la lamina spinale usando il forcipe microdissecting.
    Nota: Eseguire la laminectomia in modo che un eccesso del midollo spinale è esposto per facilitare la creazione della ferita. Nel gruppo di controllo, viene eseguita solo la laminectomia.

3. eseguire la lesione completa del midollo spinale T9-T10

  1. Usando il forcipe, sicuro la colonna spinale T8 e ascensore fino ad per esagerare la curvatura spinale.
  2. Utilizzando le forbici bene, sezione del midollo tra la vertebra T9 e T10 tutto il senso al pavimento del canale vertebrale, affinché la transection completo.
  3. Dopo aver osservato il transection completo sotto un microscopio operatorio, è necessario applicare un pezzo di grasso sottocutaneo sopra il sito di laminectomia per fornire ulteriore protezione al midollo spinale prima della chiusura del sito chirurgico.
  4. Infine, chiudere la ferita e suturare i muscoli paravertebrali, fascia superficiale, mediante sutura continua e quindi chiudere la pelle mediante sutura clip12.
  5. Post-SCI, osservare il movimento di viscere il giorno successivo; Tuttavia, il gestore di vescica urinaria di evacuazione manuale della vescica.
    Nota: La scala di Mouse Basso (BMS) può essere utilizzato per monitorare i progressi del hindlimb recupero funzionale post-SCI al giorno 2 e poi settimanale, Vedi complementare figura 111,12,13.

4. induzione di ulcera di pressione della pelle dopo SCI completa

  1. Immediatamente dopo l'intervento SCI, macchia il dorso dell'animale con betadine e 70% di alcol.
  2. Per un PU sotto il sito SCI, iniettare nella pelle dorsale vicino l'osso sacro, un volume molto piccolo (10 µ l) di soluzione di bupivacaina 0,125% utilizzando un ago 25 G al equidistanti posti ~0.5-1.0 cm tra loro, in un ellisse intorno al sito di applicazione del magnete.
    Nota: Per un PU sopra il sito SCI, iniettare la pelle dorsale vicino alla regione cervicale.
  3. Sollevare una piega di pelle sul retro del mouse delicatamente e a sandwich tra 2 dischi magnetici (5 × 12 mm di diametro, 2,4 g ciascuna, forza magnetica 3800g) (Figura 1). 11 , 12
  4. Subito dopo inserito l'applicazione del magnete, ritorno gli animali nelle gabbie singole un rilievo di riscaldamento fino a quando è piena coscienza riguadagnata (Figura 1).
  5. Dopo 12 h di applicazione del magnete, leggermente anestetizzare l'animale con isoflurano e rimuovere i magneti. Fotografare i siti di ferita, per registrare l'aspetto iniziale del PU (giorno 0 tempo di punto). Coprire la ferita con la pellicola di medicazioni trasparenti (3M) essiccazione o contaminazione.

5. post-operatorio cura degli animali, l'eutanasia e raccolta di tessuto per istologia

  1. Subito dopo della chirurgia, iniettare l'animale con 1 mL di soluzione fisiologica allo 0,9% per via sottocutanea per l'idratazione.
  2. Iniettare per via sottocutanea buprenorfina-SR (1 mg/kg) immediatamente per analgesia.
  3. Iniettare per via sottocutanea animale quotidiano meloxicam (1 mg/kg) e cefazolina (50 mg/kg per 3-7 giorni) e due volte il evacuazione giornaliera di manuale della vescica.
  4. Posizionare gli animali in gabbie singole e fornire cibo accessibile e acqua ad libitum. Topi con SCI completa possono camminare con le loro zampe anteriori e avvicinarsi al cibo e acqua senza alcuna difficoltà.
  5. Rimuovere la clip chirurgiche 7 giorni dopo l'intervento chirurgico SCI.
  6. Presso i punti di tempo desiderato dopo SCI e ferendone pelle, eutanasia animali da inalazione di CO2 (3-5 min.), in conformità degli orientamenti AVMA eutanasia14.
  7. Raccogliere campioni di pelle ferita, fissare in formalina al 10% per 24 h e quindi memorizzare in etanolo al 70% a 4 ° C fino al sezionamento.
  8. Per elaborare tessuti, incorporare in paraffina e generare sezioni sottili (5 µm) su un microtomo. Macchia con ematossilina ed eosina (H & E) per visualizzare la morfologia del tessuto (Figura 3). Per gli studi di immunoistochimica (Figura 4), macchia sezioni utilizzando gli anticorpi adatti per Ki67 (proliferazione), CD31 (angiogenesi) e l'actina alfa-liscia del muscolo (α-SMA) come descritto nel Kumar et al.12
    Nota: Software di analisi di immagine consente di quantificare le caratteristiche di immagine12.

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Representative Results

Questo protocollo crea un PU nella cornice del completo SCI. brevemente (come illustrato nella Figura 1), tutti i mouse con o senza SCI completa tollerato i magneti molto bene, che è rimasto nella loro posizione originale per la versione completa 12h (figure 1C, 1D, 1f, 1h ). Tutti i topi hanno sviluppato due ferite circolari separate da un ponte di tessuto normale (Figura 1e, 1G, 1i). La risposta iniziale ferimento era simile nei topi senza SCI (Figura 1e), o con SCI sotto il sito SCI (Figura 1 g) o sopra il sito SCI (Figura 1i).

Figura 2 descrive la scomparsa dell'epidermide di giorno 3 del post magnete rimozione e la ricomparsa di giorno 7, seppur con una migrazione significativamente più lenta nelle ferite create sotto il livello del SIC in topi SCI.

Le ferite di pressione sono state classificate secondo i criteri precedentemente pubblicati12. Figura 3 e Figura 4 raffigurano le caratteristiche curative in SCI e SCI non topi di controllo. Il gruppo SCI ha esibito più lenta guarigione, area cicatriziale più grande, più sottile epidermide e derma e bassa densità delle cellule di proliferazione (Ki67+ cellule), vasi sanguigni (CD31+ cellule) e l'actina alfa-liscia del muscolo (α-SMA+) nelle ferite della pelle 11 , 12.

Quando le ferite della pelle sono state create sopra il livello del SIC, come mostrato in Figura 5, nessun cambiamento nel tempo di guarigione, epidermico e dermico spessori o area cicatriziale è stato visto rispetto ai controlli non-SCI.

Figure 1
Figura 1 : Procedura sperimentale per la creazione di pressione ferite nella non-SCI (n = 3) e completare-SCI topi (n = 3). Dopo 1 settimana assuefazione in laboratorio, i topi erano rasati e depilate (un). Schema di posizionamento del disco magnetico (M) (b, per l'ultima volta da Stadler et al.15). Posizionamento dei dischi magnetici sul dorsum della pelle di un topo normale e la sua attività dopo il recupero dall'anestesia nella gabbia (d, c). Nei topi di SCI, dischi possono essere posizionati di sotto (f) o sopra (h) SIC sito. La zona della ferita di magnete-indotta della pelle è visibile subito dopo 12 h di M applicazione, che mostra 2 ferite separate da un ponte di pelle intatta nel non-SCI (e) e topi SCI (g, i). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura. 

Figure 2
Figura 2 : Pelle ferita istologia (H & E macchia) e larghezza della ferita epidermica. Il giorno 3 e giorno 7 dopo l'applicazione di M, un insieme di topi sono stati sacrificati nei gruppi di completare-SCI (SCI + M) per studiare i primi effetti M-indotta ischemia e poi riperfusione e non-SCI (CTRL + M). Le frecce indicano i bordi della ferita epidermica, situati dove il rivestimento epiteliale si dirada e scomparirà. Barra della scala = 1 mm. larghezza della ferita epidermica come misurato in ogni gruppo (n = 3 in ogni punto del tempo) è rappresentato nel diagramma in basso pannello bar. Significatività statistica determinata dal test t di Student. * p < 0.05 e * * p < 0.01. I dati sono presentati come media ± SEM (errore standard della media). Questa figura è stata modificata con il permesso dal giornale di Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), pubblicato da Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figure 3
Figura 3 : Impatto della SCI completa per lo sviluppo di M-indotto PU e guarigione. (una) rappresentante immagini di ferite della pelle nei topi di completare-SCI (SCI + M) dopo induzione PU durante il periodo di 21 giorni e non-SCI (CTRL + M). Barra della scala = 1 cm. (b) Quantified ferita immagini che mostrano la frazione di chiusura della ferita come funzione del tempo. (c, d) Immagini rappresentative delle ferite rimarginate mostrando l'area cicatriziale nei non-SCI e SCI nei topi. (e), quantificati area cicatriziale in non-SCI contro i topi SCI. (f, g) Rappresentanza istologia della pelle ferita curativa (H & E che macchia) Mostra epidermide (E, doppie frecce), derma (D, grandi doppie frecce) e strato di grasso (F). Barra della scala = 100 µm. (h) quantificazione di spessore epidermici e dermici delle ferite rimarginate in fase di chiusura della ferita (non-SCI in 21 giorni e 35 giorni per topi SCI). I dati sono presentati come mean±SEM. significatività statistica determinata mediante ANOVA seguita da test di LSD di post hoc Fisher e test t di Student. * p < 0,05, * * p < 0.01, e * * * p < 0,001. Questa figura è stata ristampata con il permesso dal giornale di Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), pubblicato da Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figure 4
Figura 4 : Espressione di Ki67, CD31 e a-SMA in ulcere della pelle di non-SCI e SCI topi. Tessuti arrotolati sono state raccolte dopo la chiusura della ferita, vale a dire su induzione post-PU giorni 21 (controllo + M) e 35 (SCI + M). Immagini rappresentative di 5 µm spessore sezioni colorate con anti-Ki67, anti-CD31 o anti-α-SMA e visualizzato con un obiettivo 40x. Immagini rappresentative di non-SCI (a, d, g) e SCI (b, e, h) topi mostrano la distribuzione di Ki67+, CD31+e α-SMA+ (punto di frecce macchia marrone, rosso per alcune aree macchiate) . Zona % positivo dell'espressione come ottenuti da analisi dell'immagine viene confrontata fra i gruppi (c, f, i). L'area è stata in media da tre 40 x campi (due bordi della ferita) e una dal centro della ferita per ogni sezione (2/mouse, 3 topi in ogni gruppo). I dati sono presentati come media ± SEM. Statistical significato è stata determinata mediante test t di Student. Questa figura è stata ristampata con il permesso dal giornale di Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), pubblicato da Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figure 5
Figura 5 : SIC di impatto sullo sviluppo e la guarigione delle ulcere sopra il sito SCI. Immagini rappresentative delle ulcere nel non-SCI (CTRL + M) e topi SCI (SCI + M) oltre il periodo di osservazione (un). Barra della scala = 1 cm. La cicatrice sulla zona il giorno 21 è rappresentata dai cerchi (a) e i valori erano una media nei non-SCI e SCI nei topi (b). Quantificati ferita immagini che mostrano la frazione di chiusura della ferita come funzione del tempo (c). Istologia rappresentativo delle ulcere cutanee guarito risultati (E, piccola freccia doppia) di epidermide e derma (D, grande doppia freccia). Barra della scala = 100 µm (d). Quantificazione di spessore epidermici e dermici delle ulcere della pelle guarito in fase di chiusura della ferita (giorno 21). I dati sono presentati come media ± SEM. Statistical significato determinato mediante ANOVA seguita da di posthoc Fisher LSD test, o test t di Student. NS-statisticamente non significativo. Questa figura è stata modificata e ristampata con il permesso dal giornale di Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), pubblicato da Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura. 

Complementare Figura 1: funzione motoria nei topi di SCI è stata valutata utilizzando il Punteggio di BMS post-infortunio giorno 2 e poi settimanale. Il Punteggio di BMS al 2 ° giorno e settimana 5 era 0.058 ±0.058 (mediana, 0-no movimento, n = 17) e 0.35±0.12 (n = 17, mediana-0). I dati sono rappresentati come mean±SEM. Questa figura è stata modificata e ristampata con il permesso dal giornale di Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), pubblicato da Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12Per favore clicca qui per scaricare questa figura.

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Discussion

Il protocollo in questo studio descrive un nuovo modello sperimentale di PUs per valutare l'impatto della SCI sulla guarigione della ferita. La pelle di PUs sono state indotte tramite un'applicazione di 12h di due magneti di disco di diametro di 12 mm su una piega di pelle dorsale, impostare sopra o sotto il sito SCI. I dati mostrano che SCI rallenta cicatrizzazione della pelle nei topi. D'importanza, queste osservazioni sono state fatte in particolare nelle ferite della pelle sotto il livello di innervazione del SIC, come ferite fatte sopra il livello SCI, e così che è rimasto innervate, erano in gran parte inalterati nel loro modello di guarigione rispetto ai topi non-SCI.

Il protocollo di PU descritto nel presente documento si basa su un metodo precedentemente pubblicato utilizzato nei topi, dove i più deboli magneti (1000 Gauss) sono state applicate in tre cicli di applicazione del magnete 12h separate da 12 h senza magnete15. Inizialmente, abbiamo confrontato utilizzando uno, due e tre cicli di 12 h di applicazione del magnete. Uno svantaggio dell'utilizzo di applicazioni ripetute è che ogni volta deve prestare particolare attenzione a staccare il magnete dalla piega della pelle e riapplicarlo nella stessa posizione esatta. Una singola applicazione è quindi molto più semplice e fu sufficiente a creare un PU nella piega di pelle dorsale del mouse. In caso contrario, questa metodologia non richiede un dispositivo complesso, non altera i movimenti degli animali ed è molto riproducibile. Studi utilizzando magnete diverse dimensioni, forme, e o punti di forza, o il tentativo di creare PUs nelle posizioni anatomiche differenti potrebbero essere necessario riottimizzare il protocollo. Come in tutti gli studi guarigione di ferite della pelle, è importante applicare correttamente e cambiare regolarmente la pellicola trasparente che copre per evitare l'essiccazione e la contaminazione del letto della ferita.

Il meccanismo di formazione di PU in questo modello si basa sulla forza di compressione tra due magneti, che dovrebbe sostanzialmente superare le pressioni di perfusione capillare e venosa nella pelle e in precedenza è stato ben documentato per indurre lesioni nel più grande animali16. Utilizzando un ciclo singolo 12 h creato un'ulcera della pelle che ha avuto lesioni allungabile profondità nel derma, che corrisponde agli stadi I e II, secondo criteri standard15. Una limitazione di questa tecnica è che non eravamo in grado di ottenere una fase III-IV PU. Pertanto, non si potrebbe studiare il coinvolgimento dei muscoli e delle ossa PU sviluppo e guarigione senza modifiche significative al nostro attuale modello. Inoltre, il PUs generiamo guarire spontaneamente e, pertanto, non rappresentano fedelmente un PU cronica come potrebbe essere visto in pazienti umani. È interessante notare, tuttavia, il metodo è provocato da un PU Dimensioni iniziali simili che chiuso con ferite simili di pelle di excisional di pieno-spessore 1 cm x 1 cm dinamiche come comunemente usato. Il metodo di induzione PU Risparmia il sottostante carnosus del pannicolo, mentre viene completamente rimosso nel modello di excisional. Quindi, sembra che il carnosus del pannicolo non gioca un ruolo importante nel processo di chiusura della ferita, che, nei topi e altri roditori, principalmente si verifica tramite contrazione mediata dai fibroblasti e miofibroblasti nel derma praticabile che circonda il sito della ferita, con piccola cicatrice formazione17.

Il sito di induzione in PU, sopra o sotto SCI, non interferisce con l'incisione della pelle utilizzata per accedere al sito di SCI. Di conseguenza, il metodo può essere applicato facilmente di sotto o sopra il livello del SIC, che consente di studi che possono differenziare il locale vs effetti sistemici dello SCI sulla guarigione della ferita. Mentre gli animali non-SCI continuano ad aumentare di peso dopo induzione PU, la crescita degli animali SCI è stentata. Nonostante questo profondo cambiamento sistemico, la guarigione della ferita non è stata colpita quando il PU è stato creato sopra il livello SCI. Questo modello è, quindi, utilizzabile per comprendere meglio il ruolo dell'innervazione locale nella guarigione delle ferite. Come in tutti gli studi che coinvolgono SCI, è importante fornire cure speciali e monitoraggio ai topi post-SCI, che richiedono lo svuotamento manuale della vescica, monitoraggio delle condizioni intestinali e un trattamento antibiotico profilattico11,12 .

Pazienti di SCI sono sostanzialmente contestati anche con le migliori cure ospedaliere e formazione e pelle PUs imparto costi significativi per il sistema sanitario americano. Questo modello permette di side-by-side valutazione dell'effetto della SCI sullo sviluppo di PU pelle e guarigione, che fornisce una piattaforma per testare varie strategie terapeutiche che aiutino PU guarigione nei pazienti di SCI.

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Disclosures

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Acknowledgments

Questo lavoro è stato parzialmente supportato dalla New Jersey, il midollo spinale Research (CSCR15IRG010), il Ministero della difesa (SC160029) e Yale dipartimento di chirurgia Ohse Research Grant programma. Grazie Sean o ' Leary dal W.M. Keck Center for Neuroscience collaborativo, Rutgers per assistenza tecnica.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Magnets Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO CD14C 3800 G Magnetic force
Mice standard diet PMI Nutrition International, Brentwood, MO Standard Food Pellet
Isoflurane HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 029405
ImageJ NIH, Bethesda, MD Image Analysis Software
BETADINE Surgical Scrub HENRY SCHEIN Animal Health 
Ophthalmic Ointment  HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 008897
NAIR-Hair Remover Lotion Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ
ELOXIJECT (meloxicam) Injection HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 049755 5 mg/mL, 10 mL
Cefazolin Sodium HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 054846 1 g, 10 mL bottle
Buprenorphine-SR  ZooPharm, Windsor, CO - -
0.9% Sodium Chloride Injection USP BRAUN, Irvine, CA S8004-5384
10% Neutral Buffered Formalin  VWR, Radnor, PA 16004-130
BALB/C Male Mouse Charles River Lab., Wilmington, MA 28
Sterile Cotton Tipped Applicator Puritan, Guilford, ME SKU#: 25-806
Michel Suture Clips Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA 12040-01
Surgical Suture, U.S.P. Henry Schein Animal Health  101-2636

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Kumar, S., Tan, Y., Yarmush, M. L.,More

Kumar, S., Tan, Y., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury. J. Vis. Exp. (145), e58188, doi:10.3791/58188 (2019).

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