drosofila Quantificazione della giunzione neuromuscolare (NMJ): un metodo per valutare la morfologia e la funzione sinaptica

- In primo luogo, immunocolorare le larve di Drosophila con marcatori che evidenziano diversi aspetti delle NMJ o giunzioni neuromuscolari. Questa è la regione in cui la terminazione di un assone del motoneurone entra in contatto con un muscolo e la sua morfologia viene utilizzata come lettura della funzione sinaptica.

L'assone termina in diversi rami che formano rigonfiamenti chiamati bottoni. I neurotrasmettitori vengono rilasciati dai bottoni e causano la contrazione muscolare. Le aree di rilascio dei neurotrasmettitori sono chiamate zone attive. Qui un marcatore è specifico per una proteina sinaptica che delinea l'NMJ, e l'altro marcatore è per una proteina presente nelle zone attive.

Successivamente, acquisisci immagini NMJ utilizzando la microscopia e valuta quantitativamente la loro morfologia con un software di analisi delle immagini semiautomatico. Applica una serie preimpostata di comandi software alle immagini. I file di output contengono immagini NMJ analizzate e risultati morfologici. Le caratteristiche che possono essere misurate includono il numero e l'area superficiale dei bout, la lunghezza NMJ e il numero di rami, il numero di compartimenti NMJ non collegati e il