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Encyclopedia of Experiments: Biology

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제브라피시 심근병증 모델

 
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제브라피시 심근병증 모델: 약물 유발 심폐 독성

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- 심근병증은 심장 근육이 약해지고 혈액을 펌핑하는 능력을 잃는 상태입니다. 조건은 제브라피시에서 복제될 수 있습니다. 첫째, 행크스의 균형 잡힌 소금 용액에서 심장 독성을 담당하는 약물의 스톡 용액을 희석하여 여러 작업 농도를 준비합니다.

이제 바늘을 1~2밀리미터의 복막 구멍으로 부드럽게 밀어 넣고 천천히 약물 용액을 주입합니다. 바늘을 꺼내서 용액이 누출되는 것을 막기 위해 5초 기다립니다. 즉시 물고기를 신선한 시스템 물을 함유한 깨끗한 탱크로 옮깁니다.

약물 농도에 대한 시간이 지남에 따라 생존 확률을 나타내는 그래프인 생존 곡선을 만듭니다.

DOX로 물고기를 주입하기 전에, 24시간 동안 물고기를 빠르게 한다. 다음으로, 물고기를 그룹화하여 물고기를 건조하고 체중을 측정합니다. 그룹이 동일한 투여량의 DOX를 주입할 있도록 동일한 체중의 10% 이내의 물고기 그룹을 만들고 그룹은 5개의 마이크로리터로 투여되도록 DOX의 작업 농도를 계산합니다.

그런 다음 DOX의 육수를 1x HBSS로 희석한 다음 희석을 소용돌이로 혼합한 다음 펄스 스핀을 사용하여 튜브에 함께 풀링됩니다. 주입 플랫폼을 준비합니다.

다음으로, 34 게이지 바늘에, 10 마이크로 리터 마이크로 시링지를 부착. 다음, 주사기와 튜브에서 거품이나 블록을 제거하기 위해 1 x HBSS로 바늘을 헹구는. 지금, 간략하게 트리카인으로 성인 물고기를 마취.

그런 다음, 모든 DOX 용액을 천천히 풀어 놓습니다. 바늘을 철회하기 전에 5정도 기다립니다.

주사 후, 물고기를 재빨리 담수로 가득 찬 깨끗한 횡단 탱크로 옮기고 HBSS로 바늘을 헹구고 다음 물고기를 주입합니다. 나중에 주입 된 물고기를 순환을 실행하는 시스템으로 되돌리지만 교차 오염을 피하기 위해 메인 시스템과 분리됩니다.

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