Espansione ex vivo di cellule natural killer da cellule mononucleate del sangue periferico

Le cellule natural killer, NK, sono grandi linfociti granulari che eliminano i tumori e le infezioni microbiche.

Per l'espansione ex vivo delle cellule NK, assumere una sospensione di cellule mononucleate del sangue periferico, PBMC, contenenti una popolazione eterogenea di linfociti, comprese le cellule NK. Aggiungere cellule feeder irradiate – cellule linfoblastoidi non proliferanti – che esprimono l'interleuchina 21 legata alla membrana, mIL-21, necessaria per attivare ed espandere le cellule NK.

Aggiungere la co-coltura in un pozzetto di coltura specializzato con una membrana permeabile ai gas sul fondo, che consente lo scambio di gas. Le cellule si depositano e proliferano per un periodo prolungato senza richiedere il passaggio.

Aggiungere l'interleuchina 2, IL-2 e l'interleuchina 15, IL-15, citochine per la proliferazione delle cellule NK. Incubare per un periodo adeguato in condizioni fisiologiche.

mIL-21 sulle cellule feeder si lega a uno specifico recettore eterodimerico sulle cellule NK. IL-15 e IL-2 esogene si legano ai rispettivi recettori. Il legame induce diverse vie di segnalazione a valle, attivando l'espressione genica, limitando la senescenza cellulare e portando