Valutazione di una giunzione neuromuscolare funzionale tramite stimolazione ottica simultanea e registrazione video

Inizia con un bioreattore con una camera muscolare contenente tessuto muscolare incorporato nel collagene supportato dai pilastri della camera.

Il canale della neurosfera contiene una neurosfera in una matrice di collagene. I motoneuroni della neurosfera esprimono canali sensibili alla luce.

Aggiungi un mezzo di differenziazione contenente fattori di crescita neurali che stimolano i neuroni a estendere le loro proiezioni.

Scambiare regolarmente il mezzo per garantire un'estensione continua dei neuroni verso il tessuto muscolare, formando giunzioni neuromuscolari.

Osservare il bioreattore al microscopio dotato di una fotocamera e di una sorgente di luce blu.

Applicare impulsi di luce blu per aprire i canali sensibili alla luce nei neuroni, consentendo agli ioni del mezzo di fluire e stimolare i neuroni a generare segnali elettrici.

Questi segnali viaggiano attraverso le proiezioni neuronali fino alle giunzioni neuromuscolari, trasmettendo il segnale elettrico al tessuto muscolare.

Registra un video contemporaneamente. Una graduale contrazione della fibra muscolare conferma lo sviluppo di una giunzione neuromuscolare funzionale.

Preparare una miscela 4 a 1 di 3 milligrammi per millil