JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:49 min. • June 17th, 2025
Inizia con un embrione di pesce zebra transgenico vivo e dechorionato incorporato in agarosio a basso punto di fusione e posto in una camera riempita con terreni embrionali.
L'embrione esprime cellule della cresta neurale marcate con proteina fluorescente verde potenziata (EGFP).
Posizionare la camera sul tavolino del microscopio. Utilizzando l'illuminazione a campo chiaro, regolare l'obiettivo per mettere a fuoco e centrare l'embrione nel campo visivo.
Passa all'obiettivo a immersione in acqua e concentrati nuovamente sull'embrione.
Regola i parametri di imaging per acquisire immagini Z-stack dal bordo laterale a quello mediale, catturando la larghezza dell'occhio.
Disattiva l'illuminazione a campo chiaro, copri il palco e avvia l'imaging time-lapse.
Riempire la camera con il fluido secondo necessità durante l'imaging.
Sotto l'illuminazione laser, le cellule della cresta neurale diventano fluorescenti.
Visualizza la migrazione di queste cellule dal tubo neurale alle regioni craniofacciali, intorno all'occhio in via di sviluppo per popolare il mesenchima perioculare e il processo frontonasale e ventralmente per formare gli archi faringei.
Dopo aver posizionato l'intera configurazione sul t
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