Visualizzazione dei modelli di proiezione assonale dei motoneuroni embrionali in Drosophila

Inizia con un tubo contenente embrioni di Drosophila in fase avanzata 16 in un terreno di montaggio.

I motoneuroni di Drosophila sono immunomarcati.

Trasferire un embrione su un vetrino e rimuoverlo dal mezzo di montaggio.

Quindi, posiziona l'embrione con il lato ventrale rivolto verso l'alto e sezionalo.

Orientare la sezione anteriore contenente i motoneuroni con il lato dorsale rivolto verso l'alto.

Usando un ago di tungsteno, taglia lungo la linea mediana dorsale e allarga la parete del corpo. Sposta l'embrione nel terreno di montaggio. Quindi, rimuovere gli organi interni per esporre i

neuroni

marcati.

Trasferire l'embrione su un nuovo vetrino, quindi montarlo e sigillarlo.

Osservare con un microscopio a contrasto di interferenza differenziale mentre la luce passa attraverso l'embrione, generando un'immagine ad alta risoluzione.

I neuroni marcati con modelli di proiezione assonale appaiono marrone scuro su uno sfondo chiaro.

I motoneuroni si ramificano in due nervi principali: i nervi intersegmentali e segmentali e un ramo minore, il nervo trasverso, che innerva i muscoli.

Per filettare gli embrioni, metterli in scena su un vetrino

Per prima cosa, spostarli in una goccia di glicerolo con