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DOI: 10.3791/50039-v
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In questo protocollo, dimostriamo la fabbricazione di substrati di coltura cellulare cardiaca biomimetica realizzati con due materiali polimerici distinti utilizzando la litografia a forza capillare. I metodi descritti forniscono una tecnica scalabile ed economica per ingegnerizzare la struttura e la funzione dei tessuti cardiaci macroscopici per applicazioni in vitro e in vivo.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di produrre substrati di coltura cellulare biomimetica per ingegnerizzare la struttura e la funzione dei tessuti cardiaci macroscopici. Ciò si ottiene fabbricando prima un master in silicone con l'architettura topografica desiderata mediante incisione ionica reattiva profonda. Il secondo passaggio consiste nel trasferire il modello topografico desiderato dal master in silicio a uno stampo PUA utilizzando la litografia a forza capillare assistita da UV.
Successivamente, lo stampo PUA viene utilizzato come modello per fabbricare substrati di coltura cellulare con vari materiali polimerici a seconda dell'applicazione desiderata tramite litografia a forza capillare assistita da UV o mediata da solvente. Il passaggio finale consiste nel placcare i cardiomiociti primari o derivati da cellule staminali sui substrati di coltura cellulare a modello nanometrico per la successiva analisi. Infine, la microscopia a campo chiaro e la microscopia a immunofluorescenza vengono utilizzate per mostrare i cambiamenti nella morfologia cellulare e nella disposizione contrattuale delle proteine all'interno dei cardiomiociti.
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