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Whole-cell patch-clamp registrazioni da Morphologically- e neurochimico-identificati interneuroni...
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JoVE Journal Neuroscience
Whole-cell Patch-clamp Recordings from Morphologically- and Neurochemically-identified Hippocampal Interneurons

Whole-cell patch-clamp registrazioni da Morphologically- e neurochimico-identificati interneuroni dell'ippocampo

Full Text
25,369 Views
14:37 min
September 30, 2014

DOI: 10.3791/51706-v

Sam A. Booker1, Jie Song1, Imre Vida1

1Institute of Integrative Neuroanatomy, NeuroCure Cluster of Excellence,Charité Universitätmedizin

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Reti corticali sono controllati da un piccolo, ma diverso insieme di interneuroni inibitori. Indagine funzionale degli interneuroni richiede quindi la registrazione mirata e l'identificazione rigorosa. Qui descritto è un approccio combinato che coinvolge le registrazioni whole-cell da coppie singole o sinapticamente-accoppiati di neuroni con etichettatura intracellulare, post-hoc analisi morfologica e immunocitochimica.

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di caratterizzare gli effetti mediati dal recettore GABA B negli interneuroni positivi alla parvalbumina dell'ippocampo identificati. Ciò si ottiene producendo prima fette acute di ippocampo di alta qualità. Il secondo passo consiste nell'utilizzare un videomicroscopio per selezionare i neuroni in base all'espressione venosa di YFP e alle caratteristiche note dei neuroni positivi all'albumina parallela.

Successivamente, si ottengono registrazioni di patch clamp su cellule intere e si utilizza la stimolazione extracellulare o le registrazioni accoppiate per esaminare gli effetti mediati dal recettore GABA B. Il passo finale consiste nel visualizzare i neuroni e confermare che i neuroni registrati sono in realtà par albumina positivi e sono neuroni inibitori parasomatici o dendritici. In definitiva, questo metodo consente la caratterizzazione degli effetti inibitori mediati dal recettore GABA B e consente una classificazione inequivocabile degli interneuroni registrati.

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Neuroscienze Issue 91 elettrofisiologia fetta acuta registrazione whole-cell patch-clamp morfologia neuronale immunocitochimica parvalbumina ippocampo l'inibizione interneuroni GABAergici trasmissione sinaptica IPSC recettore GABA-B

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