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L'uso di un high-throughput In Vitro Microfluidic sistema per sviluppare orale biofilm M...
L'uso di un high-throughput In Vitro Microfluidic sistema per sviluppare orale biofilm M...
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Use of a High-throughput In Vitro Microfluidic System to Develop Oral Multi-species Biofilms

L'uso di un high-throughput In Vitro Microfluidic sistema per sviluppare orale biofilm Multi-specie

Full Text
14,081 Views
07:09 min
December 1, 2014

DOI: 10.3791/52467-v

Derek S. Samarian1, Nicholas S. Jakubovics2, Ting L. Luo1, Alexander H. Rickard1

1Department of Epidemiology, School of Public Health,The University of Michigan, 2Centre for Oral Health Research, School of Dental Sciences,Newcastle University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

L'obiettivo di questo metodo è di descrivere l'uso di un sistema microfluidico per lo sviluppo del biofilm multispecie che contengono specie tipicamente identificate nella placca dentale sopragengivale umana. Metodi per descrivere l'architettura biofilm, la vitalità biofilm, e un approccio alla raccolta biofilm per le analisi di coltura-dipendente o indipendente dalla cultura sono evidenziati.

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di creare biofilm di placca dentale multispecie rappresentativi dal punto di vista della composizione. Parallelamente all'analisi, ciò si ottiene creando prima un terreno rappresentativo e un inoculo. L'inoculo viene quindi introdotto nel chip microfluidico dopo un'incubazione notturna, si forma un biofilm all'interno del micro canale.

Infine, il biofilm viene lavato e colorato per la microscopia a scansione laser confocale a due confocali o la microscopia a epifluorescenza. Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti come le celle a flusso è che si tratta di un sistema ad alta produttività che consente di eseguire più esperimenti in parallelo utilizzando meno materiali e non richiedendo terreni di laboratorio artificiali. Per iniziare, raccogli campioni di saliva da una coorte di cinque o più volontari in singole provette di plastica da 50 millilitri.

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