Caratterizzazione di timica assestamento Progenitori nell'embrione mouse Uso In Vivo E In Vitro Saggi

L'obiettivo generale di questa procedura è analizzare la cinetica fenotipica di generazione e il numero di cellule T prodotte dai progenitori di sedimentazione timica E 13 o E 18. Ciò si ottiene isolando prima i lobi timici da embrioni di topo E 13, E 14 ed E 18. Nella seconda fase, i lobi timici E 14 vengono irradiati e quindi colonizzati con cellule E 13 o E 18 selezionate a flusso per 48 ore in una goccia sospesa.

Nella fase finale, i lobi colonizzati vengono innestati sotto la capsula renale di topi adulti CD tre knockout. In definitiva, la citometria a flusso può essere utilizzata per valutare la presenza della progenie progenitrice di insediamento timico E 13 ed E 18 nel sangue degli animali chimerici. Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai nostri metodi esistenti, come la coltura di cellule T in vitro su cellule ine so, è che questa tecnica combina i metodi che consentono la piena maturazione delle cellule T da progenitori definiti in un saggio tridimensionale con l'innesto di colture di organi timici in topi riceventi intatti, consentendo la valutazione della differenziazione e della funzione dei progenitori della fetta timica e della progenie.