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DOI: 10.3791/56063-v
Bruna Soares Landeira1, Jéssica Alves de Medeiros Araújo1, Timm Schroeder2, Ulrich Müller3, Marcos R. Costa1
1Brain Institute,Federal University of Rio Grande do Norte, 2Department of Biosystems Science and Engineering,ETH Zurich, 3The Solomon H. Snyder Department of Neuroscience,Johns Hopkins University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article outlines a detailed protocol for time-lapse video-microscopy aimed at observing cellular behaviors in primary cerebral cortex cells. The method enables researchers to investigate the lineage progression from neural stem cells to differentiated neurons and glial cells, providing insights into neurodevelopmental processes.
La formazione immagine dal vivo è un potente strumento per studiare i comportamenti cellulari in tempo reale. Qui, descriviamo un protocollo per time-lapse video-microscopia delle cellule della corteccia cerebrale primario che consente un esame dettagliato delle fasi promulgata durante la progressione di lignaggio da cellule staminali neurali primarie a differenziato neuroni e cellule gliali.
L'obiettivo generale di questo esperimento è osservare i comportamenti cellulari durante la progressione del lignaggio dalle cellule staminali neurali ai neuroni o alle cellule gliali. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande nel campo dello sviluppo neurologico come il ruolo delle divisioni cellulari simmetriche e asimmetriche, l'allungamento del ciclo cellulare e i tassi di crescita cellulare. Il vantaggio principale di questa tecnica è che consente l'osservazione della linea cellulare per lunghi periodi.
Ciò consente l'osservazione del passaggio dalla neurogenesi alla genesi gliale all'interno di un singolo lignaggio e una comporazione diretta di progenitori neurali e gliali sublineari. Inizia rimuovendo i cervelli da 5 a 10 embrioni e14 in una capsula di Petri con mezzo di dissezione freddo. Usa il forcipe per estrarre con cura la pelle e il cranio e isolare il cervello.
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