Name: Nanosponge accordabilità in dimensioni e densità di reticolazione (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-04T11:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 15 s
Description: Scopri la sintesi di nanospugne con controllo preciso di dimensioni e densità di reticolazione per applicazioni nel rilascio controllato di farmaci. Questo metodo versatile si adatta anche ad idrogeli e microparticelle.

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LK è grato per un finanziamento tramite la National Science Foundation Graduate Research Fellowship programma (DGE-1445197) e il dipartimento di chimica Università di Vanderbilt. LK ed EH vorrei ringraziare i finanziamenti per lo strumento Osiris TEM (NSF EPS 1004083).

1. Sintesi e caratterizzazione di AVL
<ol>
	<li>Posizionare un'ancoretta magnetica all'interno di un pallone a fondo tondo da 2 colli da 500 ml (pallone 1) e sigillare con un setto di gomma e un filo d'acciaio di dimensioni adeguate. Asciugare alla fiamma il pallone per rimuovere l'umidità spurgando con azoto gassoso collegato attraverso un ago di ingresso e un ago di uscita aperto nel setto, mentre si utilizza un cannello a fiamma di butano per riscaldare delicatamente l'esterno del pallone spostando la fiamma lungo la superficie.
	<ol>
		<li>Continuare a riscaldare l'intero pallone facendo scorrere la fiamma sulla superficie fino a quando non si vede più umidità che intorbidisce l'interno del pallone. Togliete la fiamma e lasciate raffreddare il pallone a temperatura ambiente continuando il flusso di azoto per tutta la reazione.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Aggiungere 156,25 mL di tetraidrofurano anidro (THF) tramite una siringa da 30 mL al Pallone 1. Raffreddare il pallone da 1 a -78 °C con un bagno di ghiaccio secco/acetone. Monitorare la temperatura con un termometro durante tutta la reazione e aggiungere ghiaccio secco se necessario per mantenere i -78 °C. Iniziare ad agitare la barra di agitazione magnetica utilizzando una piastra di agitazione magnetica per creare un vortice delicato.</li>
	<li> Aggiungere N,N-diisopropiletilamina (DIPA) (3,30 mL, 2,3 x 10-2 mol) tramite una siringa da 5 mL, seguita dall'aggiunta goccia a goccia di 2,5 M di n-butillitio (9,34 mL, 2,3 x 10-2 mol) tramite una siringa di vetro da 10 mL dotata di meccanismo di bloccaggio dell'ago e ago metallico al pallone 1. Continuare a mescolare utilizzando una piastra di agitazione magnetica per 15 minuti a -78 °C.</li>
	<li>Asciugare alla fiamma (come descritto al punto 1.1) e spurgare con gas argon (come descritto al punto 1.1 con azoto gassoso) un pallone a fondo tondo da 100 ml (Pallone 2). Rimuovere contemporaneamente l'ingresso e l'uscita del gas argon una volta che il pallone è abbastanza freddo da poter essere toccato. Aggiungere 56 ml di THF anidro tramite una siringa da 30 ml e δ-valerolattone (VL) (1,97 ml, 2,1 x 10-2 mol) tramite una siringa da 5 ml.</li>
	<li>Aggiungere la soluzione nel pallone 2 al pallone 1 tramite una piccola cannula goccia a goccia per 45 minuti, mescolando continuamente tramite un'ancoretta magnetica. Una volta che il pallone 2 è vuoto, rimuovere la cannula e lasciare che il pallone 1 continui a mescolare per 15 minuti a -78 °C.</li>
	<li>Asciugare alla fiamma (come descritto al punto 1.1) e spurgare con gas argon (come descritto al punto 1.1 con azoto gassoso) un pallone a fondo tondo da 25 ml (Pallone 3). Rimuovere contemporaneamente l'ingresso e l'uscita del gas argon una volta che il pallone è abbastanza freddo da poter essere toccato, per mantenere una pressione positiva all'interno del pallone. Aggiungere il bromuro alleato (2,02 mL, 2,3 x 10-2 mol) e l'esametifosforamide (HMPA) (4,43 mL, 2,5 x 10-2 mol) ciascuno tramite una siringa da 5 mL.</li>
	<li>Aggiungere il pallone 3 al pallone 1 tramite una piccola cannula a goccia. Una volta che la fiaschetta 3 è vuota, rimuovere la cannula.
	<ol>
		<li>Rimuovere quanto più ghiaccio secco e acetone freddo possibile dal bagno di ghiaccio secco/acetone in cui è immerso il pallone 1 utilizzando un misurino e un bicchiere di plastica. Sostituire con acetone a temperatura ambiente per portare il bagno a -40 °C e lasciare che il pallone 1 continui ad agitare per 2 ore monitorando la temperatura. Se la temperatura supera i -40 °C, aggiungere qualche pezzetto di ghiaccio secco per raffreddare l'acetone.</li>
		<li>Riscaldare a -10 °C rimuovendo l'acetone freddo e il ghiaccio secco e sostituire con acetone a temperatura ambiente.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rimuovere il setto dal pallone 1 e spegnere la reazione con una soluzione satura di cloruro di ammonio da 150 mL agitando tramite un'ancoretta magnetica. Mettere il pallone 1 in congelatore a -20 °C per una notte per la conservazione.</li>
	<li>Togliete la fiaschetta 1 dal congelatore e lasciatela scaldare a temperatura ambiente. Versare la soluzione del pallone 1 in un imbuto separatore da 500 mL.</li>
	<li>Aggiungere 50 ml di diclorometano (DCM), tappare l'imbuto separatore e agitare delicatamente per mescolare il DCM e la miscela acquosa/THF per estrarre il prodotto nello strato organico. Raccogliere lo strato organico in un becher da 500 ml contenente un'ancoretta magnetica di dimensioni adeguate, aprendo il rubinetto dell'imbuto separatore e mettere da parte. Ripeti due volte.</li>
	<li>Raccogli tutte le sostanze organiche nello stesso becher e mescola sopra il solfato di magnesio (per rimuovere l'acqua residua) usando una piastra di agitazione magnetica fino a quando il solfato di magnesio non si aggrega più quando viene aggiunto alla soluzione. Scartare i rifiuti acquosi.</li>
	<li>Rimuovere il solfato di magnesio solido dalla soluzione del prodotto organico utilizzando una carta da filtro all'interno di un imbuto di vetro e raccogliere le sostanze organiche in un pallone a fondo tondo da 250 ml. Sciacquare la carta da filtro e il solfato di magnesio solido con l'eccesso di DCM per assicurarsi che tutto il prodotto sia raccolto.</li>
	<li>Rimuovere il solvente dal prodotto mediante evaporazione rotativa durante il riscaldamento a 30 °C e utilizzando un aspiratore d'acqua come fonte di vuoto.</li>
	<li>Purificare il prodotto grezzo mediante cromatografia su colonna10 utilizzando un gel di silice come fase stazionaria ed eluendo iniziando con il 3% di acetato di etile/esani per 1 volume di colonna (CV), aumentando il gradiente al 29% di acetato di etile/esani su 5 CV. Raccogliere le frazioni in 2 provette di vetro borosilicato da 16 x 150 mm.</li>
	<li>Eseguire la cromatografia su strato sottile utilizzando il 20% di acetato di etile/esano come eluente per determinare le frazioni del prodotto.</li>
	<li>Unire tutte le frazioni di prodotto in un pallone a fondo tondo di dimensioni adeguate e rimuovere il solvente mediante evaporazione rotativa a 40 °C. Trasferire in un flaconcino di prodotto prepesato e porre sotto vuoto a 0,05 torr per ottenere AVL puro. Caratterizzare il prodotto con 1H NMR11 (CDCl3, 400 MHz): δ 5.75 (m, 1H), 5.06 (m, 2H), 4.26 (m, 2H), 2.54 (m, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 1.54 (m, 1H). Resa: 2,07 g (70,56%).</li>
</ol>
2. Sintesi e caratterizzazione di VL- co- AVL
<ol>
	<li>Essiccare alla fiamma e spurgare con azoto gassoso un pallone a fondo tondo da 25 mL dotato di ancoretta magnetica e setto.
	<ol>
		<li>Asciugare alla fiamma il pallone per rimuovere l'umidità spurgando con azoto gassoso collegato attraverso un ago di ingresso e un ago di uscita aperto nel setto, mentre si utilizza un cannello a fiamma di butano per riscaldare delicatamente l'esterno del pallone spostando la fiamma lungo la superficie.</li>
		<li>Continuare a riscaldare l'intero pallone facendo scorrere la fiamma sulla superficie fino a quando non si vede più umidità che intorbidisce l'interno del pallone. Togliete la fiamma e lasciate raffreddare il pallone a temperatura ambiente continuando il flusso di azoto per tutta la reazione.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rimuovere rapidamente il setto dal fondo rotondo e aggiungere stagno(II) triflato (2,5 mg, 5,9 x 10-6 mol) sul fondo del pallone utilizzando una spatola. Sostituire il setto.</li>
	<li>Aggiungere 3-metil-1-butanolo (72,6 μL, 6,6 x 10-3 mol) tramite una microsiringa da 100 μL e 1,33 mL di DCM anidro tramite una siringa da 2 mL in sequenza. Mescolare con una piastra magnetica per 10 minuti.</li>
	<li>Aggiungere AVL (0,48 mL, 3,7 x 10-3 mol) e VL (1,37 mL, 1,4 x 10-2 mol) in sequenza tramite una siringa. Lasciare continuare a mescolare per 18 - 20 h. 
	NOTA: La percentuale di AVL e VL nel copolimero finale può essere modificata mediante stechiometria in questa fase.</li>
	<li>Estinguere la reazione aggiungendo ~5 ml di metanolo (MeOH). Aggiungere ~100 mg di scavenger di latta con supporto solido e mescolare per 2 ore. Filtrare per filtrazione a gravità per rimuovere il solido.</li>
	<li>Rimuovere il solvente sotto evaporazione rotante con un aspiratore d'acqua come fonte di vuoto riscaldando a 30 °C fino a quando la soluzione non è viscosa. Far precipitare la soluzione goccia a goccia in 500 mL di MeOH freddo (raffreddato con ghiaccio secco per almeno 1 ora) per produrre scaglie di solido bianco. Filtrare la soluzione mediante filtrazione sottovuoto in un imbuto contenente un disco di vetro screpolato con carta da filtro per raccogliere il solido. 
	NOTA: Se la precipitazione produce un surnatante torbido o una polvere fine che passa attraverso la carta da filtro, la soluzione del prodotto è troppo diluita. Tutto il solvente surnatante deve essere rimosso mediante evaporazione rotativa con un aspiratore d'acqua come fonte di vuoto durante il riscaldamento a 30 °C fino a quando la soluzione non è viscosa e quindi la precipitazione deve essere eseguita di nuovo.</li>
	<li>Trasferire il prodotto solido in una fiala pre-pesata con una spatola e asciugare per una notte con una pressione di vuoto elevata di 0,05 torr per raccogliere il solido bianco e traballante.</li>
	<li>Caratterizzare il polimero con 1H NMR11 (CDCl3, 400 MHz): δ 5,71 (m, 1H), 5,03 (t, 2H), 4,08 (m, 4H), 3,65 (t, 2H), 2,15 - 2,50 (m, 5H), 1,47-1,78 (m, 9H), 0,91 (d, 6H). 81,42% VL, 18,58% AVL, 2.940 g/mol, 578 g/mol unità di ripetizione di AVL. Resa: 1,43 g, (73,43%).</li>
</ol>
3. Epossidazione post-polimerizzazione per produrre unità di copolimero epossi-valerolattone (EVL)
<ol>
	<li>Aggiungere il copolimero VL-co-AVL (500 mg, 1,7 x 10-4 mol, 2.940 g/mol) a una fiala da 6 dram con un'ancoretta magnetica. Aggiungere 6,15 mL di DCM anidro alla fiala e vorticare per solubilizzare il polimero.</li>
	<li>Aggiungere acido meta-cloroperossibenzoico (mCPBA) (74,53 mg, 4,3 x 10-4 mol) a un secondo flaconcino da 6 dram. Aggiungere 6,15 mL di DCM anidro e agitare fino a quando l'mCPBA non è completamente solubilizzato. 
	NOTA: Il rapporto di conversione degli allili in epossidi può essere variato alterando la stechiometria in questo passaggio. La concentrazione finale di allile nel solvente deve essere di 0,065 M.</li>
	<li>Trasferire la soluzione mCPBA alla soluzione VL-AVL. Tappare la reazione e coprire con una pellicola di plastica di paraffina. Lasciare mescolare per 48 ore.</li>
	<li>Trasferire la miscela di reazione in un imbuto separatore da 50 mL. Aggiungere 15 ml di bicarbonato di sodio saturo, tappare l'imbuto separatore e agitare delicatamente per mescolare. Raccogliere lo strato organico contenente il prodotto in un pallone di Erlenmeyer da 50 ml con un'ancoretta magnetica di dimensioni adeguate (pallone del prodotto).
	<ol>
		<li>Aggiungere 5 mL di DCM allo strato acquoso che si trova ancora nell'imbuto separatore, chiudere e quindi agitare delicatamente. Raccogliere i prodotti organici nel pallone del prodotto. Scartare i rifiuti acquosi. Trasferire nuovamente lo strato organico in un imbuto separatore. Ripeti questo lavaggio acquoso due volte.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Aggiungere solfato di magnesio (per rimuovere eventuali residui di acqua) al pallone del prodotto mescolando su una piastra di agitazione magnetica. Continua ad aggiungere piccoli misurini di solfato di magnesio fino a quando non si raggruma più quando viene aggiunto. Utilizzare un imbuto di vetro dotato di carta da filtro per rimuovere il solfato di magnesio solido mentre si trasferisce la miscela in un pallone a fondo tondo da 50 ml.</li>
	<li>Rimuovere il solvente mediante evaporazione rotativa con un aspiratore d'acqua come fonte di vuoto e riscaldamento a 25 °C. Trasferire il contenuto del pallone a fondo tondo in un flaconcino di prodotto prepesato e rimuovere il solvente mediante evaporazione rotativa. Mettere sotto vuoto a 0,05 torr per una notte per produrre un solido bianco e ceroso.</li>
	<li>Caratterizzato da 1H NMR11 (CDCl3, 400 MHz): δ 5.71 (m, 1H), 5.03 (t, 2H), 4.08 (m, 4H), 3.65 (t, 2H), 2.94 (d, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.15-2.50 (m, 5H), 1.47-1.78 (m, 9H), 0.92 (d, 6H). 84.53% VL, 9.65% AVL, 5.82% EVL, 2.855 g/mol, 1.841 g/mol unità di ripetizione di EVL. Resa: 417,3 mg, (83,46%).</li>
</ol>
4. Sintesi e caratterizzazione di nanospugne
<ol>
	<li>Sciogliere il polimero VL-co-AVL-co-EVL (200 mg, 7,0 x 10-5 mol, 2,855 g/mol) in 20,01 mL di DCM anidro per una concentrazione di epossidi di 0,0054 M. Trasferire in un pallone a fondo tondo da 100 mL con un 14/20 neck. 
	NOTA: Per catalizzare la reazione, in questa fase è possibile aggiungere 100 μL di bicarbonato di sodio saturo acquoso.</li>
	<li>Porre il matraccio di reazione in un bagno d'olio a 50 °C. Agitare la soluzione con un vortice veloce e aggiungere 2,2'-(etilendiossi)bis(etilammina) (21,45 μl, 2,9 10-4 mol) tramite una microsiringa goccia a goccia. Montare sul collo del pallone un condensatore a camicia d'acqua attraversato da acqua fredda, munito di un adattatore per collo 14/20, e rifluire la soluzione per 12 ore. Assicurarsi che la tenuta sia molto ermetica tra il collo del pallone e il condensatore per evitare l'evaporazione del solvente.</li>
	<li>Rimuovere il solvente in eccesso dal pallone di reazione mediante evaporazione rotativa a 25 °C fino ad ottenere una soluzione viscosa.</li>
	<li>Posizionare una grande ancoretta magnetica in un bicchiere da 2 L. Tagliare una sezione di circa sei pollici di tubo per dialisi con taglio a peso molecolare (MWCO) da 10 K e piegare un'estremità, quindi chiudere con una clip per dialisi.
	<ol>
		<li>Trasferire il prodotto in un tubo per dialisi MWCO da 10 K. Sciacquare il pallone con il DCM in eccesso e trasferirlo nel tubo. Piegare la parte superiore del tubo e chiudere con una clip per dialisi dotata di un filo per appenderla. Appendere il tubo per dialisi al lato del becher utilizzando il filo e riempire il becher con DCM fino a quando il tubo per dialisi non è completamente sommerso.</li>
		<li>Posizionare su una piastra di cottura magnetica e mescolare delicatamente. Coprire il becher con un foglio di alluminio per evitare l'evaporazione del solvente. Rimuovere il solvente versandolo in un contenitore per rifiuti e sostituirlo con DCM fresco tre volte al giorno per 48 ore per rimuovere il polimero non reagito e il reticolante.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rimuovere tutto il solvente dal becher e trasferire il contenuto del tubo per dialisi in una siringa da 10 ml dotata di un filtro per siringa in politetrafluoroetilene (PTFE) da 0,45 μm. Spingere la soluzione attraverso il filtro direttamente in un flaconcino di prodotto pre-pesato per rimuovere eventuali impurità residue. Rimuovere il solvente mediante evaporazione rotativa a 25 °C, quindi porre sotto vuoto alto a 0,05 torr durante la notte per raccogliere il solido ceroso giallo chiaro.</li>
	<li>Caratterizzato da 1H NMR11 (CDCl3, 400 MHz): δ 5.71 (m, 1H), 5.03 (t, 2H), 4.08 (m, 4H), 3.60-3.67 (t, 14H), 2.94 (d, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.15-2.50 (m, 5H), 1.47-1.78 (m, 9H), 0.92 (d, 6H). Resa: 176,9 mg (88,45%).</li>
</ol>
5. Imaging TEM della morfologia e delle dimensioni delle nanospugne
<ol>
	<li>Filtrare 5 mL di acqua di coltura cellulare attraverso un filtro per siringa in PTFE da 0,2 μm.</li>
	<li>Inserire nanospugne da 0,5 mg in una provetta da centrifuga da 1,5 mL. Aggiungere 1 ml di acqua di coltura cellulare filtrata. Utilizzare un sonicatore a sonda (20 kHz, 40 a) per sonicare la soluzione con raffiche di 2 s 4 - 5 volte a temperatura ambiente fino a quando le particelle non hanno sviluppato una sospensione fine. Non utilizzare la sonicazione prolungata e non lasciare che la soluzione si riscaldi in quanto ciò causerebbe l'aggregazione.</li>
	<li>Aggiungere 30 mg di acido fosfotungstico idrato (PTA) a 1 mL di acqua filtrata per colture cellulari in una provetta da centrifuga da 1,5 mL. Agitare l'impostazione più alta per 10 s o fino a quando il PTA è completamente solubilizzato per produrre una soluzione di PTA al 3%.</li>
	<li>Utilizzare una siringa da 1 ml con ago da 22 G per aspirare 0,5 ml di soluzione di PTA al 3%. Aggiungere 4 gocce della soluzione di PTA al 3% alle particelle e agitare alla massima impostazione per 10 s. Usa un paio di pinzette a chiusura automatica per raccogliere una griglia TEM, quindi immergila rapidamente nella soluzione di particelle, tre volte. Lasciare asciugare la griglia per 5 ore sotto un coperchio per ridurre l'accumulo di polvere sulla griglia.</li>
	<li>Eseguire l'imaging TEM12 del campione utilizzando un contrasto elevato e un obiettivo da 40 μm.</li>
</ol>

<ol><li>van der Ende, A. E., Sathiyakumar, V., Diaz, R., Hallahan, D. E., Harth, E. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2010/py/b9py00272c/unauth">Linear release nanoparticle devices for advanced targeted cancer therapies with increased efficacy.</a> Polym Chem. 1 (1), 93(2010).</li>
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</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Come ottenere formati riproducibili nanosponge è di vitale importanza nelle applicazioni di consegna di droga. Più parametri nella sintesi di polimerizzazione e nanosponge influenzano la dimensione e crosslink densità della particella risultante. Tre parametri importanti sono stati identificati nella nostra analisi: peso molecolare del polimero, epossido ciondolo funzionalità e crosslinker equivalenti. Al fine di produrre una gamma di pesi molecolari e le funzionalità di epossido per la sintesi di nanosponge, la stechiom...

Tuning precisamente la densità dimensioni e reticolazione delle nanoparticelle basate su reticolazione intermolecolare è di grande importanza per influenzare e guidare il profilo di rilascio del farmaco di questi nanosistemi1. Progettazione nanosponge accordabilità, vale a dire, preparando particelle delle densità di rete diversi, dipende la funzionalità di sospensione del polimero precursore e gli equivalenti del reticolante idrofila incorporato. In questo approccio, la concentrazione del precursore e crosslinker nel solvente è importante forma nanoparticelle di una dimensione discreta, piuttosto che un gel di massa. Utilizzando quantitativi risonanza magnetica spettroscopia (RMN) come una tecnica di caratterizzazione permette la determinazione precisa della funzionalità incorporata pendente e peso molecolare del polimero. Una volta che le nanoparticelle sono formate, possono essere concentrati e solubilizzati in sostanze organiche senza avere il carattere di un nanogel.
Lavoro recente nella veicolazione delle nanoparticelle è incentrato sull'uso di poli (lattico-co-glicolico) (PLGA) self-assembled nanoparticelle2,3,4,5,6. PLGA ha legami estere degradabile che lo rendono idoneo per applicazioni di consegna di droga ed è spesso combinato con poly(ethylene glycol) (PEG) a causa della sua proprietà stealth7. Tuttavia, a causa della natura auto-assemblata di formazione di particelle PLGA, le particelle non possono essere solubilizzate in sostanze organiche per ulteriore funzionalizzazione. In contrasto con nanoparticelle PLGA, il metodo proposto offre reticolazione covalente formando una nanoparticella con dimensioni definite e morfologia, che sono stabili nel biologico e degradano in soluzioni acquose1. Vantaggi di questo approccio sono la possibilità di ulteriore funzionalizzare chimicamente la superficie del nanosponge8, e la sua stabilità in solventi organici può essere utilizzato per il post-carico delle particelle con composti farmaceutici1,9. Con questo metodo, incapsulamento di piccole molecole idrofobiche può essere realizzato mediante precipitazione in mezzi acquosi. L'idrofobicità del backbone poliestere insieme il reticolante breve idrofila conferisce a queste particelle un carattere amorfo a temperatura corporea. Inoltre, dopo la droga di caricamento, la particella può formare sospensioni bene in mezzi acquosi per essere prontamente iniettati in vivo. È il nostro obiettivo in questo lavoro per valutare i parametri per la sintesi di questi nanospugne poliestere e determinare quelli che sono di vitale importanza per la progettazione e il controllo delle dimensioni e morfologia.

<table><tbody><tr><td>2,2'-(Etilendiossi)bis(etilammina)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>385506-100ML</td><td></td></tr><tr><td>3-metil-1-butanolo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>309435-100ML</td><td>anidro, &ge; 99%</td></tr><tr><td>Acetone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>179124-4L</td><td></td></tr><tr><td>Bromuro di allile</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A29585-5G</td><td>&ge; 99%</td></tr> <tr><td>di cloruro di ammonio</td><td>Fisher Scientific</td><td>A661-500</td><td>soluzione satura in acqua deionizzata Acqua di</td></tr><tr><td>coltura cellulare</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W3500-500ML</td><td>Filtrato attraverso 0,45 &mu; m filtro per siringhe</td></tr><tr><td>Diclorometano (DCM)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>270997-100ML</td><td>anidro, &ge; 99%, contiene 40 - 150 ppm di amilene come stabilizzante</td></tr><tr><td>Acetato di etile</td><td>Fisher Scientific</td><td>E145SK-4</td><td></td></tr><tr><td>EZFlow 0.2 &mu; m Filtro per siringa</td><td>Foxx Life Sciences</td><td>386-2116-OEM</td><td>PTFE idrofilo, 13 mm</td></tr><tr><td>EZFlow 0,45 &mu; m Filtro per siringa</td><td>Foxx Life Sciences</td><td>386-3126-OEM</td><td>PTFE idrofilo, provette</td></tr><tr><td>monouso in vetro borosilicato Fisherbrand da 25 mm con estremità liscia</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-961-31</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Provette per microcentrifuga</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-666-318</td><td></td></tr><tr><td>Siringa da microlitro Hamilton da 1,5 mL, 100 &mu; L</td><td>Hamilton Company</td><td>80600</td><td>Modello 710 N SYR, NDL cementato, 22s ga, 2 in, stile punto 2</td></tr><tr><td>Esamelfosforamide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H11602-100G</td><td>&ge; 99%, contiene &le; 1.000 ppm di ossido di propilene come stabilizzante</td></tr><tr><td>Esani</td><td>Fisher Scientific</td><td>H292-4</td><td></td></tr><tr><td>Solfato di magnesio anidro</td><td>Fisher Scientific</td><td>M65-500</td><td></td></tr><tr><td>Acido meta-cloroperossibenzoico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>273031-100G</td><td>Purificato a &ge; 99% mediante lavaggio tampone</td></tr><tr><td>Metanolo (MeOH)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>322415-100ML</td><td>anidro, &ge; Soluzione di</td></tr> <tr><td>N-butillitio</td> al 99% <td>Sigma-Aldrich</td><td>230707-100ML</td><td>2,5 M in esani</td></tr><tr><td>N,N-diisopropiletilammina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>550043-500ML</td><td>&ge; 99%</td></tr><tr><td>Parafilm M</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7793-1EA</td><td></td></tr><tr><td>PELCO Pro Pinzetta inversa (a chiusura automatica)</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>5375-NM</td><td></td></tr><tr><td>Acido fosfotungstico idrato</td><td>Alfa Aesar</td><td>40116</td><td></td></tr><tr><td>Q55 Sonicatore</td><td>Qsonica</td><td>Q55-110</td><td>55 Watt, 20 kHz</td></tr><tr><td>Siliciclo di cisteina SiliaMetS</td><td></td><td>R80530B-10g</td><td></td></tr><tr><td>Clip per dialisi SnakeSkin</td><td>Thermo Scientific</td><td>68011</td><td></td></tr><tr><td>Tubo per dialisi SnakeSkin, 10K MWCO</td><td>Thermo Scientific</td><td>68100</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato di sodio</td><td>Fisher Scientific</td><td>5233-500</td><td>soluzione satura in acqua deionizzata</td></tr><tr><td>griglia TEM</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>01822-F</td><td>Carbonio ultrasottile tipo A, 400 mesh, rame, dimensione del foro della griglia approssimativa: 42 & micro; m</td></tr><tr><td>Tetraidrofurano (THF)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>401757-1L</td><td>Anidro, &ge; 99,9%,</td></tr><tr><td>trifluorometanosolfonato di stagno(II)</td> senza inibitori <td>Sigma-Aldrich</td><td>388122-1G</td><td></td></tr><tr><td>Vortex-Genie 2</td><td>Scientific Industries</td><td>SI-0236</td><td></td></tr><tr><td>Carta da filtro Whatman, grado 1</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-805H</td><td>Circles, 185 mm</td></tr><tr><td>&delta;-valerolattone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>389579-100ML</td><td>Purificato mediante distillazione sotto vuoto</td></tr></tbody></table>

nanosponge accordabilità in dimensioni e densità di reticolazione

Nanosponge Tunability in Size and Crosslinking Density

Descriviamo un protocollo per la sintesi di poliesteri lineari contenenti ciondolo epossido funzionalità e la loro incorporazione in un nanosponge con dimensioni contenute. Questo approccio inizia con la sintesi di un lattone funzionalizzato che è la chiave per la funzionalizzazione di pendente del polimero risultante. Valerolactone (VL) e allil-valerolactone (AVL) sono quindi copolimerizzati mediante polimerizzazione per apertura di anello. Modificazione post-polimerizzazione viene quindi utilizzato per installare una parte di epossido su alcuni o su tutti i gruppi di allile pendente. Chimica a resina epossidica-ammina è impiegato alle nanoparticelle di forma in una soluzione diluita di polimero e di piccola molecola diammina crosslinker basato sulla densità desiderata nanosponge dimensioni e reticolazione. Nanosponge dimensioni possono essere caratterizzati da trasmissione microscopia elettronica (TEM) imaging per determinare la dimensione e la distribuzione. Questo metodo fornisce un percorso mediante il quale altamente sintonizzabile poliesteri possono creare sintonizzabile nanoparticelle, che possono essere utilizzate per l'incapsulamento di piccola molecola farmaco. A causa della natura della spina dorsale, queste particelle sono idroliticamente ed enzimaticamente degradabile per un rilascio controllato di una vasta gamma di piccole molecole idrofobiche.

Per valutare la relazione tra i parametri di sintesi del nanosponge e la sua dimensione risultante, la concentrazione e a sospensione funzionalità di ogni precursore del polimero è importante. Nella Figura 1, un regime di successfulsynthetic delle nanospugne avviene in condizioni di reflusso dopo che incorporano entrambi precursore ai polimeri e diammina reticolante in DCM per 12 h. La concentrazione di epossidi nella soluzione è anche fondamentale per formar...

Questo articolo viene descritto un processo per la sintonizzazione la densità dimensioni e reticolazione di covalenza reticolato nanoparticelle dai poliesteri lineari contenenti funzionalità di sospensione. Adattando i parametri di sintesi (peso molecolare del polimero, incorporazione di funzionalità pendente e crosslinker equivalenti), una densità di dimensione e reticolazione di nanoparticella desiderato può essere raggiunto per le applicazioni di consegna di droga.

Nanosponge accordabilità in dimensioni e densità di reticolazione

We describe a protocol for the synthesis of linear polyesters containing pendant epoxide functionality and their incorporation into a nanosponge with ...

L'obiettivo generale di questa tecnica di sintesi di nanospongie è comprendere e utilizzare parametri di sintesi importanti per progettare e controllare le dimensioni e la morfologia. Questo metodo ti aiuterà a produrre nanoparticelle con dimensioni precise e densità di reticolazione per applicazioni di somministrazione di farmaci. Il vantaggio principale di questa tecnica è che può essere adattata a diverse densità di reticolazione di queste particelle e anche a diverse dimensioni delle stesse, un fattore molto importante in molte applicazioni in cui queste particelle verranno utilizzate.Sebbene questo metodo possa fornire indicazioni utili per la progettazione di nanoparticelle sfruttando parametri di sintesi della lana personalizzati, può essere applicato anche ad altre reti polimeriche come idrogeli e microparticelle. Rimuovere l'umidità da un pallone da 25 millilitri munito di barra magnetica agitatrice, come specificato nel protocollo testuale. Una volta raffreddato, rimuovere rapidamente il setto dal pallone e aggiungere 2,5 milligrammi di triflato di stagno nella parte più bassa del pallone, utilizzando una spatola.Sostituire il settimo. Aggiungere in sequenza 72,6 µL di 3-

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Nanosponge accordabilità in dimensioni e densità di reticolazione

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