Infezione di cellule epiteliali nasali primarie cresciute in un'interfaccia aria-liquido per caratterizzare le interazioni uomo-coronavirus-ospite

I protocolli qui descritti affrontano questioni chiave come la cinetica di replicazione, il tropismo delle cellule ospiti, l'induzione immunitaria innata e l'induzione della citotossicità nell'epitelio nasale durante le infezioni da coronavirus umani. Questo protocollo consente lo studio delle interazioni tra l'ospite e il coronavirus umano in un microambiente organoide che ricapitola da vicino le caratteristiche dell'epitelio nasale in vivo, compresa la sua popolazione cellulare eterogenea e le funzioni mucociliari. Questa tecnica può essere applicata ad altri sistemi di coltura ALI, come quelli derivati dalle vie aeree inferiori.

Inoltre, il sistema può essere utilizzato per imitare stati clinici di malattia come le vie aeree asmatiche o cistiche della fibrosi. Far crescere e differenziare l'interfaccia aria-liquido nasale, o colture ALI, in pozzetti con una camera basale e una apicale. Espandere le cellule sinonasali umane dissociate in condizioni sommerse, dopodiché rimuovere il terreno dalla camera apicale per consentire la differenziazione delle colture in un'interfaccia aria-liquido.