Name: Ottimizzazione dellerogazione di vescicole extracellulari utilizzando unimpalcatura biostampata in 3D con guaina centrale per la gestione delle ferite croniche (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Scopri la bio-stampa 3D di scaffold con guaina centrale per il rilascio controllato di vescicole extracellulari nella gestione delle ferite croniche. Questo metodo migliora la guarigione tissutale.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>23 G Ugello conico di precisione viola</td><td>Cellink</td><td>KT0000002000</td><td>Per fornire un'estrusione precisa di bioink con un intasamento minimo</td></tr><tr><td>Alginato liasi (AlgLyase)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A1603-100MG</td><td>Algyase è un enzima che degrada l'alginato.</td></tr><tr><td>Filtro ultra centrifugo Amic, 30 kDa MWCO</td><td>Merck</td><td>UFC9030</td><td>Utilizzato per lavare PKH-26 marcato-EVs</td></tr><tr><td>Kit di analisi BCA</td><td>Thermo Scientific</td><td>10678484</td><td>Per determinare la concentrazione di proteine/EVs</td></tr><tr><td>Sistema di bioprinting</td><td>Regemat</td><td>V1</td><td>Per fabbricare l'impalcatura del nucleo della guaina</td></tr><tr><td>Albumina sierica bovina (BSA)</td><td>sigma-aldrich</td><td>05470-5G</td><td>Per fermare la reazione PKH 26&nbsp;</td></tr><tr><td>Cloruro di calcio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C3306-100G</td><td>Per reticolare e stabilizzare i bioink nell'ingegneria tissutale</td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td>Sigma</td><td>2-16P</td><td>Utilizzata per l'isolamento delle vescicole extracellulari</td></tr><tr><td>Centrifuga 5810 R</td><td>Eppendorf</td><td>22625101</td><td>Utilizzata per la coltura cellulare</td></tr><tr><td>Cabina di sicurezza biologica di classe II</td><td>Telstar</td><td>Bio II Advance</td><td>Cell Culture</td></tr><tr><td>CryoCube&nbsp; Serie F570 - Congelatore ULT</td><td>Eppendorf</td><td>F571240035</td><td>Per conservare il</td></tr><tr><td>microscopio a fluorescenza</td><td>EV OLYMPUS&nbsp;</td><td>IX73P1F&nbsp;</td><td>Utilizzato per controllare il residuo di PKH-26 nel filtrato</td></tr><tr><td>Gentamicina (50 mg/mL)</td><td>Thermofisher</td><td>15750</td><td>Antibiotico per terreni di coltura cellulare</td></tr><tr><td>GlutaMAX-I CTS, (100X), liquido</td><td>Thermofisher</td><td>A12860</td><td>Integratore di terreni per colture cellulari</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7647-01-0</td><td>Preparazione del tampone&nbsp;</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Carl Roth</td><td>Art. No. 6763.3</td><td>Preparazione del tampone&nbsp;</td></tr><tr><td>La carbossimetilcellulosa ad alta viscosità (CMCh)</td><td>BDH</td><td>27929 4T</td><td>CMCh è un derivato della cellulosa solubile in acqua.</td></tr><tr><td>Incubatrice</td><td>Nuovo Brunswick</td><td> NB-170R</td> Imaging in vivo <td>per colture cellulari</td></tr><tr><td></td><td>PerkinElmer</td><td>IVIS Lumina XRMS Serie III&nbsp;</td><td>Per monitorare il rilascio di veicoli elettrici, in vivo</td></tr><tr><td>Agitatore magnetico</td><td>SalvisLAB</td><td>MC35</td><td>Per la preparazione di Bioinks</td></tr><tr><td>Kit di esosomi miRCURY per l'isolamento degli esosomi</td><td>Qiagen</td><td>76743</td><td>Isolamento Evs</td></tr><tr><td>NaOh</td><td>Daejung</td><td>1310-73-2</td><td>Preparazione del tampone&nbsp;</td></tr><tr><td>soluzione salina tamponata con fosfato(PBS)</td><td>Thermo Scientific</td><td>J61196. AP</td><td>Cell Culture:</td></tr><tr><td>PKH 26</td><td>MCE</td><td>154214-55-8</td><td>Colorante fluorescente rosso per la marcatura delle EV</td></tr><tr><td>Alginato di sodio (Alg)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A0682-100G</td><td>Polisaccaride naturale derivato dall'alga bruna.</td></tr><tr><td>Cloruro di sodio (NaCl)</td><td>Carl Roth</td><td>Art-Nr-P029.1</td><td>Preparazione tampone&nbsp;</td></tr><tr><td>StemPro BM Cellule staminali mesenchimali</td><td>Thermofisher</td><td>A1382901</td><td>Cellule staminali mesenchimali</td></tr><tr><td>StemPro MSC SFM XenoFree</td><td>Thermofisher</td><td>A1067501</td><td>Terreni di coltura cellulare</td></tr><tr><td>Tripsina 0,25%</td><td>Thermofisher</td><td>25050014</td><td>Dissociazione cellulare</td></tr><tr><td>Vortex-Mixer</td><td>Daihan Scientific</td><td>VM-10</td><td>Utilizzato per miscelare il tampone di precipitazione con il terreno condizionato</td></tr></tbody></table>

ottimizzazione dell'erogazione di vescicole extracellulari utilizzando un'impalcatura biostampata in 3d con guaina centrale per la gestione delle ferite croniche

Optimizing Extracellular Vesicle Delivery Using a Core-Sheath 3D-Bioprinted Scaffold for Chronic Wound Management

Il rilascio in vivo di EV sia dagli scaffold Alg-EVs/CMCh che da Alg-EVs/CMCh-AlgLyase è illustrato nella Figura 1B, C. Come anticipato, l'impalcatura Alg-EVs/CMCh-AlgLyase ha mostrato un profilo di rilascio più rapido rispetto ad Alg-EVs/CMCh, in particolare nei punti temporali di 2 h e 4 h. Il rilascio di vescicole extracellulari dagli idrogel è governato da una combinazione di meccanismi fisico-chimici, tra cui diffusione, rigonfiamento, erosione e degradazione<s...

Ottimizzazione dell'erogazione di vescicole extracellulari utilizzando un'impalcatura biostampata in 3D con guaina centrale per la gestione delle ferite croniche

This study outlines a detailed protocol for the fabrication of core-sheath 3D-bioprinted scaffolds designed to enhance chronic wound healing. The protocol ...

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Bioengineering

Bioingegneria

Per la creazione di strutture altamente organizzate di tessuti complessi, è necessario assemblare più materiali e tipi di cellule in un composito integrato.  Questo design combinatorio incorpora fogli cellulari stratificati specifici per organo con due materiali distinti di derivazione biologica contenenti una forte base di matrice fibrosa e cellule endoteliali per migliorare la formazione di nuovi vasi.

Ingegneria dei tessuti: Costruzione di un multicellulare 3D Ponteggio per la consegna di Layered fogli Cellulari

Un bioprinter cartesiano è stato progettato e fabbricato per consentire la deposizione di più materiali in geometrie precise e riproducibili, consentendo anche il controllo dei fattori ambientali. Utilizzando il bioprinter tridimensionale, è possibile stampare e riprodurre facilmente costrutti complessi e fattibili.

Viabilità di Bioprinted cellulari Costruisce Utilizzando un dispenser stampante cartesiana Tre

Forniamo un protocollo generalizzato basato su una strategia di multimateriali microfluidici per un letto vascolare di microfibrous, dove un tipo di cellula secondaria potrebbe essere ulteriormente seminato nello spazio interstiziale di questa struttura di microfibrous per generare organoids e tessuti vascolarizzati di ingegneria.

Vascularized microfluidic multimateriali per l'ingegneria dei tessuti e Organoids

In questo articolo viene illustrata la tecnica di espansione una stuoia di nanofibra tradizionale, due dimensioni (2D) elettrofilate in un'impalcatura di tre dimensioni (3D) attraverso la depressurizzazione del sottocritico CO2 fluido. Queste impalcature aumentate 3D, strettamente mimica cellulare nanotopographic spunti e preservare le funzioni delle molecole biologiche incapsulati all'interno delle nanofibre.

Espansione del due-dimensione elettrofilate nanofibre in tre dimensioni ponteggi

Presentato qui è un set-up biostampa tridimensionale semplice da usare, nucleo/guscio, tridimensionale per la fabbricazione in un solo passaggio di scaffold cavi, adatto per l'ingegneria tissutale di strutture vascolari e altre strutture tubolari.

Scaffold di stampa Core/shell per l'ingegneria dei tessuti di strutture tubolari

I tessuti ingegnerizzati si affidano fortemente a reti vascolari adeguate per fornire nutrienti e gas vitali e rimuovere i rifiuti metabolici. In questo lavoro, un protocollo di semina graduale di cellule endoteliali e cellule di supporto crea reti vascolari altamente organizzate in una piattaforma ad alta produttività per lo studio dello sviluppo del comportamento dei vasi in un ambiente 3D controllato.

Semina cellulare graduale su impalcature tassellate per studiare i vasi sanguigni germogliati

In questo manoscritto, dimostriamo la preparazione di un bioink idrogel bioibrido contenente grafene per l'uso nell'ingegneria dei tessuti periferici. Utilizzando questo materiale bioibrido 3D, viene eseguito il protocollo di differenziazione neurale delle cellule staminali. Questo può essere un passo importante per portare biomateriali simili alla clinica.

Preparazione e caratterizzazione di bioink idrogel bioibrido 3D a base di grafene per la neuroingegneria periferica

I lembi ingegnerizzati richiedono una rete vascolare funzionale incorporata. In questo protocollo, presentiamo un metodo per fabbricare un lembo di tessuto stampato in 3D contenente una rete vascolare gerarchica e le sue anastomosi microchirurgiche dirette all'arteria femorale di ratto.

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Questo lavoro descrive un protocollo per la stampa 3D incorporata a forma libera di cellule staminali neurali all'interno di compositi di matrice extracellulare ricottura autorigeneranti. Il protocollo consente la modellazione programmabile di costrutti di tessuto neurale umano interconnessi con alta fedeltà.

Supporto composito a matrice microgel-extracellulare per la stampa 3D embedded di costrutti neurali umani

Presentiamo un protocollo per la produzione ad alta produttività di canali vascolari con dimensioni flessibili e modelli desiderati su una piastra standard a sei pozzetti utilizzando la tecnologia di bioprinting 3D, denominata vessels-on-a-plate (VOP). Questa piattaforma ha il potenziale per far progredire lo sviluppo di terapie per i disturbi associati all'endotelio compromesso.

Metodo di bioprinting ad alta produttività per la modellazione della permeabilità vascolare in piastre standard a sei pozzetti con flessibilità di dimensioni e modelli

Scopri la bio-stampa 3D di scaffold con guaina centrale per il rilascio controllato di vescicole extracellulari nella gestione delle ferite croniche. Questo metodo migliora la guarigione tissutale.

Ottimizzazione dellerogazione di vescicole extracellulari utilizzando unimpalcatura biostampata in 3D con guaina centrale per la gestione delle ferite croniche (Video) | JoVE Journal

Ottimizzazione dell'erogazione di vescicole extracellulari utilizzando un'impalcatura biostampata in 3D con guaina centrale per la gestione delle ferite croniche

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