堆積物中のバイオ マーカーの抽出溶媒抽出を加速

加速溶媒抽出は、多数の地質堆積物サンプルから有機バイオマーカーを分離するために使用される、高速、効率的、かつハイスループットな手法です。

伝統的に、超音波処理やソックスレーなどの抽出方法が使用されますが、これらのプロトコルの欠点は、詳細な古気候の再構築に十分な材料を処理するには遅すぎることです。新しい技術であるAccelerated Solvent Extraction(ASE法)は、効率とハイスループットを念頭に置いて開発されました。

ASE法は、高温と高圧の組み合わせを使用してサンプルを抽出し、1回の比較的高速な調製実行で複数のサンプルを実行できます。

このビデオは、堆積物からバイオマーカーを抽出する方法を詳しく説明するシリーズの第3弾です。それは手順をカバーし、超音波処理またはソックスレー抽出に対するASEのメリットについての洞察を提供します。

加速溶媒抽出では、サンプルをスチールセルにロードし、スチールセルにロードします。各サンプルセルの収集バイアルも、別々のカルーセルにロードされます。この装置は、サンプルセルを内部オーブンにロードします。溶剤は、十分な圧力に達するまで、溶剤ボトルから一連のバルブを介してポンプで送り込まれます。

この圧力は、サンプルと分析物によって決定される時間一定時間保持されます。次に、溶媒をサンプルセルからスチールラインを介して対応する収集バイアルに洗い流します。このプロセスは何度も繰り返すことができます。温度、圧力、および持続時間はすべて、サンプルに合わせてカスタマイズできます。

使用される高温は抽出の動力学を増加させ、高圧は溶媒の揮発を防ぎます。コレクションバイアルには総脂質抽出物が含まれており、サンプルセルに残っているものは残留物と呼ばれます。これは、非有機材料と、ケロジェンと呼ばれる溶媒抽出性のない有機材料で構成されています。

加速溶媒抽出の原理を理解したところで、これを実験室でどのように実施するかを見てみましょう。

関心のあるサンプルを収集した後。凍結乾燥、均質化、除染は、このシリーズの別のビデオで示されているように行います。

すべてのサンプルが準備されたら、抽出する各サンプルのセルを組み立て、ブランク用に1つのセルを組み立てます。これを行うには、エンドキャップをセル本体にねじ込みます。溶剤ですすいだピンセットを使用して、燃焼ガラス繊維フィルターを各ピンセットの上に置きます。プランジャーでフィルターをゆっくりとそっと押し下げます。

各サンプルの番号で細胞体をラベル付けし、ブランクを別々にラベル付けします。燃焼させた計量缶を実験室のはかりと風袋引きに置きます。スパチュラを溶媒ですすぎ、それを使用して5〜10 gのサンプルを計量缶に移し、質量を記録します。

計量缶内のすべての材料を対応するセルに移します。別のグラスファイバーフィルターを上に置き、サンプルの上部に達するまで軽くタンピングします。

珪藻土や砂などの分散剤をほぼいっぱいになるまで加え、細胞体の糸に破片が入らないように注意します。セルの上部を別のエンドキャップでキャップします。各サンプルとブランクについて、これらのステップを繰り返します。

各コレクションバイアルに対応するサンプルセルまたはブランクの番号をラベル付けし、バイアルキャップでキャップします。各セルを上部ASEトレイの番号付きスロットに配置します。ASEのキーパッドを使用して抽出方法のパラメータを設定し、100 ?C?および1,200 psi。10分間の静的保持で各サンプルを3回抽出し、静的保持の間に細胞本体を総体積の50%でフラッシュします。

次に、溶媒ボトルにすべてのサンプルを抽出するのに十分な量が含まれていることを確認します。実行を開始する前に、計器ラインを3回すすいでください。最後に、スタートを押します。

バイアルをASEから取り出します。バイオマーカーが抽出されたので、分析前に精製する必要があります。

Accelerated Solvent Extractionは汎用性の高い手法であり、さまざまなアプリケーションに活用できますが、ここではその一部について説明します。

加速溶媒抽出は、食品を含む他の種類のサンプルにも使用できます。農薬汚染を試験するための残留物分析は、果物や野菜などの食品の安全性と品質を確認するために、規制施設や産業施設で頻繁に実施されます。ASEは、食品サンプルから有機塩素系農薬を抽出し、農産物に存在する残留物の種類またはレベルを決定するために使用できます。この情報は、農産物が人間または動物の消費に適しているかどうかを確認するために使用できます。たとえば、ディルドリンは、製品にもよりますが、食品の0〜0.1ppm以内で見つけることができます。

食品の栄養成分は、ASEを使用して抽出することもできます。例えば、重量脂肪含有量が高いチョコレートのような製品を抽出することができます。石油エーテルを溶媒として含むASEを使用すると、脂肪をチョコレートサンプルから分離し、定量分析を行って、既知のチョコレート量あたりの脂肪含有量の正確な割合を決定できます。この情報を使用して、規制当局はチョコレート製造業者の主張を確認したり、製造業者は正確な食品ラベルを作成するための情報を入手したりできます。

JoVEの加速溶媒抽出(ASE)を使用した脂質バイオマーカーの抽出に関する紹介をご覧になりました。さらなる処理と分析の方法については、後続のビデオで説明します。

ご覧いただきありがとうございます!