脳虚血のマウスモデルにおける酸性ポストコンディショニングの神経保護効果の評価

大脳動脈にモノフィラメントを挿入して閉塞を誘導した麻酔マウスを取ります。

これにより脳への血流が遮断され、限局性虚血が引き起

塞は酸素とグルコースの供給を制限し、ATP の枯渇とニューロンの脱分極を引き起こします。

脱分極ニューロンは過剰なグルタミン酸を放出し、シナプス後受容体に結合し、大量のカルシウム流入を引き起こします。

細胞内カルシウムの上昇はミトコンドリア機能を破壊し、ROS産生を促進し、ニューロンの損傷を開始します。

マウスを再麻酔します。

切開部を再度開き、モノフィラメントを除去して再灌流を実現します。

突然の酸素再導入は、機能不全のミトコンドリアから過剰なROSを生成し、神経損傷を悪化させます。

これを軽減するには、再灌流開始後に酸性ポストコンディショニングまたはAPCのためにマウスを高二酸化炭素ガス混合物にさらします。

これにより、脳内のプロトン濃度が上昇し、受容体が阻害され、カルシウムの流入が減少し、カルシウム媒介性興奮毒性が防止されます。

さらに、APC はミトコンドリアを安定させ、ROS 産生を阻害することで神経保護を提供します。

閉塞開始の55分後、イソフルランで動物を再麻酔し、以前と同じように動物を配置します。次に、首の切開を開き、総頸動脈を再露出させます。閉塞期間の後、眼科鉗子を使用してフィラメントをそっと引き抜き、再灌流を実現します。次に、結び目を締めて、一時的な縫合糸を永久的な縫合糸に変えます。アシドーシス治療の場合は、ノーズコーンから吸入するガスを二酸化炭素20%、酸素20%、窒素60%に5分間変化させます。中断された外科的縫合糸で切開部を閉じた後、マウスが意識を取り戻すまで、マウスを摂氏30度の加熱ケージに入れます。