An Optogenetic Method to Control and Analyze Gene Expression Patterns in Cell-to-cell Interactions

Akihiro Isomura; Ryoichiro Kageyama

doi:10.3791/57149

JoVE Journal
Genetics

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JoVE Journal Genetics

An Optogenetic Method to Control and Analyze Gene Expression Patterns in Cell-to-cell Interactions

制御、細胞間相互作用における遺伝子発現パターンを分析して光遺伝学的方法

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07:59 min

March 22, 2018

DOI: 10.3791/57149-v

Akihiro Isomura^1,2, Ryoichiro Kageyama^1,3,4,5

¹Institute for Frontier Life and Medical Sciences,Kyoto University, ²Japan Science and Technology Agency,PRESTO, ³Institute for Integrated Cell-Material Sciences,Kyoto University, ⁴Graduate School of Medicine,Kyoto University, ⁵Graduate School of Biostudies,Kyoto University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、振動情報の光遺伝学的制御による細胞間伝達を分析および遺伝子発現のモニタリングライブにプロトコルを提案する.この方法は、多細胞系における動的遺伝子発現プログラムの機能的意義をテストするためのユニークなプラットフォームを提供します。

この実験の全体的な目標は、光遺伝学的制御と遺伝子発現のライブモニタリングにより、振動情報の細胞間移動を観察することです。この方法は、Notchシグナル伝達経路を介して細胞が互いにどのように通信するか、特に細胞が振動情報を互いに伝達する方法に関する重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、遺伝子発現動態を非常に高い精度で制御および監視できることです。

その手順を実演するのは、この新技術を開発した私の研究室の研究員である磯村明弘です。Tol2ベースの光遺伝学的モジュールのプラスミドベクターをトランスポゼース発現ベクターとともにC2C12細胞にトランスフェクションするには、まずトリプシン化した細胞をセルカウンターでカウントします。トランスフェクションの1日前に、1ウェルあたり50, 000個のC2C12細胞を12ウェルプレートにプレートします。

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