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DOI: 10.3791/57546-v
Ee Shan Liau*1,2, Ya-Ping Yen*2,3, Jun-An Chen1,2
1Molecular and Cell Biology, Taiwan International Graduate Program, Academia Sinica and Graduate Institute of Life Sciences,National Defense Medical Center, 2Institute of Molecular Biology,Academia Sinica, 3Institute of Biotechnology, College of Bio-Resources and Agriculture,National Taiwan University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a protocol for visualizing motor neuron projection and axon arborization in transgenic Hb9::GFP mouse embryos. Using light sheet fluorescence microscopy, the method enables qualitative and quantitative assessments of axon patterns, advancing the understanding of motor neuron development.
ここでは、運動ニューロンの投影と形質転換Hb9::GFPマウス胚における軸索分枝を可視化するためのプロトコルについて述べる。運動ニューロンの免疫染色後は、後続の定量分析のため光シート蛍光顕微鏡画像の胚を使用されます。このプロトコルは、中枢神経系の他のニューロンのナビゲーション プロセスに適用されます。
このプロトコルの全体的な目標は、マウス胚のライトシート顕微鏡と画像解析ソフトウェアを使用して、運動ニューロンの軸索分枝パターンの定性的および定量的評価を可能にすることです。この方法は、複雑な運動と協調した運動ニューロンの発生を理解するのに役立ちます。この手法の主な利点は、運動ニューロンの軸索樹状化パターンをさまざまな角度から観察および画像化し、個々の神経を定量的に分析できることです。
その手順を実演するのは、私の研究室の大学院生であるYa-Ping YenとEe Shan Liauです。この手順を開始するには、胚を24ウェルプレートに個別に固定し、新たに調製した4%パラホルムアルデヒドをPBS中のウェル1ミリリットルで摂氏4度でシェーカーで一晩固定します。翌日、固定胚を少なくとも3回、それぞれ5〜10分間、1ミリリットルの1X PBSで洗浄し、摂氏4度で一晩インキュベートします。
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