June 26th, 2018
ここで全体のマウスの初期胚における β-ガラクトシダーゼ活性の検出のための標準プロトコルとパラフィン切片および counterstaining の方法について述べる。これはティッシュ セクションにも適用することができます開発における遺伝子の発現を監視する簡単かつ迅速な手続を器官または培養細胞。
この方法は、胚発生中の遺伝子発現パターンの研究など、発生生物学分野の重要な質問に答えることができます。この技術の主な利点は、高感度で、簡単かつ迅速に実行でき、サンプルのパラフィン切片化後、マウント組織全体の染色またはより高い分解能で染色を直接視覚化できることです。この手順を実演するのは、マリア・ホセ・ブランコ博士、アナベル・リアルテ博士、エマ・ムニョス博士、ミゲル・マルチェナ博士です。まず、ガラクトシダーゼを発現するグルタルアルデヒド固定トランスジェニック胚を、新たに調製したX-galリンスバッファーで室温で10分間インキュベートします。野生型の同腹仔胚を酵素反応のネガティブコントロールとして使用します。次に、リンスバッファーをpH 8-9のX-gal染色溶液と交換し、光から保護し、37°Cで2時間から一晩インキュベートします
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この記事では、初期のマウス胚全身におけるβ-ガラクトシダーゼ活性の検出のための標準プロトコルについて説明します。この方法は簡単で、組織切片や培養細胞を含む様々な生物学的サンプルに適用できます。