腫瘍微小環境の臨床的および生物学的評価のための空間画像解析と組み合わせたマルチプレックス免疫蛍光法

本稿では、チラミドシグナル増幅(TSA)マルチプレックス免疫蛍光法(mIF)と画像解析および空間解析を組み合わせたプロトコルについて説明します。このプロトコルは、実験室で利用可能なスライドスキャナーに応じて、スライドごとに2〜6個の抗原を染色するために、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)セクションで使用できます。

私たちの研究室では、ヒトの大腸がんを研究しています。転移性疾患への進行と免疫療法を含む治療への反応。原発性および転移性疾患における腫瘍免疫微小環境および腫瘍内微生物叢を調査することにより、新しい予測および予後バイオマーカーを見つけようとしています。

私たちのプロジェクトでは、現在、RNAシーケンシング、全エクソームシーケンシング、TCRシーケンシング循環無細胞DNA分析、免疫蛍光、蛍光研究所ハイブリダイゼーションなどのいくつかの技術を実装しています。現時点での主な課題は、蛍光研究所のハイブリダイゼーション染色とチラミドシグナル増幅マルチプレックス免疫蛍光法を組み合わせて、マイクロバイオームと免疫細胞の間の相互作用を研究することです。私たちの方法は堅牢で、再現性があり、使いやすく、費用対効果に優れています。

蛍光灯スキャナーを所持している任意のラボにセットアップでき、この方法は、抗原の制限されたパネルに通常最適化されている市販のキットとは対照的に、市販のIHC抗体で使用できます。