シングルステップおよび半自動ヘパリンアフィニティークロマトグラフィープロトコルによるアデノ随伴ウイルスベクターの単離

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2024年4月5日

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Miguel M. Lopes^*¹^,²^,³ , Sara M. Lopes^*¹^,²^,³ , Rafael Baganha¹^,²^,⁴ , Carina Henriques¹^,²^,⁵ , Ana C. Silva¹^,²^,³ , Diana D. Lobo¹^,²^,³ , Luísa Cortes¹^,²^,³^,⁶ , Luís Pereira de Almeida^*¹^,²^,⁴^,⁵ , Rui Jorge Nobre^*¹^,²^,³^,⁴

¹CNC-UC - Center for Neuroscience and Cell Biology, University of Coimbra, ²CIBB - Center for Innovative Biomedicine and Biotechnology, University of Coimbra, ³IIIUC - Institute for Interdisciplinary Research, University of Coimbra, ⁴ViraVector - Viral Vectors for Gene Transfer Core Facility, University of Coimbra, ⁵FFUC - Faculty of Pharmacy, University of Coimbra, ⁶MICC-CNC - Microscopy Imaging Center of Coimbra - CNC, University of Coimbra

^* These authors contributed equally

この原稿では、最適化されたヘパリンベースのアフィニティークロマトグラフィー法を使用して、アデノ随伴ウイルスベクターを生成および精製するための詳細なプロトコルについて説明します。シンプルでスケーラブル、かつ費用対効果の高いアプローチを提供し、超遠心分離の必要性を排除します。得られたベクターは、高い純度と生物学的活性を示し、前臨床試験でその価値を証明しています。

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AAV AAV SDS PAGE

Chapters in this video

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Introduction

1:54

Production of Recombinant AAV by Transient Transfection

4:29

FPLC Purification and Characterization of Recombinant AAV