Name: 負傷したゼブラフィッシュ幼生における持続性 緑膿菌 感染のモデル化 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T13:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 4 s
Description: 学ぶ 負傷したゼブラフィッシュ幼生を用いた緑膿菌の持続性感染モデル。抗生物質耐性を再現し、抗菌薬スクリーニングのための自然な感染モードを提供する。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

本研究で説明したすべてのゼブラフィッシュ実験は、実験動物の取り扱いに関する欧州連合のガイドラインに従った3R(Replacement, Reduction and Refinement)の原則に従ってモンペリエ大学で実施され、Direction Sanitaire et Vétérinaire de l'HéraultおよびComité d'Ethique pour l'utilisation d'animaux à des fins scientifiquesの参照CEEA-LR-B4-172-37によって承認されました。すべての感染実験は、受精後5日までの胚で行われました。 ABまたはゴールデンラインズフィッシュからの成魚ゼブラフィッシュ(Danio rerio)の繁殖は、EU動物保護指令2010/63/EUで規定された国際ガイドラインに準拠しています。モンペリエ大学のゼブラフィッシュ施設で、標準条件を12時間12分のライト:ダークサイクル、3.5Lポリカーボネートタンク(水槽あたり最大22匹)に設定したもので、塩分濃度4%/400μSの導電率と水温28°Cの再循環システムに接続されています。 魚には1日2回、魚の餌を与えました。
1. 溶液の調製
<ol>
	<li>ゼブラフィッシュの胚を成長させるために、メチレンブルーの有無にかかわらず、魚水用の1倍ワーキング溶液を調製します( 表1を参照)。</li>
	<li>表1に記載されているように、20倍ストック(0.4%)と1倍ワーキングトリカイン麻酔薬溶液を調製します。ストック溶液の凍結と融解を繰り返さないように、20x Tricaineの10 mLアリコートを調製し、-20°Cで保存してください。</li>
	<li>1x リン酸緩衝生理食塩水(PBS; 表 1)。</li>
</ol>
2.GFPを構成的に発現する蛍光緑膿菌の接種物の調製  
注: 緑膿菌 のすべての作業は、バイオセーフティキャビネットでBSL-2の予防措置を受けて行われます。 緑膿菌 株は、GFPのような蛍光レポーターを構成的に発現するように遺伝子改変されるべきである(ここで使用され、13で述べられているように)。プラスミドコード蛍光レポーターの場合、プラスミドの損失を避けるために、染色体コード蛍光レポーターを含む株の使用を強く推奨します。
<ol>
	<li>感染の2日前に、-80°CからGFPを発現する遺伝子組み換え 緑膿菌 のストックをLB寒天プレート(表1)にストリークアウトし、37°Cで一晩インキュベートします。</li>
	<li>蛍光顕微鏡(倍率6倍)を用いてコロニーの蛍光を確認し、1mLのLBブロス(表1)にGFP+P.緑膿菌コロニーを接種し、振とう(180rpm)しながら37°Cで一晩増殖させます。</li>
	<li>感染の日に、緑 膿菌の 上記の一晩培養物を1:20で5mLの新鮮なLBブロスに希釈します。37°Cで振とう(180rpm)しながら、培養物がOD600 = 0.8に達するまで細菌を増殖させます。これには約2〜3時間かかります。</li>
	<li>細菌培養物を室温(RT)で3584 x gで10分間遠心分離します。上清を取り除き、ペレットをメチレンブルーを含まない4mLの魚水に再懸濁します。</li>
	<li>魚水での培養量を7 x 107 から1 x 108 CFU / mLに適合させます。これは、約0.15のOD600 に相当します(各ひずみに適合)。</li>
	<li>接種物を定量するには、細菌懸濁液の段階希釈を行い、LB寒天プレートで10-4 希釈の20μLをプレート化し、37°Cで一晩インキュベートします。</li>
	<li>蛍光顕微鏡でGFP+ コロニーをカウントし、接種のCFUを決定します。</li>
</ol>
3. ゼブラフィッシュの胚の採取と調製
<ol>
	<li>細菌浸漬実験の3日前に、ゼブラフィッシュの繁殖ペアを設定します。繁殖用のオスとメスを交配水槽に入れます。</li>
	<li>翌朝、受精後の卵子を細かいメッシュのストレーナーで採取します。集めた卵をメチレンブルーの魚水が入ったシャーレに入れます。</li>
	<li>汚染を避けるために、ペトリ皿に漂白剤を1滴加えます。5分後、魚の水をメチレンブルーに変えて漂白剤を取り除きます。</li>
	<li>胚の発育に異常がある卵子(未受精卵は1細胞卵期に似ています)または死んだ卵子(白い外観)を捨てます。</li>
	<li>感染の朝(2 dpf)に、実体顕微鏡(倍率11倍)で2つの非常に薄い鉗子で胚を脱毛します。胚をつまむことなく鉗子を使用して絨毛膜を引き裂き、胚を解放します。</li>
	<li>デコレーションされた胚を、メチレンブルーの魚が入ったシャーレに入れます。感染するまで28°Cでディッシュをインキュベートします。</li>
</ol>
4. 胚の損傷
<ol>
	<li>損傷の約5分前に、細胞培養皿(35 mm x 10 mm)で、0.02%トリカインを含むメチレンブルーを含まない魚水中でゼブラフィッシュ胚を麻酔します。胚はもはや動かず、刺激に反応しません。</li>
	<li>2本の箸の上に25Gの針を乗せると、針の取り扱いが楽になります。</li>
	<li>実体顕微鏡下で、異常な発育または死んだ胚を切除します。皿の円運動を使用して、中央にすべての胚を集めます。</li>
	<li>2本の針を垂直位置(頭を下にして尾を上にして)で胚を1つずつ分離し、左の針を尾に置いてまっすぐに保ちます。右の針で脊索の端でフィンを切ります。一度にカットします。切断と細菌溶液への浸漬の間に10分を超えないようにしてください。</li>
</ol>
5. 傷ついた胚の感染
<ol>
	<li>生物学的安全キャビネットタイプIIの下で、ボルテックスし、 緑膿菌溶液 を約1 x 107 CFU/mLで6ウェルプレートに加えます。</li>
	<li>損傷した胚を使い捨てのパスツールガラスピペットで採取し、微生物安全ポストの下の細菌溶液に加えます。プレートを28°Cで1.5時間インキュベートします。 注:感染した幼虫が大量に必要な場合は、約50匹の幼虫のグループを作り、傷口を作り、それらを浸し、次のグループに対して繰り返します。</li>
	<li>感染後、以下に説明するように、胚を微生物学的安全ポストの下で洗浄します。<ol>
		<li>ガラスピペットで胚をメチレンブルーを含まない10mLの魚水に洗浄し、できるだけ液体を加えずに室温で30分間移します。</li>
		<li>ガラスピペットを使用して感染した胚を再度移し、メチレンブルーを含まない4mLの魚水に数分間2回目の洗浄を行います。</li>
		<li>24個の感染した胚を、メチレンブルーを含まない1mLの魚水を入れたマルチウェルプレートに個別に移植します。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>プレートを28°Cのインキュベーター内のプラスチックボックスに入れます。 箱を加湿します(広告でamp 例:amp ペーパータオルなど)蒸発を抑えます。</li>
</ol>
6. 感染した胚の生存
<ol>
	<li>胚の生存研究では、感染後18時間、24時間後、および48時間後(hpi)に実体顕微鏡で生存率を確認します。胚は、心臓と血液の循環が止まると死んだと見なされます。</li>
	<li>Kaplan-Meier階段のグラフィック表現(GraphPad Prism 8.3.0)を使用して死亡率/生存率を表し、ログランクまたはその他の適切な統計テストでデータを分析します。</li>
</ol>
7. 感染した胚の細菌負荷のカウント(図1)
<ol>
	<li>1.5 hpi、つまり感染直後、および5つの胚/時点での24、48、および72 hpiの各洗浄後の4つの異なる時点で感染した胚からCFU測定を行います。微生物安全ポストの下ですべての手順を実行します。</li>
	<li>感染した幼虫ごとに、95 μLの1x PBSを含む1.5 mLの微量遠心チューブを準備します。幼虫の体積は約5μLです。</li>
	<li>メチレンブルーを含まない4mLの魚水を入れた6ウェルプレートに幼虫を移し、洗浄を行い、浮き沈み細菌を除去します。</li>
	<li>各胚をPBSを含む微量遠心チューブに入れ、液体をできるだけ加えません。PBSの表面にある幼虫が入ったガラスピペットに触れるだけで、液体を追加せずに幼虫が微量遠心チューブに沈むことができます。</li>
	<li>微量遠心チューブの側面にある乳棒を使用して、胚を個別に粉砕します。乳棒をチューブの中に入れておきます。無傷の胚が残っていない場合の終点を決定します。</li>
	<li>乳棒を持ち上げ、100μLのPBS-Triton 2%を加えて、乳棒に付着した残留細菌を洗い流します(最終濃度は1%)。渦を巻いて10分待ちます。同時に5つ以上の胚を処理しないでください。</li>
	<li>各胚について、希釈していないライセート10 μLをLB寒天プレートに3回滴下します。マルチチャンネルピペットを使用して、10-3 希釈に達するまで、96ウェルプレートでライセートの段階希釈を行います。LB寒天プレート上の未希釈液の隣に希釈液10-1、10-2、および10-3 を3倍、10μL滴下し、プレートを37°Cで一晩インキュベートします。</li>
	<li>顕微鏡下で各希釈の蛍光コロニーをカウントし、感染した胚あたりのCFUを計算します。</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68464/68464fig1.jpg"> 
図1:ゼブラフィッシュの胚における細菌の病原性と残留性を評価するための実験タイムライン。 略語:CFU =コロニー形成単位、hpi =感染後数時間。図面は BioRender.com で作成されました。フィギュアは13から変更されています。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68464/68464fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
8. 持続感染に対する治療の試験(図2)
<ol>
	<li>緑膿菌株の最小阻害濃度(MIC)の40倍の抗生物質溶液を調製します。実験の前に、選択した濃度の抗生物質が胚に対して毒性がないことを確認してください。</li>
	<li>手順 7.1 と 7.2 に従います。抗生物質を含む魚水1mLを24ウェルプレートに入れ、抗生物質なしでコントロールを行います。</li>
	<li>1回の治療ごとに5つの胚を洗浄ステップから24ウェルプレートに移し、液体をできるだけ加えません。</li>
	<li>抗生物質と室温で30分間インキュベートします。手順 7.3 に戻ります。治療後の細菌量を定量化します。</li>
</ol>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68464/68464fig2.jpg"> 
図2:感染した胚に対する抗生物質治療の有効性を評価するために使用された実験的手順。 略語:ATB 30' = 30分間の抗生物質治療、CFU = コロニー形成単位、hpi = 感染後数時間。図面は BioRender.com で作成されました。フィギュアは13から変更されています。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68464/68464fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

<ol><li>Garcia-Clemente, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+Pseudomonas+aeruginosa+Infection+on+Patients+with+Chronic+Inflammatory+Airway+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Impact of Pseudomonas aeruginosa Infection on Patients with Chronic Inflammatory Airway Diseases.</a> J Clin Med. 9 (12), 3800(2020).</li>
<li>Serra, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+wound+infections%3A+the+role+of+Pseudomonas+aeruginosa+and+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Anti-Infect%22%5BJournal%5D)">Chronic wound infections: the role of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus.</a> Expert Rev Anti-Infect. 13 (5), 605-613 (2015).</li>
<li>Tacconelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discovery%2C+research%2C+and+development+of+new+antibiotics%3A+the+WHO+priority+list+of+antibiotic-resistant+bacteria+and+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Discovery, research, and development of new antibiotics: the WHO priority list of antibiotic-resistant bacteria and tuberculosis.</a> Lancet Infect Dis. 18, 318-327 (2018).</li>
<li>La Rosa, R., Johansen, H. K., Molin, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+Bacterial+Infections%2C+Antibiotic+Treatment+Failure%2C+and+Microbial+Adaptive+Evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Antibiotics%22%5BJournal%5D)">Persistent Bacterial Infections, Antibiotic Treatment Failure, and Microbial Adaptive Evolution.</a> Antibiotics. 11 (3), 419(2022).</li>
<li>Kember, M., Grandy, S., Raudonis, R., Cheng, Z. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-Canonical+Host+Intracellular+Niche+Links+to+New+Antimicrobial+Resistance+Mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">Non-Canonical Host Intracellular Niche Links to New Antimicrobial Resistance Mechanism.</a> Pathogens. 11 (2), 220(2022).</li>
<li>Lorenz, A., Pawar, V., Häussler, S., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+host-pathogen+interactions+from+state-of-the-art+animal+models+of+respiratory+Pseudomonas+aeruginosa+infections%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">Insights into host-pathogen interactions from state-of-the-art animal models of respiratory Pseudomonas aeruginosa infections.</a> FEBS Lett. 590, 3941-3959 (2016).</li>
<li>Reyne, N., McCarron, A., Cmielewski, P., Parsons, D., Donnelley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((To+bead+or+not+to+bead%3A+A+review+of+Pseudomonas+aeruginosa+lung+infection+models+for+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">To bead or not to bead: A review of Pseudomonas aeruginosa lung infection models for cystic fibrosis.</a> Front Physiol. 14, 1104856(2023).</li>
<li>Pletzer, D., Mansour, S. C., Wuerth, K., Rahanjam, N., Hancock, R. E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+Mouse+Model+for+Chronic+Infections+by+Gram-Negative+Bacteria+Enabling+the+Study+of+Anti-Infective+Efficacy+and+Host-Microbe+Interactions%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">New Mouse Model for Chronic Infections by Gram-Negative Bacteria Enabling the Study of Anti-Infective Efficacy and Host-Microbe Interactions.</a> mBio. 8, e00140-e00217 (2017).</li>
<li>Pont, S., Blanc-Potard, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+Embryo+Infection+Model+to+Investigate+Pseudomonas+aeruginosa+Interaction+With+Innate+Immunity+and+Validate+New+Therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish Embryo Infection Model to Investigate Pseudomonas aeruginosa Interaction With Innate Immunity and Validate New Therapeutics.</a> Front Cell Infect Microbiol. 11, 745851(2021).</li>
<li>Nogaret, P., El Garah, F., Blanc-Potard, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Infection+Protocol+in+Zebrafish+Embryo+to+Assess+Pseudomonas+aeruginosa+Virulence+and+Validate+Efficacy+of+a+Quorum+Sensing+Inhibitor+In+Vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">A Novel Infection Protocol in Zebrafish Embryo to Assess Pseudomonas aeruginosa Virulence and Validate Efficacy of a Quorum Sensing Inhibitor In Vivo.</a> Pathogens. 10 (4), 401(2021).</li>
<li>Phennicie, R. T., Sullivan, M. J., Singer, J. T., Yoder, J. A., Kim, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+resistance+to+Pseudomonas+aeruginosa+infection+in+zebrafish+is+mediated+by+the+cystic+fibrosis+transmembrane+conductance+regulator%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immunity%22%5BJournal%5D)">Specific resistance to Pseudomonas aeruginosa infection in zebrafish is mediated by the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator.</a> Infect Immunity. 78 (11), 4542-4550 (2010).</li>
<li>Kumar, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+Transcriptomics+of+Host-Pathogen+Interaction+of+Cystic+Fibrosis+Isolate+Pseudomonas+aeruginosa+PASS1+With+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Dual Transcriptomics of Host-Pathogen Interaction of Cystic Fibrosis Isolate Pseudomonas aeruginosa PASS1 With Zebrafish.</a> Front Cell Infect Microbiol. 8, 406(2018).</li>
<li>Pont, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+Pseudomonas+aeruginosa+persist+and+evade+antibiotic+treatment+in+a+wound+infection+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Intracellular Pseudomonas aeruginosa persist and evade antibiotic treatment in a wound infection model.</a> PLoS Pathogens. 21 (2), e1012922(2025).</li>
<li>Facchini, M., De Fino, I., Riva, C., Bragonzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+Term+Chronic+Pseudomonas+aeruginosa+Airway+Infection+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice.</a> J Vis Exp. (85), e51019(2014).</li>
<li>Bianconi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+genomics+and+biological+characterization+of+sequential+Pseudomonas+aeruginosa+isolates+from+persistent+airways+infection%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genom%22%5BJournal%5D)">Comparative genomics and biological characterization of sequential Pseudomonas aeruginosa isolates from persistent airways infection.</a> BMC Genom. 16, 1105(2015).</li>
<li>Buyck, J. M., Tulkens, P. M., Van Bambeke, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacodynamic+evaluation+of+the+intracellular+activity+of+antibiotics+towards+Pseudomonas+aeruginosa+PAO1+in+a+model+of+THP-1+human+monocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicro+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">Pharmacodynamic evaluation of the intracellular activity of antibiotics towards Pseudomonas aeruginosa PAO1 in a model of THP-1 human monocytes.</a> Antimicro Agents Chemother. 57 (5), 2310-2318 (2013).</li>
<li>Volpe, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permeability+classification+of+representative+fluoroquinolones+by+a+cell+culture+method%5BTitle%5D)+AND+%22Aaps+Pharmsci%22%5BJournal%5D)">Permeability classification of representative fluoroquinolones by a cell culture method.</a> Aaps Pharmsci. 6 (2), 1-6 (2004).</li>
<li>Pang, Z., Raudonis, R., Glick, B. R., Lin, T. J., Cheng, Z. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiotic+resistance+in+Pseudomonas+aeruginosa%3A+mechanisms+and+alternative+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Adv%22%5BJournal%5D)">Antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa: mechanisms and alternative therapeutic strategies.</a> Biotechnol Adv. 37 (1), 177-192 (2019).</li>
<li>Lamberti, Y., Surmann, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intracellular+phase+of+extracellular+respiratory+tract+bacterial+pathogens+and+its+role+on+pathogen-host+interactions+during+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">The intracellular phase of extracellular respiratory tract bacterial pathogens and its role on pathogen-host interactions during infection.</a> Curr Opin Infect Dis. 34 (3), 197-205 (2021).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6639">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/68464">10.3791/68464</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/68464">Modeling Persistent Pseudomonas aeruginosa Infection in Wounded Zebrafish Larvae</a>. The Authors&#160;section was&#160;updated.

Erratum: Modeling Persistent Pseudomonas aeruginosa Infection in Wounded Zebrafish Larvae

<table><tbody><tr><td>エチル-3-アミノ安息香酸メタンスルホン酸塩</td><td>シグマ</td><td>E50521</td><td></td></tr><tr><td>ピストンペレット</td><td>エッペンドルフ、ダッチャー</td><td>33522</td><td></td></tr><tr><td>海塩</td><td>インスタントオーシャン、アクアリウムシステム&nbsp;&nbsp;</td><td>218035</td><td></td></tr><tr><td>トライトン</td><td>ユーロメデックス</td><td>2000-B</td><td></td></tr></tbody></table>

負傷したゼブラフィッシュ幼生における持続性 緑膿菌 感染のモデル化

Modeling Persistent Pseudomonas aeruginosa Infection in Wounded Zebrafish Larvae

ゼブラフィッシュ胚は、緑膿菌CF分離株による持続感染をモニタリングするための適切なモデルです 我々は、損傷した胚の浸漬モードを用いて、3つのCF分離株(A6520、B6513、およびC6490)9の病原性をin vivoで評価した。また、マウスの気道14,15における長期のコロニー形成で知られる、十分に特徴付けられた後期CF分離株であるRP73の挙動も評価しました。4つのCF分離株はすべて、参照株PAO1(図3Aおよび図3B)と比較すると、非常に減衰していました。
細菌の除去と持続性を区別するために、胚あたりの細菌量を3日間(最大72 hpi)にわたって定量...

Pseudomonas aeruginosa is a major human pathogen, particularly in chronic wound infections and chronic pulmonary infections (especially in patients with ...

modeling-persistent-pseudomonas-aeruginosa-infection-wounded

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

透明なゼブラフィッシュの胚は、次のような視覚化するための有用なモデルのホストと自然免疫細胞と細胞内細菌性病原体との間の機能的研究の相互作用を、証明している...

細胞内細菌性病原体を持つゼブラフィッシュ胚の感染

ゼブラフィッシュの急速な発展、小型サイズと透明性感染症の自然免疫制御の研究のための途方もない利点があります...

ゼブラフィッシュ幼生における播種性カンジダ症の非侵襲的イメージング

このビデオでは、ゼブラフィッシュの成魚の腹腔内に溶液を送達する方法である腹腔内注射の技術について説明しています。...

腹腔内注射:成体ゼブラフィッシュの腹腔内への溶液送達法

出典:Luukinen, H. ほか。Mycobacterium marinum感染の成体ゼブラフィッシュにおける結核のモデル化。 J. Vis.

ゼブラフィッシュモデルを用いたマイコバクテリア感染における宿主免疫の役割の評価

出典:Flores, E. ほか。ゼブラフィッシュ幼虫の食中毒の媒介として原生動物のパリミキウム・カウダタムを利用すること。J. Vis.

食中毒菌を用いたゼブラフィッシュ幼虫の腸内感染モデル化

粘膜レベルでの病原体と免疫防御の生体内時空間相互作用は、既存の脊椎動物宿主では容易には画像化されません。ここで紹介する方法は、ゼブラフィッシュの幼魚の水泳膀胱を感染部位として使用して、生きた脊椎動物の粘膜カンジダ症を研究するための汎用性の高いプラットフォームを示しています。...

浮袋注入による幼虫ゼブラフィッシュにおける粘膜カンジダ症のモデル化

光学的に透明なゼブラフィッシュの胚は、病原性微生物と自然免疫細胞との間の相互作用をリアルタイムで研究し、視覚化するために広く使用されています。Mycobacterium...

イメージング病因とのコーディングを解読し、<em&gt;マイコバクテリウム膿瘍</em&gt;ゼブラフィッシュ胚で

その自然の病原体菌 marinumを使用して大人のゼブラフィッシュ モデルひと結核にプロトコルを紹介します。抽出された DNA と感染したゼブラフィッシュの内臓からの RNA は、抗酸菌の合計負荷魚と qPCR...

結核抗酸菌 marinum感染成人ゼブラフィッシュをモデル化

本研究では、生体内可視化と蛍光顕微鏡を基バイオマテリアル関連感染の生体内解析のためのゼブラフィッシュ胚モデルについて説明します。このモデルは、生体内での生体関連感染症を研究するためマウス...

ゼブラフィッシュ胚モデルにおける生体内可視化と生体材料の生体解析黄色ブドウ球菌感染症

我々は、免疫担当マウスにおける慢性創傷感染を発生させる遅延接種プロトコルを記述する。...

慢性緑膿菌創傷感染の遅延接種モデル

このプロトコルは、ゼブラフィッシュ幼虫における アスペルギルス 感染モデルについて説明する。 アスペルギルス...

宿主と病原体の相互作用の解析のためのゼブラフィッシュ幼虫のア スペルギルス 胞子の感染

学ぶ 負傷したゼブラフィッシュ幼生を用いた緑膿菌の持続性感染モデル。抗生物質耐性を再現し、抗菌薬スクリーニングのための自然な感染モードを提供する。

負傷したゼブラフィッシュ幼生における持続性緑膿菌感染のモデル化

さらに動画を探す

負傷したゼブラフィッシュ幼生における持続性 緑膿菌 感染のモデル化

さらに動画を探す

負傷したゼブラフィッシュ幼生における持続性緑膿菌感染のモデル化