Name: 血栓プロファイリングアッセイ:生体力学的血栓形成を包括的に特徴づけるためのマイクロ流体ベースのプラットフォーム (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: 学ぶマイクロ流体ベースの血栓プロファイリングアッセイで、生体力学的血栓形成を包括的に特徴づける方法。蛍光イメージングを用いて血栓サイズと血小板活性化を7つのパラメータで定量化し、抗血栓薬のスクリーニングや臨床診断に応用可能です。

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<ol><li>Lindstrom, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+cardiovascular+diseases+and+risks+collaboration%2C+1990-2021%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Global burden of cardiovascular diseases and risks collaboration, 1990-2021.</a> J Am Coll Cardiol. 80 (25), 2372-2425 (2022).</li>
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<li>Volod, O., Viola, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quantra+system%3A+System+description+and+protocols+for+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The quantra system: System description and protocols for measurements.</a> Methods Mol Biol. 2663, 743-761 (2023).</li>
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<li>Colace, T. V., Diamond, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+observation+of+von+Willebrand+factor+elongation+and+fiber+formation+on+collagen+during+acute+whole+blood+exposure+to+pathological+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct observation of von Willebrand factor elongation and fiber formation on collagen during acute whole blood exposure to pathological flow.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (1), 105-113 (2013).</li>
<li>Westein, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerotic+geometries+exacerbate+pathological+thrombus+formation+poststenosis+in+a+von+Willebrand+factor-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Atherosclerotic geometries exacerbate pathological thrombus formation poststenosis in a von Willebrand factor-dependent manner.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 110 (4), 1357-1362 (2013).</li>
<li>Brazilek, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+a+strain+rate+gradient+microfluidic+device+to+von+Willebrand%27s+disease+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Application of a strain rate gradient microfluidic device to von Willebrand's disease screening.</a> Lab Chip. 17 (15), 2595-2608 (2017).</li>
<li>Tovar-Lopez, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidics+device+to+monitor+platelet+aggregation+dynamics+in+response+to+strain+rate+micro-gradients+in+flowing+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">A microfluidics device to monitor platelet aggregation dynamics in response to strain rate micro-gradients in flowing blood.</a> Lab Chip. 10 (3), 291-302 (2010).</li>
<li>Kim, D. A., Ku, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+shear-induced+platelet+aggregated+clot+formed+in+an+in+vitro+arterial+thrombosis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Adv%22%5BJournal%5D)">Structure of shear-induced platelet aggregated clot formed in an in vitro arterial thrombosis model.</a> Blood Adv. 6 (9), 2872-2883 (2022).</li>
<li>Receveur, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shear+rate+gradients+promote+a+bi-phasic+thrombus+formation+on+weak+adhesive+proteins%2C+such+as+fibrinogen%2C+in+a+vwf-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Shear rate gradients promote a bi-phasic thrombus formation on weak adhesive proteins, such as fibrinogen, in a vwf-dependent manner.</a> Haematologica. 105 (10), 2471-2483 (2020).</li>
<li>Din, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-parametric+thrombus+profiling+microfluidics+detects+intensified+biomechanical+thrombogenesis+associated+with+hypertension+and+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Multi-parametric thrombus profiling microfluidics detects intensified biomechanical thrombogenesis associated with hypertension and aging.</a> Nat Commun. 15, 9067(2024).</li>
<li>Stein, P. D., Sabbah, H. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measured+turbulence+and+its+effect+on+thrombus+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Measured turbulence and its effect on thrombus formation.</a> Circ Res. 35 (4), 608-614 (1974).</li>
<li>Mahalingam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Numerical+analysis+of+the+effect+of+turbulence+transition+on+the+hemodynamic+parameters+in+human+coronary+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Diagn+Ther%22%5BJournal%5D)">Numerical analysis of the effect of turbulence transition on the hemodynamic parameters in human coronary arteries.</a> Cardiovasc Diagn Ther. 6 (3), 208-220 (2016).</li>
<li>Thomson, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gigapixel+imaging+with+a+novel+multi-camera+array+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Gigapixel imaging with a novel multi-camera array microscope.</a> Elife. 11, e74988(2022).</li>
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<table><tbody><tr><td>10mLシリンジ</td><td>ヘンケ・サス・ウルフ</td><td>5100-X00V0</td><td>血液サンプルの採取</td></tr><tr><td>15mLファルコンチューブ</td><td>ジェネシー・サイエンティフィック</td><td>28-101</td><td>血液サンプルの保管</td></tr><tr><td>1mL ガス密閉ガラスシリンジ</td><td>ハミルトン</td><td>81331</td><td>ハードウェアアセンブリ</td></tr><tr><td>2.2.9</td><td>MERU VasImmune</td><td></td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>20本×1/2プローブ針</td><td>マクマスター・カー</td><td>M919</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>20mLシリンジ</td><td>ヘンケ・サス・ウルフ</td><td>5200-X00V0</td><td>血液サンプルの採取</td></tr><tr><td>70%エタノール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>EX0281-1</td><td>ガス密閉注射器の消毒とガラススライドの洗浄</td></tr><tr><td>AK4-アレクサ・フルー 647</td><td>バイオレジェンド</td><td>304918</td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>アレクサ・フルア・フルー 405 NHS エステル</td><td>インビトロジェン</td><td>A30000</td><td>フィブリノーゲン標識</td></tr><tr><td>Alexa fluor 555抗体標識キット</td><td>インビトロジェン</td><td>A88065</td><td>MBC 370.2および2.2.9のラベル表示</td></tr><tr><td>アネクシンV-パシフィックブルー</td><td>インビトロジェン</td><td>501121505</td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>クリーニングダスター</td><td>オフィスデポ</td><td>911245</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>木箱付きクラフトホビーナイフセット</td><td>エクセルブレード</td><td>44282</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>脱イオン水とnbsp;</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック&nbsp;</td><td>751-628</td><td>気密注射器の洗浄</td></tr><tr><td>乾燥器</td><td>ベルアート</td><td>F420270000</td><td>PDMSの脱ガス</td></tr><tr><td>使い捨て多目的実験用スパチュラ</td><td>LevGo</td><td>17211</td><td>シリコーンエラストマーベースと硬化剤の混合&nbsp;</td></tr><tr><td>染料・ビオチン除去スピンカラム</td><td>ゼバ</td><td>A44296S</td><td>フィブリノーゲン標識</td></tr><tr><td>フィブリノーゲン</td><td>革新的な研究</td><td>IHUFBG25MG</td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>フュージョン200-Xシリンジポンプ</td><td>ケミックス社</td><td>0720X</td><td>ハードウェアアセンブリ</td></tr><tr><td>ヘパリン&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>H3149</td><td>血液検査の抗凝固</td></tr><tr><td>高周波発生器</td><td>エレクトロテクニック製品株式会社</td><td>BD-20</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>ヒトVWFモノマー</td><td>シノバイオカル株式会社</td><td>10973-H08C</td><td>マイクロフュイディックデバイスコーティング</td></tr><tr><td>Image J v1.53ソフトウェア</td><td>フィジー国立衛生研究所</td><td></td><td>データ分析</td></tr><tr><td>逆立顕微鏡</td><td>ライカ</td><td>DM ILがリードし、フィルターキューブ:ライカDFT51010;灯台:LED5</td><td>ハードウェアアセンブリ</td></tr><tr><td>キムワイプズ</td><td>キンバリー - クラーク・プロフェッショナル</td><td>34120</td><td>ガラススライドの清掃</td></tr><tr><td>ルアーロックキャップ</td><td>インターナショナル・メディカル・インダストリーズ社</td><td>57100B</td><td>血液サンプルの採取</td></tr><tr><td>MBC 370.2</td><td>ケラファスト</td><td>EBW104</td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>顕微鏡カバーグラス</td><td>ポール・マリエンフェルト有限会社 &KG中隊</td><td>ES0107222</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>ミニカミソリブレードスクレーパー</td><td>スタンリー</td><td>28-100</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>NanoDrop 2000 UV-Vis分光光度計</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>ND-2000</td><td>タンパク質濃度とF/P比の測定</td></tr><tr><td>オーブン</td><td>ラボライン・インストゥルメンツ</td><td>3512</td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>PAC-1-アレクサ・フルー647</td><td>バイオレジェンド</td><td>362806</td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>プラスチックカップ</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック&nbsp;</td><td>S04589</td><td>シリコーンエラストマーベースと硬化剤の混合&nbsp;</td></tr><tr><td>SU-8フォトレジストマスター&nbsp;カビ</td><td>UCサンディエゴ ナノ3ナノファブリケーションクリーンルーム施設</td><td></td><td>PDMSデバイスの製作</td></tr><tr><td>シルガード184シリコーンエラストマーキット</td><td>クレイデン・ダウ</td><td>DC4019862</td><td>PDMS</td></tr><tr><td>SZ22-FITC&nbsp;</td><td>ベックマン・カウルター</td><td>IM 1756U</td><td>血栓染色</td></tr><tr><td>チュービング</td><td>コール - パーマー・インストゥルメント社</td><td>06422-01</td><td>ハードウェアアセンブリ</td></tr></tbody></table>

血栓プロファイリングアッセイ:生体力学的血栓形成を包括的に特徴づけるためのマイクロ流体ベースのプラットフォーム

Thrombus Profiling Assay: A Microfluidics-Based Platform for Comprehensively Characterizing Biomechanical Thrombogenesis

Thrombosis is a pathological condition describing the abnormal accumulation of platelets and clotting factors in a blood vessel. While many works focused ...

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この研究では、以前に報告されていないヒト血漿中のフィブリンクロット形成の間のFV凝固活性を測定した新規マイクロプレートアッセイを説明しています。この方法は、継続的にヒト血漿中のフィブリン塊形成時の405nmでの吸光度の変化を測定するために運動をマイクロプレートリーダーを使用しています。...

マイクロ波凝固アッセイを用いたヒト血漿中の第V因子活性の測定

血小板輸血と止血は、血液貯蔵血小板の機能を調査するために、血液再構成とマイクロ流体フローチャンバーを使用してモデル化されました。このデータは、血小板蓄積病変がin...

マイクロ流体チャンバーモデル止血や血小板輸血に再構成された血液を使用しました<em&gt;インビトロ</em

本稿では、同時に血小板機能および凝固を測定止血の実験モデルを説明します。血小板およびフィブリンの蛍光をリアルタイムで測定し、血小板付着率、凝固速度と凝固の開始が決定されます。モデルは、輸血用の濃縮物で流下血小板凝固促進特性を決定するために使用されます。...

血小板輸血や止血のためのマイクロ流体フローチャンバーモデルは、リアルタイムでの血小板沈着およびフィブリン形成を測定します

患者由来の内皮との全血相互作用を調べるインビトロ血管疾患モデルを紹介する。このシステムは、様々な状況下での原発性内皮細胞の血栓形成特性の研究を可能にする。この方法は、凝固の異なる段階でのその際の血栓性および抗凝固療法において評価するのに特に適している。...

全血-内皮相互作用と血栓動態をリアルタイムで研究するインビトロ微小流体疾患モデル

フィブリンは、止血症および血栓症の間に血栓形成を担当する。濁度アッセイおよびトロンボエラストグラヒ(TEG)は、血栓の相補的評価を提供する相乗的なツールとして利用することができる。これらの2つの技術を組み合わせることで、凝固条件がフィブリン血栓形成にどのような影響を与えるかについてのより多くの洞察を与えることができる。...

相補的な血栓特性解析のための濁度と血栓芽細胞学の活用

in vitro血栓溶解アッセイは、消化されるモデル血栓や血栓溶解が起こっている環境など、生体内条件を再現するのに苦労することがよくありました。ここでは、ChandlerループとReal-Time Fluorometric Flowing Fibrinolysis...

In-vitro血栓溶解モデルにおけるせん断流下におけるChandler Loop形成全血栓の線維素溶解の追跡

フロー下での血小板機能を評価し、マイクロ流体デバイスを使用してシミュレートされた止血蘇生法をモデル化でき、これは外傷および輸血医療に応用できます。...

血小板機能の評価におけるマイクロ流体工学

このプロトコルは、トロンビンとプラズミン生成を同時かつ時間分解で測定し、凝固と線維溶合の統合評価を可能にするナイメーヘン止血アッセイを説明しています。このアッセイは、従来の止血試験の範囲を超えた研究および臨床現場での止血バランスの特徴付けを改善することを目的としています。...

ナイメーヘン止血アッセイ:単一のウェルにおけるトロンビンとプラズミン生成の同時蛍光生成測定

メソッドは、I型コラーゲンと初代ヒト線維芽細胞からなる3次元マトリックスの調製について記載されています。この器官ゲルは、それが組織の間質の基本的な機能を模倣し、顕微鏡の多くの形態が可能であるため、侵襲的な細胞遊走を評価するために有用な基質として機能します。...

器官型コラーゲンIアッセイ：3次元コンテキストでのセルの挙動を評価するための可鍛性プラットフォーム

この記事では、細胞の自己組織化による細胞由来の組織のリングを作成するには、汎用的な方法を概説します。平滑筋細胞は、リング状のアガロース井戸の集合体と7日以内に強固な3次元（3D）の組織を形成するために契約に播種。ミリスケールの組織のリングは機械的なテストに資するものであり、組織の組み立てのためのビルディングブロックとして機能する。...

生体力学的解析と組織工学のための細胞由来の組織のリングを製作する監督セルラーセルフアセンブリ

学ぶマイクロ流体ベースの血栓プロファイリングアッセイで、生体力学的血栓形成を包括的に特徴づける方法。蛍光イメージングを用いて血栓サイズと血小板活性化を7つのパラメータで定量化し、抗血栓薬のスクリーニングや臨床診断に応用可能です。

血栓プロファイリングアッセイ:生体力学的血栓形成を包括的に特徴づけるためのマイクロ流体ベースのプラットフォーム

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