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स्वाद परीक्षा: एक संक्षिप्त और सत्यापित परीक्षण

Published: August 17, 2018 doi: 10.3791/56705
Automatic Translation
1,2, 2, 2, 2, 2, 1,2, 3, 3, 2
1Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania, 2Monell Chemical Senses Center, 3Department of Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery, Division of Rhinology, Hospital of the University of Pennsylvania

Summary

इस प्रोटोकॉल मानव स्वाद प्रतिक्रियाओं के उपाय और एक संक्षिप्त संरचनात्मक मूल्यांकन, एक छोटे स्वाद परीक्षण भी शामिल है, और एक मांयता है विषय सनसनीखेज रिपोर्ट और स्वाद रिसेप्टर जीनोटाइप का उपयोग कर विधि ।

Abstract

चिकित्सा और जैव चिकित्सा अनुसंधान में स्वाद के उभरते महत्व, और इसके आनुवंशिक आधार के बारे में नए ज्ञान, हमें प्रेरित किया है क्लासिक स्वाद के पूरक के लिए दो मायनों में परीक्षण विधियों । सबसे पहले, हम बताते है कि कैसे मुंह का संक्षिप्त मूल्यांकन करने के लिए, जीभ सहित, सुनिश्चित करें कि स्वाद पपिले मौजूद है और प्रासंगिक रोग के सबूत नोट करने के लिए । दूसरा, हम आनुवंशिकी पर आकर्षित करने के लिए कथित कड़वाहट तीव्रता और अजन्मा रिसेप्टर पादी की रिपोर्टों की तुलना द्वारा स्वाद परीक्षण डेटा को मांय । जीनोटाइप के उद्देश्य उपायों और स्वाद अनुभव के व्यक्तिपरक रिपोर्टों के बीच कलह डेटा संग्रह त्रुटियों की पहचान कर सकते हैं, विचलित विषयों या जो लोग नहीं समझ या निर्देशों का पालन किया है । हमारी उंमीद है कि तेजी से और वैध स्वाद परीक्षण के लिए राजी कर सकते है शोधकर्ताओं और चिकित्सकों स्वाद का आकलन करने के लिए नियमित रूप से, स्वाद सुनवाई और दूरदृष्टि के लिए परीक्षण के रूप में आम के रूप में बना । अंत में, क्योंकि शरीर एक्सप्रेस स्वाद रिसेप्टर्स के कई ऊतकों, स्वाद प्रतिक्रियाओं के शरीर में कहीं और ऊतक संवेदनशीलता के लिए एक प्रॉक्सी प्रदान कर सकते हैं, जिससे, एक तेजी से, बिंदु की देखभाल परीक्षण गाइड निदान और एक अनुसंधान उपकरण के रूप में सेवा करने के लिए स्वाद रिसेप्टर का मूल्यांकन प्रोटीन फंक्शन ।

Introduction

मानव स्वाद बोध के उपाय चिकित्सा देखभाल के दोनों भाग और जैव चिकित्सा अनुसंधान का लक्ष्य हो सकता है, अभी तक स्वाद सुनवाई और दृष्टि (तालिका 1) के साथ तुलना में अल्प ध्यान प्राप्त हुआ है । चिकित्सा के नजरिए से, जब चिकित्सकों स्वाद नुकसान की शिकायत रोगियों का मूल्यांकन, ज्यादातर मामलों में वास्तविक नुकसान गंध1है, जो एक असामांय और अक्सर अवैध शिकायत पेश करने के रूप में स्वाद नुकसान की बर्खास्तगी के लिए प्रेरित किया है की है । स्वाद विकृतियों (dysgeusia) अधिक आम है और अक्सर दवाओं या परिधीय तंत्रिका चोट2,3के माध्यमिक प्रभाव से उठता है, लेकिन न तो फार्म का एक प्रभावी उपचार (दवा रोकने के अलावा अन्य) है । चिकित्सकों भी स्वाद नुकसान नजरअंदाज कर दिया है क्योंकि यह अब तक अपने दम पर थोड़ा नैदानिक या शकुन मूल्य था । हालांकि, हालांकि स्वाद की माप एक मेड़ किया गया है, यह अब एक ऐतिहासिक सराहना की पुनरुद्धार के साथ मुख्यधारा की दवा में प्रवेश हो सकता है कि स्वाद एक नैदानिक या शकुन उपकरण4,5हो सकता है । उदाहरण के लिए, कड़वाहट धारणा प्रतिरक्षा समारोह6 या एक रोगी की इच्छा की भविष्यवाणी कर सकते है दवा लेने के लिए7। बहरहाल, बायोमेडिकल शोधकर्ताओं ने काफी हद तक स्वाद की उपेक्षा की है । यह ध्यान, भाग में, तथ्य यह है कि इस संवेदी प्रणाली को समझने में प्रारंभिक प्रगति प्रयोगात्मक मनोविज्ञान8, एक क्षेत्र है जिसके साथ दवा में उन अपेक्षाकृत अपरिचित हो सकता है में अपनी जड़ें है प्रतिबिंबित कर सकते हैं । इसके अलावा, स्वाद में नए सिरे से ब्याज मानकीकृत स्वाद तरीकों9 कि पहले के तरीकों10है, जो व्यापक समय और नैदानिक सेटिंग्स के लिए अनुपयुक्त है पर निर्माण में प्रवेश किया है । अंत में, स्वाद उपायों में विश्वास कमजोर हो सकता है क्योंकि विषयों अपने अनुभव और उनकी टिप्पणियों के सत्यापन पर रिपोर्ट अब तक कमी है । हमारी आशा है कि एक सरल उपाय है कि जांचकर्ताओं या चिकित्सकों आसानी से दोनों घटकों के साथ लोकप्रियता में लाभ होगा प्रशासन कर सकते हैं । यहां हम एक साधारण स्वाद परीक्षा प्रोटोकॉल है कि तीन भागों: मौखिक गुहा का आकलन, स्वाद परीक्षण, और एक मांयता कदम का वर्णन अजन्मे जीनोटाइप का उपयोग कर । सबसे पहले, हम इन प्रक्रियाओं, जो चिकित्सा में सरल प्रथाओं विलय प्रयोगात्मक मनोविज्ञान और जीनोटाइप और आनुवंशिकी का उपयोग प्रतिक्रियाओं के सत्यापन से संवेदी उपायों के लिए जैविक संदर्भ प्रदान करते हैं ।

स्वाद धारणा मुंह में शुरू होता है, तो एक प्रभावी स्वाद परीक्षा स्पष्ट मौखिक रोगों, लालिमा, सूजन और अंय disease के लिए एक संक्षिप्त नैदानिक मूल्यांकन शामिल करने की जरूरत है । जीभ, gingiva, मुंह की फर्श, buccal म्यूकोसा, ओष्ठ म्यूकोसा, हार्ड तालु, और retromolar trigone: मौखिक गुहा सात सबसाइट्स शामिल हैं । स्वस्थ प्रतिभागियों या अच्छी तरह से परिभाषित रोगों के साथ उन पर ध्यान केंद्रित मानव स्वाद के पिछले अध्ययन, लेकिन स्वाद परीक्षण चिकित्सा परीक्षा में नियमित हो जाता है के रूप में, यह प्रक्रिया के भाग के रूप में मौखिक गुहा की स्थिति रिकॉर्ड करने के लिए महत्वपूर्ण है ।

जीभ ही एक पेशी म्यूकोसा में रहता संरचना है; अपने पृष्ठीय सतह बिंदीदार पपिले हैं, छोटे उठाया संरचनाओं कि जीभ अपनी अनूठी बनावट दे और स्वाद रिसेप्टर कोशिकाओं होते हैं । हम उनके आकार द्वारा पपिले वर्गीकृत: fungiform, filiform, foliate, और circumvallate । Fungiform पपिले (एफ पी) जीभ पर anterolaterally स्थित है और गोल कर रहे हैं, एक मशरूम11आकार के साथ । जांचकर्ताओं FPके लिए कई उपयोगी तरीके प्रकाशित किया है और हम माप प्रोटोकॉल12,13,14,15,16के लिए इन स्रोतों के लिए पाठकों को सीधे । Foliate पपिले, एक पुस्तक (फोलिया) के पंनों की तरह आकार, पार्श्व पीछे जीभ11सतह पर विशेष रूप से स्थित हैं । Circumvallate पपिले, जीभ के आधार के sulcus terminalis में पाया, बड़े गुंबद के आकार श्लैष्मिक दीवारों से घिरा संरचनाओं (लैटिन circum, "चारों ओर हैं," + vallum, "दीवार")11। सबसे कई पपिले, filiform, लंबी और पतली हैं और स्वाद रिसेप्टर्स शामिल नहीं है.

लोगों को जीभ शरीर रचना विज्ञान में अलग । जबकि इस शारीरिक भिंनता के सूत्रों अज्ञात हैं, यह भाग में अजन्मा आनुवंशिक भिंनता द्वारा निर्धारित किया जाता है, जांचकर्ताओं के साथ dizygotic जुड़वां और monozygotic जुड़वां17के बीच में ६०% सामंजस्य के बीच 31% भाषा एनाटॉमी के सामंजस्य रिपोर्टिंग । इल्लों घनत्व भी लोगों के बीच अलग है, और यद्यपि दुर्लभ, कम से एक आनुवंशिक रोग (पारिवारिक dysautonomia) स्वाद के एक जन्मजात अनुपस्थिति में परिणाम पपिले18,19,20। इस प्रकार, psychophysical परीक्षण करने से पहले, यह संक्षिप्त मूल्यांकन के भाग के रूप में FP की उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए उपयोगी है और रिश्तेदार के आकार और जीभ और मौखिक रोग के सबूत के रंग को ध्यान दें ।

स्वाद पपिले संवेदी कोशिकाओं है कि जब शुरू स्वाद सनसनी उत्तेजित होते हैं । नमकीन, खट्टे, कड़वे, मीठे, और उमामी: मनुष्य स्वाद के कम से कम पांच वर्गों संवेदन करने में सक्षम हैं । जबकि नमकीन, मिठाई, और उमामी स्वाद सोडियम क्लोराइड, ग्लूकोज, और एमिनो एसिड, क्रमशः, कड़वाहट और खट्टी के जीवाणु अपघटन से संभावित विषाक्त पदार्थों और एसिड की उपस्थिति का संकेत युक्त मूल्यवान खाद्य स्रोतों की उपस्थिति का संकेत भोजन, क्रमशः, और प्रेरित aversive व्यवहार21। नमकीन और खट्टे स्वाद आयन चैनल के सक्रियकरण के माध्यम से transduced है स्वाद कोशिकाओं के कुछ प्रकार में पाया, हालांकि नमक transduction की समझ विकसित हो रहा है और यह प्रकार मैं कोशिकाओं के रूप में अच्छी तरह से22,23की आवश्यकता हो सकती है । कड़वा, मीठा, और उमामी प्रकार द्वितीय स्वाद कोशिकाओं पर जी प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर्स के सक्रियण से उत्पन्न, एक विशेष स्वाद के लिए प्रत्येक अभ्यस्त. Heterodimers तीन विशेष रिसेप्टर्स की उपइकाईयों के transduce मिठाई और उमामी जबकि कड़वे यौगिकों 25 अलग कड़वा रिसेप्टर्स24के एक समूह को सक्रिय. ये कड़वा रिसेप्टर्स कई कड़वे यौगिकों का जवाब कर सकते हैं, और एक भी कड़वा यौगिक अक्सर एक से अधिक रिसेप्टर25को उत्तेजित करता है. स्वाद के आणविक आधार के बारे में ज्ञान का हाल ही में विस्तार के बावजूद, उपंयास26 और पारंपरिक पांच स्वाद गुण (जैसे, कैल्शियम27 या फैटी एसिड28 धारणा से परे नई खोजों) आगे झूठ बोल सकते हैं ।

इन रिसेप्टर्स के लिए कोड के रूप में डीएनए अनुक्रम में स्पष्ट रूप से अलग कर सकते हैं और इसलिए लोगों के बीच समारोह, और शरीर के कई ऊतकों एक्सप्रेस ये जीन21,29 : वहाँ कम से कम दो रिसेप्टर्स के स्वाद परिवारों के आश्चर्य की बात पहलू हैं , 30 , 31. इन extraoral साइटों मस्तिष्क, थायराइड, ऊपरी और निचले श्वसन तंत्र, और जठरांत्र संबंधी मार्ग, कई अंय लोगों के बीच में शामिल21,29,30,31। हालांकि इन स्थानों पर स्वाद रिसेप्टर्स पारंपरिक अर्थों में स्वाद धारणा में भाग नहीं है, वे संभावना स्थानीय रासायनिक पर्यावरण29,३२भावना । उदाहरण के लिए, ऊपरी श्वसन तंत्र के ciliated उपकला कड़वा रिसेप्टर T2R38 (कड़वा स्वाद रिसेप्टर ३८) है, जो रासायनिक यौगिकों बैक्टीरिया द्वारा उत्पादित करने के लिए प्रतिक्रिया करता है और इस तरह के रूप में सहज प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया३२, प्रभावित करता है mucociliary निकासी और विरोधी माइक्रोबियल पेप्टाइड्स और नाइट्रिक ऑक्साइड के स्तर में वृद्धि. इस खोज क्रोनिक rhinosinusitis, जीर्ण बैक्टीरियल संक्रमण और ऊपरी श्वसन तंत्र और paranasal साइनस की सूजन की एक बीमारी के लिए चिकित्सा निहितार्थ है ।

स्वाद परीक्षा हम यहां का वर्णन करने के लिए विशेष प्रासंगिकता की है कि T2R38 कड़वा स्वाद रिसेप्टर, TAS2R38 जीन द्वारा इनकोडिंग, आनुवंशिक परिवर्तनशीलता और इसलिए चर स्वाद संवेदनशीलता प्रदर्शित करता है । कड़वा यौगिक phenylthiocarbamide के लिए अवधारणात्मक मतभेद (PTC) पहले केमिस्ट आर्थर फॉक्स३३द्वारा वर्णित किया गया; बाद में इस यौगिक T2R38 रिसेप्टर३४के एक एगोनिस्ट के रूप में पहचान की गई. व्यक्तिगत मतभेद TAS2R38 जीन है, जो तीन एकल न्यूक्लियोटाइड बहुरूपताओं, प्रत्येक उपज एमिनो एसिड प्रतिस्थापन (A49P, A262V, और I296V है की डीएनए अनुक्रम से उत्पंन; एक: Alanine, पी: रेखा, वी: वैलिन, मैं: Isoleucine) । दो आम haplotypes, पव और अवि के साथ, पव/पव त व्यक्तियों को PTC ("tasters") के अति संवेदनशील, avi/avi व्यक्ति अपेक्षाकृत असंवेदनशील होने के नाते ("non-tasters"), और heterozygous avi/पव त व्यक्तियों को उनकी संवेदनशीलता में अधिक परिवर्तनशील ३५. आनुवंशिक भिन्नता कड़वी धारणा को प्रभावित करने के और अधिक उदाहरण हैं, जैसे, स्वाद रिसेप्टर T2R19, TAS2R19 जीन द्वारा इनकोडिंग, इसी तरह प्रदर्शन आनुवंशिक परिवर्तनशीलता और भिन्न स्वाद कड़वा यौगिक के लिए संवेदनशीलता कुनैन३६. इसी तरह, TAS2R31 में भिंनता उच्च शक्ति मिठास३७,३८,३९में से एक की कथित कड़वाहट को प्रभावित करता है ।

यहां हम एक तेजी से विधि का वर्णन करने के लिए स्वाद की एक रोगी की भावना है कि नैदानिक चिकित्सा, प्रयोगात्मक मनोविज्ञान और आनुवंशिकी में उच्च उपज प्रोटोकॉल पर ड्रॉ विशेषताएं ।

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Protocol

पेंसिल्वेनिया विश्वविद्यालय के संस्थागत समीक्षा बोर्ड इस प्रोटोकॉल को मंजूरी दे दी । हम विषयों को छोड़ दिया अगर वे उंर के 18 साल से कम थे या गर्भवती थे ।

1. मौखिक गुहा मूल्यांकन: रोग आकलन और Papilla पहचान

  1. विषय को मुंह खोलने की हिदायत दी ।
  2. एक penlight या headlamp के रूप में एक प्रकाश स्रोत का उपयोग करना, मौखिक गुहा प्रबुद्ध और क्षेत्र (जीभ, मुंह की मंजिल, buccal म्यूकोसा, ओष्ठ म्यूकोसा, gingiva, हार्ड तालु, और retromolar trigone) की सात सबसाइट की जांच ।
    1. जीभ की पृष्ठीय सतह कल्पना । इस विषय को निर्देश जीभ उठा, और ventral जीभ की सतह और मुंह की मंजिल की जांच, के लिए परीक्षा के विस्तार सुनिश्चित करने के पीछे दाढ़ ।
    2. एक जीभ अवसादग्रस्तता का उपयोग करना, विषय के गाल lateralize buccal म्यूकोसा कल्पना, साथ ही पार्श्व gingiva द्विपक्षीय ऊपरी और निचले दांत आसपास के ।
    3. ओष्ठ श्लैष्मिक और पूर्वकाल gingiva की सतहों को विज़ुअलाइज़ करने के लिए ऊपरी और निचले होंठ उठाने से परीक्षा को पूर्वकाल से बढ़ाएं ।
    4. अंत में, हार्ड तालु और retromolar trigone कल्पना ।
    5. नोट घावों, घर्षण, और जन या सूजन के लक्षण ।
    6. फिर, विषय को मुंह खोलो और जीभ को विस्तार से पूछो ।
    7. एक प्रकाश स्रोत का उपयोग करने के लिए जीभ की पृष्ठीय सतह कल्पना ।
    8. उपस्थिति या FP, जैसे, एक चिकनी जीभ सतह की अनुपस्थिति की पहचान
  3. स्वाद परीक्षण के साथ आगे बढ़ने से पहले मौखिक गुहा परीक्षा के परिणाम पर ध्यान दें । यदि जांचकर्ताओं एक चिकित्सा संदर्भ में इस स्वाद परीक्षण आचरण, अप्रत्याशित निष्कर्ष आगे काम-अप शीघ्र होना चाहिए ।

2. Psychophysical स्वाद परीक्षण

नोट: संसाधनों और विवरण का पालन करें psychophysical स्वाद परीक्षण के लिए निंन वेब पेज से भी उपलब्ध हैं: https://osf.io/hn87s/।

  1. Tastant तयारी
    1. नीचे निर्देशित के रूप में समाधान तैयार करें । एक volumetric कुप्पी का उपयोग कर प्रत्येक समाधान करने के लिए सांद्रता के सटीक ± ०.०००२ M. ultrapure पानी का उपयोग कर नमूनों को भंग सुनिश्चित करने के लिए । अनुसंधान लक्ष्यों के लिए यौगिकों के चुनाव दर्जी । यहां शामिल यौगिकों एक उदाहरण के रूप में होती हैं ।
      1. Denatonium benzoate (कड़वा): ४.९९ x 10-3 एम Denatonium benzoate के 1 L पानी में Denatonium benzoate के २.२२८ g को भंग कर के शेयर सॉल्यूशन तैयार करें । जोड़ें १८० µ इस शेयर समाधान के एल एक ५०० मिलीलीटर volumetric कुप्पी । ५०० मिलीलीटर के लिए मात्रा लाने के लिए पानी जोड़ें, १.८ µ एम के अंतिम एकाग्रता के साथ एक समाधान का निर्माण
      2. पीटीसी (कड़वा): पीटीसी की जगह ०.०१३५ ग्राम एक ५०० एमएल volumetric कुप्पी में । मात्रा को ५०० मिलीलीटर में लाने के लिए पानी डालें । PTC को भंग करने के लिए मुश्किल है, तो कुप्पी में एक हलचल बार जगह और एक गर्म थाली पर ७० डिग्री सेल्सियस के लिए समाधान गर्मी । सभी घुला हुआ (~ 15 मिनट) भंग कर दिया है जब तक समाधान मिश्रण करने के लिए हलचल बार का प्रयोग करें. यह १८० µ एम के अंतिम एकाग्रता के साथ एक समाधान पैदा करता है ।
      3. कुनैन (कड़वा): कुनैन एचसीएल डाईहाइड्रेट के प्लेस ०.०११ जी एक ५०० एमएल volumetric कुप्पी में । ५०० मिलीलीटर के लिए मात्रा लाने के लिए पानी जोड़ें, ५६ µ एम के अंतिम एकाग्रता के साथ एक समाधान का निर्माण
      4. सोडियम क्लोराइड (नमकीन): एक ५०० मिलीलीटर volumetric कुप्पी में सोडियम क्लोराइड की जगह ७.५ ग्राम । ५०० मिलीलीटर के लिए मात्रा लाने के लिए पानी जोड़ें, ०.२५ मीटर की एक अंतिम एकाग्रता के साथ एक समाधान का निर्माण
      5. सुक्रोज (sweet): सुक्रोज की जगह ६० ग्राम एक ५०० मिलीलीटर volumetric कुप्पी में । ५०० मिलीलीटर के लिए मात्रा लाने के लिए पानी जोड़ें, ०.३५ मीटर की एक अंतिम एकाग्रता के साथ एक समाधान का निर्माण
    2. 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर स्वाद समाधान । कुछ आमतौर पर इस्तेमाल किया स्वाद यौगिकों प्रकाश के प्रति संवेदनशील हैं, और जांचकर्ताओं उंहें पंनी या अंय सामग्री में लपेट के लिए प्रकाश अपने जोखिम को कम करना चाहिए ।
    3. समाधान तैयारी में सामान्य त्रुटियों की पहचान करने के लिए, एक चखने कप पुराने समाधान के साथ और एक नए समाधान के साथ भरें । वे शक्ति में समान हैं सत्यापित करने के लिए प्रत्येक समाधान स्वाद.
    4. एक नियंत्रण समाधान के रूप में पानी शामिल करें, पहली स्थिति में प्रस्तुत करने के लिए सत्यापित विषयों परीक्षण प्रक्रिया समझ । प्रत्येक tastant और नियंत्रण के साथ वर्तमान विषयों tastant दो बार, एक ही tastant लगातार पेश करने से बचने के लिए ध्यान ले । उदाहरण के लिए, पांच अद्वितीय tastants परीक्षण करने के लिए, प्रश्नावली में बारह नमूनों की सुविधा (२.२ देखें): पांच tastants और पानी, प्रत्येक दो बार प्रस्तुत किया । Aliquot 5 मिलीलीटर पानी की एक अलग कांच जुटाना शीशियों में । एक गहरे नीले रंग की संख्या 1 असर स्टीकर के साथ शीशी टोपियां लेबल ।
    5. प्रत्येक tastant के लिए इस प्रक्रिया को दोहराएँ । लेबल शीशी टोपियां एक परिपत्र स्टीकर के साथ प्रस्तुति के क्रम और कुछ रंग कोड के अनुसार, नीचे विस्तृत उदाहरण; स्वाद प्रश्नावली पर लेबल के साथ शीशी लेबल मैच (२.२ देखें) ।
      पानी (डार्क ब्लू)
      कुनैन (हल्का नीला)
      NaCl (हरा)
      PTC (पीला)
      सुक्रोज (नारंगी)
      Denatonium benzoate (लाल)
      NaCl (गहरा नीला)
      Denatonium benzoate (हल्का नीला)
      पानी (green)
      कुनैन (पीली)
      सुक्रोज (नारंगी)
      पीटीसी (लाल)
    6. उंहें दो बक्से, नमूने 1-6 और 7-12 बक्से में लेबल "बॉक्स एक" और "बॉक्स बी," क्रमशः (चित्रा 1) में रखकर पैकेज नमूने; अंय पैकेजिंग रणनीतियों संभव हो रहे हैं ।

Figure 1
चित्रा 1: स्वाद किट । विषयों किट का उपयोग करने के लिए स्वाद तीव्रता और विभिंन रंग कोडित tastants की गुणवत्ता की दर । बॉक्स A में नमूने हैं 1 – 6, बॉक्स B में 7 – 12 शामिल हैं. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

  1. स्वाद प्रश्नावली
    1. स्वाद प्रश्नावली दर्ज़ा स्वाद तीव्रता और प्रत्येक tastant (चित्रा 2) के स्वाद की गुणवत्ता की पहचान के लिए एक मजबूर पसंद के लिए एक श्रेणी के पैमाने का उपयोग कर तैयार करें ।
    2. उचित रंग और स्वाद प्रश्नावली में उपयुक्त नमूना के बगल में संख्या के परिपत्र लेबल प्लेस (2.1.6 देखें) ।

Figure 2
चित्रा 2: स्वाद प्रश्नावली प्रविष्टि, tastant गुणवत्ता के लिए तीव्रता दर्ज़ा और मजबूर पसंद प्रतिक्रिया के लिए एक श्रेणी के पैमाने पर शामिल । स्वाद प्रश्नावली रंग-कोडित tastants परीक्षण के प्रत्येक के लिए एक प्रविष्टि शामिल होंगे । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

  1. स्वाद परीक्षण प्रशासन
    1. 12 नमूनों के लिए प्रविष्टियों युक्त बॉक्स a, बॉक्स B, पानी की एक बोतल, खाली कप, कलम, और कलम और कागज स्वाद प्रश्नावली के साथ विषयों प्रदान करें । किसी भी अध्ययन की अवधि के दौरान बोतलबंद पानी की एक ही ब्रांड का उपयोग करें । एक कागज प्रश्नावली के लिए एक विकल्प के रूप में, बंदरगाह ऑनलाइन सर्वेक्षण सॉफ्टवेयर में सामग्री और गोली या डेस्कटॉप के माध्यम से प्रशासित/ एक नमूना टेम्पलेट https://osf.io/hn87s/पर उपलब्ध है ।
    2. विषयों कि वे दोनों तीव्रता और गुणवत्ता (जैसे, नमकीन, खट्टे, कड़वा, मिठाई, या कोई स्वाद) की दर के लिए कहा जाएगा निर्देश प्रत्येक tastant की । इसके अलावा, विषयों वे सभी गुणों का अनुभव नहीं कर सकते है सूचित करें ।
    3. परीक्षण प्रक्रिया की व्याख्या, इस प्रकार है: पानी के साथ अपने मुंह दो बार कुल्ला और यह थूक बाहर कप में प्रदान की । अपने मुंह में 1 नमूना के सभी डालो और कप में समाधान थूकना से पहले 5 सेकंड के लिए वहां पकड़ो । कुल्ला या समाधान निगल नहीं है । सर्कल एक 13 कार्यक्षेत्र नमूना तीव्रता के साथ इसी लाइनों में से एक, 0 से 12 के पैमाने पर, "सभी में कोई तीव्रता" से "बहुत तीव्र" करने के लिए और स्वाद का वर्णन करने के लिए एक एकल गुणवत्ता का चयन करें । इसके बाद, अगले नमूने के लिए आगे बढ़ने से पहले दो बार पानी के साथ अपने मुंह कुल्ला ।
    4. विषय चखने और रेटिंग नमूना 1 (पानी) का निरीक्षण करें । दर्ज़ा से "सभी में कोई तीव्रता विचलित" और कोई स्वाद चाहिए, "परीक्षण के लिए आगे बढ़ने की अनुमति देने से पहले प्रश्नावली निर्देश दोहराना ।
    5. पूर्णता के लिए समाप्त प्रश्नावली की समीक्षा करें ।
    6. उन विषयों को घेरे वाले वर्टिकल लाइंस से 0 से 12 के स्केल पर स्कोर तीव्रता रेटिंग । प्रत्येक tastant के लिए दो तीव्रता रेटिंग औसत; इस मान का उपयोग विश्लेषण के लिए किया जाएगा ।

3. जीनोटाइप

  1. एक लार डीएनए संग्रह किट का उपयोग कर प्रत्येक विषय से लार ले लीजिए ।
  2. निर्माता निर्देशों का पालन करके नमूने से जीनोमिक डीएनए शुद्ध ।
  3. निर्धारित TAS2R38 जीनोटाइप SNP genotyping परख (rs713598, rs1726866, rs10246939)४०का उपयोग कर ।
  4. SNP genotyping परख (rs10772420)३६का उपयोग कर TAS2R19 जीनोटाइप निर्धारित करें ।

4. जीनोटाइप-phenotype मान् यता

  1. TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) और निम्न वेब पेज पर TAS2R19 (rs10772420) के लिए genotyped से अधिक ८०० विषयों से उपलब्ध पूलिंग नियंत्रण डेटा की समीक्षा करें: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.
  2. एक विषय के TAS2R38 जीनोटाइप के आधार पर, एक ही जीनोटाइप के व्यक्तियों के लिए मानदंडों के साथ कड़वा यौगिक PTC के लिए अपने या उसके psychophysical स्वाद प्रतिक्रिया की तुलना करें । प्रतिक्रियाएं मिलनी चाहिए; हालांकि, दुर्लभ मामलों में, TAS2R38 जीनोटाइप नहीं पूरी तरह से भविष्यवाणी है PTC संवेदी परिणाम३५।
  3. प्रतिक्रियाओं महत्वपूर्ण फर्क दिखाने चाहिए, एक ही TAS2R19 जीनोटाइप के व्यक्तियों के लिए मानदंडों के साथ कुनैन के लिए है विषय स्वाद प्रतिक्रिया की तुलना करें । कुनैन तीव्रता और जीनोटाइप के लिए प्रतिक्रियाएं३६से मेल खाना चाहिए । सभी स्वाद परिणाम जीनोटाइप के साथ संगत करने के लिए विफल होना चाहिए, यह संभव है कि विषय (a) समझ में नहीं आता है (b) नकली रेटिंग या रोग का बहाना प्रदान कर रहा है या (c) जांचकर्ता की ओर से एक डेटा संग्रह त्रुटि किया गया है ।
  4. डेटा बिंदु outliers पहचानें, और शायद उंहें विश्लेषण से बाहर (चित्रा 3) । उद्देश्य genotyping के साथ संवेदी परिणाम के पत्राचार psychophysical परीक्षण प्रक्रिया की विश्वसनीयता सत्यापित करता है ।

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Representative Results

स्वाद परीक्षण से परिणाम सभी विषयों का मूल्यांकन (n = ८४०) के लिए परित किया गया है और जीनोटाइप द्वारा अलगाव के बाद प्रस्तुत कर रहे हैं । पूर्ण डेटा सेट https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/पर पहुंच योग्य है और प्रत्येक tastant मूल्यांकन के लिए और TAS2R38 और TAS2R19 पादी के लिए समीक्षा की जा सकती है । परिणाम TAS2R38 रिसेप्टर जीनोटाइप (चित्रा 3) द्वारा समूहीकृत विषयों के बीच PTC के लिए अवधारणात्मक स्वाद मतभेदों के अस्तित्व की पुष्टि करें । PTC तीव्रता की रेटिंग TAS2R38 पादी भर में काफी अलग हैं (avi/avi, ०.८६; AVI/पव, ६.९५; पव/पव, ८.१८; एक तरफ़ा ANOVA, p < 0.0001) । कुनैन तीव्रता के परिणाम भी TAS2R19 जीनोटाइप भर में काफी अलग हैं (A:A, ३.७७; A:G, ३.०८; G:G, २.२६; एक तरफ़ा ANOVA, p < 0.0001) ।

Figure 3
चित्रा 3: PTC स्वाद प्रश्नावली TAS2R38 जीनोटाइप द्वारा परिणाम । स्वाद प्रश्नावली TAS2R38 जीनोटाइप द्वारा एक श्रेणी पैमाने पर PTC कड़वाहट तीव्रता रेटिंग के आधार पर व्यक्तियों को अलग करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है (* p < 0.0001) । यहां हम कुछ outliers, डेटा बाड़ के बाहर स्थित अंक ("मूंछ") इस boxplot के (जैसे, बाहर १.५ बार ऊपरी चतुर्थक ऊपर interquartile रेंज और निचले चतुर्थक नीचे) कृपया इस के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें देखो चित्रा.

मीट्रिक स्वाद सुनवाई दृष्टि श्रवण स्वाद/ दृष्टि स्वाद/
Pubmed ३६,३०२ १२३,१०१ १७१,५२२ ३.३९ ४.७२
NIH रिपोर्टर ६,१४४ २३,८७३ ५४,८५८ ३.८९ ८.९३
हम PubMed और NIH रिपोर्टर के एक पाठ खोज आयोजित एक महत्वपूर्ण शब्द के रूप में एक विशेष भावना का उपयोग कर । PubMed प्रकाशित प्रयोगात्मक परिणाम और NIH रिपोर्टर के एक ऑनलाइन डाटाबेस है एक ऑनलाइन डाटाबेस है कि सूचीबद्ध अनुसंधान स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों के माध्यम से वित्त पोषित परियोजनाओं । ' श्रवण/स्वाद ' स्तंभ में मान एक अनुपात दिखाते हैं, यानी, स्वाद की तुलना में सुनने में तीन गुना अधिक प्रकाशनों को संदर्भित करते हैं । हम नीचे दिए गए यूआरएल पर 31 जनवरी, २०१८ 10 EST पर पहुंचा ।
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/
https://projectreporter.nih.gov/reporter.cfm

तालिका 1: रिकॉर्ड ' स्वाद ' बनाम ' सुनवाई ' और ' विजन ' खोजशब्दों के रूप में उपयोग की पहचान की ।

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Discussion

इस विधि का महत्व यह है कि यह दवा (मौखिक परीक्षा), प्रयोगात्मक मनोविज्ञान (स्वाद परीक्षण) और आनुवंशिकी (एक मांयता कदम) से सुविधाओं के साथ एक multidisciplinary दृष्टिकोण का उपयोग करता है । स्वाद जानकारी के लिए एक नैदानिक और शकुन उपकरण के रूप में विकसित होने की संभावना है क्योंकि स्वाद शरीर में कहीं प्रोटीन के समारोह में एक खिड़की प्रदान करता है । एक प्रयोगात्मक मनोविज्ञान दृष्टिकोण से, एक साधारण परीक्षा के अलावा जो प्रामाणिक स्वाद समारोह के अध्ययन के लिए उपयुक्त नहीं है विषयों की पहचान कर सकते हैं । एक आनुवंशिकी दृष्टि से, इन प्रक्रियाओं को आसानी से reproducible जीनोटाइप-phenotype संबंधों का अध्ययन करने के लिए एक सरल तरीका प्रदान करते हैं ।

मापने मानव स्वाद कई महत्वपूर्ण विशेषताएं है कि अमूर्त लेकिन महत्वपूर्ण विषय की मदद करने में आसानी से लग रहा है और कार्य करने के लिए उंमुख सहित, और विशेष रूप से चिकित्सा सेटिंग्स में, प्रक्रिया को कम रखने, तो इस विषय का ध्यान नहीं है डगमगाने. यह भी महत्वपूर्ण है हस्तक्षेप अगर विषयों असहज दिखाई देते हैं, और मुसीबत अपनी चिंताओं को गोली मार, ऐसे परीक्षण उत्तेजनाओं की प्रकृति के बारे में के रूप में । विषयों अक्सर जानने के लिए कि परीक्षण उत्तेजनाओं के अधिकांश खाद्य पदार्थों में हैं, जैसे, नमक और चीनी आश्वस्त हैं । इस प्रक्रिया है, जबकि सरल, महत्वपूर्ण सीमाएं हैं । जबकि मौखिक परीक्षा चिकित्सा प्रशिक्षण के साथ जांचकर्ताओं के लिए नियमित है, प्रयोगात्मक मनोविज्ञान या आनुवंशिकी प्रशिक्षण के साथ उन मौखिक रोग पहचानने में कम सतही होने की संभावना है । एक और सीमा दर्ज़ा पैमाने है कि जब आसानी से कोई पूर्व प्रशिक्षण के साथ विषयों से समझ में, व्यक्तियों, या४१व्यक्तियों के समूहों के बीच मतभेद अस्पष्ट हो सकता है । अंत में, कैसे डेटा के सांख्यिकीय प्रसंस्करण में जीनोटाइप और phenotype के बीच बेमेल के साथ विषयों के इलाज के लिए पर मार्गदर्शन अभी तक सरल नियमों में संहिताबद्ध नहीं है, जैसे, छोड़ने विषयों जो कुछ कसौटी को पूरा करने में विफल ।

भविष्य के अनुप्रयोगों के लिए आगे खोज, स्वाद परीक्षा दृष्टि और सुनवाई परीक्षण है, जो कैसे स्वाद मानव रोग और अच्छी तरह से संबंधित है और हमें इस सरल परीक्षण को परिष्कृत करने की अनुमति होगी की हमारी समझ में वृद्धि होगी जैसे दवा के नियमित भागों बन सकता है ।

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Disclosures

एनएसी और DRR समीक्षा के तहत एक पेटेंट पर सह अंवेषकों रहे है (चिकित्सा और निदान श्वसन संक्रमण के लिए 61/697652, WO2013112865) ।

Acknowledgments

स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों से पुरस्कार इस शोध का समर्थन किया (R01DC013588 को एनएसी, R21DC013886 को एनएसी और DRR, और NIDCD प्रशासनिक अनुसंधान के पूरक चिकित्सक के Chemosensory अनुसंधान में वैज्ञानिकों के उद्भव को बढ़ावा देने के लिए JED) । हम OD018125 से NIH फंड के साथ भाग में खरीदे गए उपकरणों से जीनोटाइप डेटा एकत्र किया ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Disposable diagnostic penlight Primacare DL-9223
UltraLite Pro headlight Integra LifeSciences AX2100BIF
Millipore Q-Gard 2 water purification system EMB Millipore QGARD00D2
Denatonium benzoate  Sigma Aldrich D5765
Phenylthiocarbamide Sigma Aldrich P7629
Quinine hydrochloride dihydrate Sigma Aldrich Q1125
Sodium Chloride Sigma Aldrich S1679
Sucrose Sigma Aldrich S0389
Glass scintillation vials Thomas Scientific 1230L59 Same as Wheaton catalog no. 986580
Oragene Discover OGR-500 DNA collection kit DNA Genotek OGR-500
prepIT L2P Protocol reagents DNA Genotek PT-L2P-5
rs713598 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___8876467_10
rs1726866 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___9506827_10
rs10246939 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___9506826_10
rs10772420 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___1317426_10

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References

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Douglas, J. E., Mansfield, C. J., Arayata, C. J., Cowart, B. J., Colquitt, L. R., Maina, I. W., Blasetti, M. T., Cohen, N. A., Reed, D. R. Taste Exam: A Brief and Validated Test. J. Vis. Exp. (138), e56705, doi:10.3791/56705 (2018).

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