간단하고 비침습적인 기술인 동공 측정법은 정상적인 청각 동물 및 다양한 청각 병리의 동물 모델에서 소음 내 청력 역치를 결정하는 방법으로 제안됩니다.
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간단하고 비침습적인 기술인 동공 측정법은 정상적인 청각 동물 및 다양한 청각 병리의 동물 모델에서 소음 내 청력 역치를 결정하는 방법으로 제안됩니다.
소음 노출은 감각신경성 난청의 주요 원인입니다. 소음성 난청의 동물 모델은 난청의 근본적인 해부학적 및 생리학적 병리에 대한 기계론적 통찰력을 생성했습니다. 그러나 청력 손실이 있는 인간에서 관찰된 행동 결함을 동물 모델의 행동 결함과 연관시키는 것은 여전히 어려운 일입니다. 여기서 동공 측정법은 동물과 인간의 행동 데이터를 직접 비교할 수 있는 방법으로 제안됩니다. 이 방법은 변형된 괴짜 패러다임에 기초한다 - 자극의 반복적인 표현에 피험자를 습관화하고 반복된 자극으로부터 어떤 매개변수적 방식으로 변하는 일탈적 자극을 간헐적으로 제시한다. 기본 전제는 반복되는 자극과 비정상적인 자극 사이의 변화가 피험자에 의해 감지되면 반복된 자극에 의해 유도된 것보다 더 큰 동공 확장 반응을 유발한다는 것입니다. 이 접근법은 청력 손실 연구를 포함하여 청각 연구에 널리 사용되는 동물 모델인 기니피그의 발성 분류 작업을 사용하여 시연됩니다. 한 발성 범주의 발성을 표준 자극으로, 두 번째 범주를 다양한 신호 대 잡음비로 잡음에 포함된 괴상한 자극으로 제시함으로써, 괴상한 범주에 대한 동공 확장의 크기는 신호 대 잡음비에 따라 단조롭게 변한다는 것이 입증되었습니다. 그런 다음 성장 곡선 분석을 사용하여 이러한 동공 확장 반응의 시간 경과와 통계적 유의성을 특성화할 수 있습니다. 이 프로토콜에서는 기니피그를 설정에 적응시키고, 동공 측정을 수행하고, 데이터를 평가/분석하기 위한 자세한 절차를 설명합니다. 이 기술은 이 프로토콜에서 정상 청력을 가진 기니피그에서 입증되지만, 이 방법은 각 피험자 내에서 다양한 형태의 청력 손실의 감각 효과를 평가하는 데 사용될 수 있습니다. 이러한 효과는 동시 전기생리학적 측정 및 사후 해부학적 관찰과 상관관계가 있을 수 있습니다.
동공 직경(PD)은 다양한 요인의 영향을 받을 수 있으며 시간이 지남에 따라 변하는 PD 측정을 동공 측정법이라고 합니다. PD는 홍채 괄약근 근육(수축에 관여)과 홍채 확장근(확장에 관여)에 의해 제어됩니다. 수축 근육은 부교감 신경계에 의해 신경지배되고 콜린성 돌기를 포함하는 반면, 홍채 확장기는 노르아드레날린성 및 콜린성 돌기를 포함하는 교감신경계에 의해 신경지배된다 1,2,3. PD 변화를 유도하는 가장 잘 알려진 자극은 휘도-수축 및 동공의 팽창 반응은 주변광 강도의 변화에 의해 생성될 수 있다2. PD는 초점 거리2의 함수로도 변합니다. 그러나, PD는 또한 비휘도 관련 변동(4,5,6,7)을 나타낸다는 것이 수십 년 동안 알려져 왔다. 예를 들어, 내부 정신 상태의 변화는 일시적인 PD 변화를 이끌어 낼....
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모든 실험 절차에 대해 IACUC(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받고 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH 지침을 준수하십시오. 미국에서 GP는 추가로 미국 농무부 (USDA) 규정의 적용을받습니다. 이 프로토콜의 모든 절차는 University of Pittsburgh IACUC의 승인을 받았으며 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH 지침을 준수했습니다. 이 실험을 위해, ~ 600-1,000 g 무게의 4 개월에서 10 개월 사이의 3 마리의 수컷 야생형, 색소 GP가 사용되었다.
1. 수술 절차
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동공 측정은 실험 과정에서 ~ 600-1,000 g의 무게를 가진 3 명의 남성 색소 GP에서 수행되었습니다. 이 프로토콜에 설명된 바와 같이, 콜-인-노이즈(call-in-noise) 분류 임계값을 추정하기 위해, 자극 제시를 위해 괴상한 패러다임이 사용되었다. 괴상한 패러다임에서는 주어진 SNR에서 백색 잡음에 포함된 한 범주(우는 소리)에 속하는 통화가 표준 자극으로 사용되었고(그림 2A), 동일한 SNR에서 백색 잡음에 포함된 다른 범주(천명음)의 통화(그림 2A)가 일탈 자극으로 사용되었습니다. 표준 자극과 이탈 자극은 각 범주의 8개 예시에서 재샘플링을 통해 무작위로 선택되었습니다. 각 실험 세션에서 자극은 높은 시간적 규칙성으로 제시되었으며(그림 2B), 이탈 자극 사이에 표준 자극이 최소 20회 제시되었습니다. 데이터는 각 실험 세션에서 특정 SNR 수준에.......
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이 프로토콜은 수동적으로 듣는 동물의 청각 역치를 추정하기 위한 비침습적이고 신뢰할 수 있는 방법으로 동공 측정법의 사용을 보여줍니다. 여기에 설명된 프로토콜에 따라 정상 청력 GP의 소음 호출 분류 임계값을 추정했습니다. 동공 측정법을 사용하여 추정된 역치는 조작적 훈련62를 사용하여 얻은 역치와 일치하는 것으로 밝혀졌습니다. 그러나 조작적 훈련과 비교할 때 동공 측정 프로토콜은 비교적 간단하고 데이터를 설정하고 수집하는 데 빠릅니다. 각 데이터 수집 세션(SNR 수준당)은 약 12분 동안 지속되었으며, 그 결과 동물당 하루에 1-2시간의 실험 세션(SNR 수준에 걸쳐)이 발생했습니다49. 데이터 수집은 약 7-10일 내에 완료될 수 있습니다(사용된 SNR 레벨 수에 따라 다름). 비록 괴상한 패러다임이 이 원고에서 콜-인-노이즈(call-in-noise) 분류 임계값 추정을 위해 사용되었지만, 이 동공 측정 프로토콜은 단지 하나의 호출 예시.......
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저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.
이 연구는 NIH(R01DC017141), 펜실베니아 라이온스 청력 연구 재단, 피츠버그 대학교 이비인후과 및 신경생물학과의 기금으로 지원되었습니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 아날로그 출력 보드 | Measurement Computing Corporation, Norton, MA | PCI-DDA02/12 | |
| 무향 폼 | Sonex One, Pinta Acoustic, Minneapolis, MN | ||
| 콘덴서 마이크 | Behringer, Willich, Germany | C-2 | |
| 자유 필드 마이크 | Bruel & Kjaer, 덴마크) | 유형 4940 | |
| Matlab | Mathworks, Inc., Natick, MA | 2018a 버전 | |
| 단안 원격 카메라 및 조명 시스템 | Arrington Research, Scottsdale, AZ | MCU902 | 적외선 LED 어레이 + 적외선 필터가 있는 카메라 |
| 다기능 I/O 장치 | National Instruments, Austin, TX | PCI-6229 | |
| 신경 인터페이스 프로세서 | Ripple Neuro, Salt Lake City, UT | SCOUT | |
| 압전 모션 센서 | SparkFun Electronics, Niwot, CO | SEN-10293 | |
| 핀치 밸브 | Cole-Palmer Instrument Co., Vernon Hills, IL | EW98302-02 | |
| 프로그래밍 가능한 감쇠기 | Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL | PA5 | |
| 실리콘 튜빙 | Cole-Parmer | ~3mm | |
| 사운드 감쇠 챔버 | IAC 음향 | ||
| 스피커 풀레인지 드라이버 | Tang Band 스피커, 타이페이, 대만 | W4-1879 | |
| 스테레오 앰프 | Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL | SA1 | |
| 탁상 - CleanTop 광학 | TMC 진동 제어 / Ametek, Peabody, MA | ||
| Viewpoint 소프트웨어 | ViewPoint, Arrington Research, Scottsdale, AZ |
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