주기적 산성 쉬프 또는 PAS 염색: 사구체의 구조적 기형을 평가하는 방법

사구체는 노폐물을 걸러내고 혈액에서 여분의 체액을 제거하는 신장 내의 복잡한 모세혈관 네트워크입니다. 신장 여과율은 이 특수 구조에 따라 달라지며, 이는 요오지산 쉬프 또는 PAS 염색을 사용하여 검사할 수 있습니다.

시작하려면 유리 슬라이드에서 파라핀화된 신장 피질 절편을 채취하십시오. 슬라이드를 자일렌으로 처리하십시오. 자일렌 분자는 조직 절편에서 파라핀 왁스를 용해시킵니다. 다음으로, 표본을 감소하는 알코올 농도에 노출시킵니다. 알코올은 미량의 자일렌을 제거하는 동시에 염색의 후속 결합을 위해 조직 절편을 재수화합니다.

이제 표본에 요오드산을 첨가하십시오. 요오드산은 글리코겐이나 뮤신과 같은 조직 다당류에 존재하는 디올을 알데히드로 전환합니다. 이 알데히드는 푹신-황산 조합인 쉬프 시약과 반응하여 조직 절편을 염색하는 자홍색 염료를 형성합니다. 슬라이드를 헹구어 여분의 얼룩을 제거합니다.

군 후 DNA에 결합하여 보라색으로 염색하는 핵 대조 염색제인 철-헤마톡실린을 첨가하십시오. 과도한 얼룩을 제거하기 위해 씻으십시오. 마지막으로, 알코올의 강도를 증가시켜 표본을 탈수한 다음 투명제 역할을 하는 자일렌을 탈수합니다. 이 단계는 현미경 검사를 위한 조직 절편의 대비를 개선하는 데 도움이 됩니다.

사구체 질환은 기저막의 비후, 모세혈관 변화, 신장 기능 장애와 관련된 비정상 세포로 시각화될 수 있습니다.

사구체 세포 및 메산지움 기질의 상세한 시각화를 위해 고정된 파라핀 포매 신장 피질 샘플을 섭씨 37도에서 1시간 동안 건조시킨 다음 연속적인 자일렌 및 하강 에탄올 침지로 탈파라핀화합니다. 샘플을 증류수에 5분 동안 재수화하고 슬라이드를 연기 캐비닛의 요오드 산 용액에 배양합니다.

5분 후, 증류수 100밀리리터에 5분 동안 세 번 세척하여 슬라이드를 헹구고 쉬프 시약에서 15분 동안 배양합니다. 배양이 끝나면 흐르는 수돗물에 슬라이드를 5분 동안 씻고 헤마톡실린으로 3초 동안 더얼룩한 후 흐르는 수돗물에 15분 더 완전히 헹굽니다.

그런 다음 상승하는 에탄올 침지와 두 번의 연속 3분 자일렌 침지로 슬라이드를 탈수합니다. 공기 건조 후 슬라이드는 400X 배율의 광학 현미경에서 사구체 구조를 평가하기 위해 자일렌 기반 마운팅 매체로 장착할 수 있습니다.

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• PAS Stain Glomerulus - Specific application of PAS stain in kidney cortex study.
• Acid Schiff Staining - Another name for the PAS staining process.
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