Three-chambered Array-based Impedance Assay: 전기 임피던스를 측정하여 암세포의 침습 가능성을 평가하는 실시간 분석 기법

0 views • 5:04 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

암 관련 간질 세포는 조직 기저막에 상주하는 전이성 종양 세포를 유발할 수 있는 화학적 요인을 분비합니다. 결과적으로 암세포는 기저막을 침범하여 조직의 세포외 공간으로 이동합니다.

시험관 내에서 암세포의 침습 능력을 측정하려면 여러 개의 3챔버 어레이가 있는 멀티웰 플레이트로 시작합니다. 각 어레이에서 하단 챔버에는 간질 세포의 부착 배양이 있습니다. 융합 임피던스 측정 미세 전극(세포의 전기적 활동을 측정하는 소형 전극)이 있는 상단 챔버는 전극 위에 존재하는 세포외 매트릭스 코팅 미세 다공성 막에 부착되는 암세포로 덮여 있습니다.

임피던스 기반 분석기에서 배양하는 동안 간질 세포는 암세포 쪽으로 이동하는 화학주성 인자를 배지로 방출합니다. 이러한 요인은 중간 챔버의 하단에 존재하는 반투막을 통해 이동합니다.

간질 세포 분비 인자는 부착된 암세포에게 침습성 표현형으로 변형되도록 신호를 보냅니다. 이에 대한 반응으로 침습성 세포는 미세 다공성 막을 통해 이동하여 막의 반대쪽에 있는 삽입된 전극에 도달합니다.

시간이 지남에 따라 더 많은 암세포가 전극에 달라붙으면서 세포의 전류 흐름을 방해하는 세포 임피던스를 유발합니다. 세포 임피던스의 측정은 암세포의 침습 가능성을 나타냅니다.

3개의 멸균 챔버를 모두 조직 배양 후드에 놓습니다. 하부 챔버의 짧은 쪽에 있는 손잡이를 찾고 손잡이가 실험자를 향하도록 하부 챔버의 방향

을 지정합니다.

기포를 형성하지 않고 90마이크로리터의 배지에 30,000 내지 50,000개의 세포를 하부 챔버의 각 웰에 추가합니다. 세포 운동성에 대한 양성 대조군으로 2개의 하부 챔버에서 태아 소 혈청 보충 배지 5%를 사용하고 음성 대조군으로 0% 혈청 보충 배지를 사용합니다.

후드에서 90-10분 동안 가라앉힌 후 하부 챔버를 15도 회전합니다. 그런 다음 중간 챔버를 위에 놓아 하단 챔버의 손잡이가 중간 챔버의 노치로 미끄러지도록 합니다. 어셈블리의 각 긴 면에서 딸리는 소리가 들릴 때까지 챔버를 수직으로 아래쪽으로 밉니다.

160마이크로리터의 무혈청 배지를 중간 챔버의 모든 웰에 추가합니다. 웰이 채워진 후 돔 모양의 메니스커스가 보이는지 확인하고 전극이 아래를 향하도록 하는 상단 챔버를 중간 챔버에 배치하여 중간 챔버와 상단 챔버의 파란색 점을 정렬합니다. 어셈블리의 긴 쪽 각각에서 딸깍 소리가 들릴 때까지 챔버를 수직으로 아래로 밉니다.

20-50마이크로리터의 무혈청 배지를 상단 챔버에 추가합니다. 조직 배양 인큐베이터의 이중 목적 세포 분석기에 어셈블리를 장착하고 배경을 측정하기 전에 30분 동안 기다립니다.

세포 분석기 소프트웨어를 연 다음 사용할 크래들을 선택한 다음 '메시지' 탭을 클릭하고 '연결 확인'이라고 표시되어 있는지 확인하여 어레이가 크래들에 잘 배치되고 전극이 센서와 잘 정렬되었는지 확인합니다.

'실험 노트' 탭을 클릭하고 실험에 대한 가능한 모든 정보를 입력합니다. 그런 다음 '레이아웃' 탭을 클릭하고 배열 레이아웃에 대한 설명을 입력합니다. 그런 다음 '일정' 탭을 클릭하고 '단계' 메뉴에서 두 단계를 추가합니다. 한 번의 스윕이 있는 백그라운드 단계와 100번의 스윕이 있는 테스트 단계입니다.

어레이가 이중 목적 세포 분석기 인큐베이터에 30분 동안 있으면 '재생' 버튼을 클릭하여 백그라운드 측정을 시작합니다.

배경 측정이 완료되면 크래들에서 어레이를 제거하고 세포 배양 후드에 다시 넣습니다. 그런 다음 100마이크로리터의 무혈청 배지에 30,000 내지 50,000개의 세포를 상단 챔버의 각 웰에 추가합니다. 이들은 전극이 멤브레인을 통해 성공적으로 이동하면 감지할 세포입니다.

임피던스 측정을 위해 이중 목적 셀 분석기에 장착하기 전에 어셈블리를 후드에 30분 동안 그대로 두십시오.

어레이를 이중 목적 셀 분석기에 다시 배치하고 '메시지' 탭에서 '연결 확인' 메시지를 확인합니다. '재생' 버튼을 클릭하여 임피던스 측정을 시작한 다음 '플롯' 탭을 클릭하여 신호의 진행 상황을 모니터링합니다.

25시간 전에 엔드포인트에 도달하면 '실행' 드롭다운 메뉴에서 '중단' 단계를 클릭합니다. 데이터를 내보내려면 그래프를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 목록 형식으로 '복사'를 선택한 다음 데이터를 스프레드시트에 붙여넣습니다.

06:36

수정 시험관 침공 분석은 호르몬, 중재 암 세포 침략의 사이토 카인 및 / 또는 성장 인자의 잠재적 인 역할을 확인하는

Related Videos

0 Views

09:36

라이브 셀 이미징 분석 실험 연구 세포종 뇌 종양 줄기 세포 이동과 내 습을

Related Videos

0 Views

08:12

종양 발생 세포 행동의 척도로 시험관 내 침략 분석에서 마우스 유방 종양 세포의 사용

Related Videos

0 Views

08:51

암 세포에 의해 내피 세포 단층의 침략을 측정하는 실시간 전기 임피던스 기반 기술

Related Videos

0 Views

03:52

세포 과정을 실시간으로 모니터링하기 위한 세포 임피던스 기반 분석

Related Videos

0 Views

05:15

뇌암 세포 침입의 임피던스 기반 측정

Related Videos

0 Views

12:30

전기 세포 기판 임피던스 내피 증식, 장벽 기능의 정량화에 대한 감지 및 운동성

Related Videos

0 Views

08:23

신경 세포주에 신경 독성과 신경에 관여하는 분자 진학의 윤곽을하는 도구로 실시간 임피던스 기반의 세포 분석기

Related Videos

0 Views

10:16

테스트를위한 병아리 심장 침략 분석 암 세포의 침윤과 잠재적 안티 침략 화합물의 활동

Related Videos

0 Views

12:47

실시간 세포 분석기 장착 기준점과 골드 Microelectrodes의 재생

Related Videos

0 Views

Last updated: 11 July 2026