The Use of Mouse Mammary Tumor Cells in an In Vitro Invasion Assay as a Measure of Oncogenic Cell Behavior

John A. Schmidt; Janice  E. Knepper

doi:10.3791/59732

종양 발생 세포 행동의 척도로 시험관 내 침략 분석에서 마우스 유방 종양 세포의 사용

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Genetics

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The Use of Mouse Mammary Tumor Cells in an In Vitro Invasion Assay as a Measure of Oncogenic Cell Behavior

종양 발생 세포 행동의 척도로 시험관 내 침략 분석에서 마우스 유방 종양 세포의 사용

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08:12 min

June 12, 2019

DOI: 10.3791/59732-v

John A. Schmidt¹, Janice E. Knepper¹

¹Department of Biology,Villanova University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

시험관내 세포 침습 분석기는 단백질 매트릭스를 함유하는 세포 배양 삽입을 사용하여 침입 및 이동을 위한 세포 전이를 정량화함으로써 암 전이의 잠재력을 측정하는데 사용된다. 세포는 단백질 매트릭스와 다공성 막을 통해, 화학유도제를 향해, 그 때 가벼운 현미경 검사법에 의해 정량화되기 위하여 도전됩니다.

본 프로토콜, 체외 침입 분석은, 단백질이 풍부한 매트릭스를 통해 이동하고 다공성 막을 통과하는 세포 라인 능력을 정량적으로 측정하는 유용한 도구이며, 암세포 침입의 초기 단계와 유사한 과정이다. 이러한 세포주는 유전자를 과도하게 표현하거나 유전자가 세포 이동 또는 세포 침입에 중요한 역할을 하는지 결정하기 위해 유전자의 발현을 감소시키기 위해 유전적으로 변경될 수 있다. 많은 공격적인 암은 증가한 이주 및 침략을 포함하여 세포 행동에 있는 극적인 변경을 관련시킵니다.

그래서 이 체외 침입 분석은 우리가 이 과정에 관련있는 유전자 및 그밖 요인을 더 잘 이해하는 것을 허용할 수 있습니다. 이 절차를 시작하기 위하여는, 실험의 1일 동안 70%에서 90%의 컨런트가 될 때까지 37°C에서 T25 플라스크에서 부착마우스 유방 종양 세포를 5%의 이산화탄소와 100% 습도로 성장시다. 보관에서 보이든 챔버 인서트를 검색하고 20 분 동안 실온으로 따뜻하게 세포 배양 후드로 옮기.

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