감염된 쥐 위장에서 헬리코박터 파일로리 부하의 정량화

감염된 마우스 위장에서 헬리코박터 파일로리 집락화를 정량화하려면 박테리아 생존력을 지원하기 위해 영양 배지에 현탁된 신체와 전정부 영역을 포함하는 편평한 위 조직부터 시작합니다.

질화하여 위 조직을 점액층으로 분해하여 조직에서 매체로 헬리코박터 파일로리를 방출합니다. 배지를 사용하여 생성된 위 균질염의 연속 희석을 수행합니다.

세그먼트로 나누어진 말 혈액 한천, HBA, 플레이트를 얻습니다. HBA 플레이트에는 항생제 혼합물이 보충됩니다. 각 균질염 희석액을 플레이트의 개별 세그먼트에 옮기고 고르게 펴 바릅니다.

건조 후, 특수 가스 혼합물이 있는 가습된 혐기성 배양 용기 내에서 플레이트를 거꾸로 된 위치에 배치합니다. 인큐베이트.

HBA 영양소와 함께 혐기성 배양 용기에 의해 제공되는 미호기성 환경은 헬리코박터 파일로리가 성장하고 콜로니를 형성하는 것을 촉진합니다. HBA의 항생제는 내인성 위 미생물군에서 박테리아 종의 성장을 억제합니다.

특정 계산 가능한 범위 내에 있는 HBA 플레이트 세그먼트의 헬리코박터 파일로리 콜로니를 계산합니다.

위 조직의 헬리코박터 파일로리 부하를 계산하여 조직 내 박테리아 집락화 정도를 나타냅니다.

감염 후 위장에서 생존 가능한 H. pylori의 수를 계산하려면 BHI에 저장된 위 샘플을 균질화하고 생성된 위 균질산을 신선한 멸균 국물에서 중복 연속 희석을 수행합니다.

추가 항생제가 보충된 미리 건조된 말 혈액 한천 또는 HBA 플레이트를 3개 또는 4개의 세그먼트로 나누고 Miles 및 Misra 기술의 적응을 사용하여 각 위 균질액 희석액 10 내지 100 마이크로리터를 각 한천 플레이트의 세그먼트에 추가합니다. 멸균 플라스틱 루프로 균질을 펴고 플레이트를 건조시킵니다. 그런 다음 물이 담긴 페트리 접시와 가스 팩이 들어 있는 혐기성 가스병에 플레이트를 거꾸로 놓은 다음 병을 섭씨 37도에서 4-7일 동안 배양합니다.

콜로니를 관찰할 수 있는 경우 10개에서 100개 사이의 분리된 콜로니를 포함하는 세그먼트를 열거합니다.