마우스 모델에서 실험적 자가면역 뇌척수염의 발생

취된 마우스의 말초 림프절 근처에 보조제와 함께 미엘린 유래 펩타이드를 주입합니다.

펩타이드-보조제 접합체는 펩타이드를 인식하고 처리하는 항원 제시 세포(APC)를 활성화합니다.

그런 다음 APC는 림프절로 이동하여 자가반응성 T 세포를 활성화합니다.

백일해 독소를 주기적으로 복강 내 주입하면 내피 세포 사이의 긴밀한 접합부를 방해하고 혈액-뇌 장벽 투과성을 증가시킵니다.

자가반응성 T 세포는 혈액을 순환하고 혈액뇌장벽을 통과하여 뇌조직으로 들어갑니다.

이 세포는 수초에 있는 펩타이드를 인식하고 사이토카인을 방출합니다.

이 사이토카인은 대식세포와 B 세포를 해당 부위로 모집합니다.

대식세포는 미엘린 생성 희소돌기아교세포를 손상시키는 활성 산소종을 방출하는 반면, B 세포는 T 세포와 상호 작용하여 활성화되어 수초를 표적으로 하는 자가항체를 생성합니다.

이것은 탈수초화로 이어져 신경 전달을 손상시킵니다.

마우스 꼬리를 들어 올리십시오. 점진적인 감소는 신경 손상을 나타내며 자가면역 뇌척수염(EAE)의 발병을 나타냅니다.

텍스트 프로토콜에 설명된 대로 특정 병원체가 없는 조건에 수용된 C57BL/6 마우스의 마취로 이 절차를 시작합니다. 마취된 마우스를 한 손으로 고정하고 사타구니 림프절에 근접한 뒷다리 옆구리에 완전 형광 보조제 에멀젼에 30마이크로리터의 MOG 펩타이드

이제 마우스를 배에 눕히고 꼬리 뿌리의 왼쪽과 오른쪽 모두에 있는 연질 지방 조직에 20마이크로리터의 MOG 펩타이드 에멀젼을 주입합니다. 또한 마우스의 목에 약간의 에멀젼 방울을 주입하십시오. 100마이크로리터의 백일해 독소 용액을 마우스에 복강 주입합니다. 장에 주사되지 않도록 마우스의 머리를 몸 중심 아래로 잡습니다.

예상되는 임상 질병을 견디기 전에 마우스에게 더 높은 에너지 함량의 음식을 제공하기 위해 유지 식단을 번식 식단으로 대체하십시오. 첫 번째 치료 후 48시간 후에 백일해 독소 주사를 반복합니다.

아침 새장 내부를 들여다보며 EAE 쥐의 건강 상태를 확인하십시오. 매일 오후 EAE 마우스를 채점하십시오. EAE 실험에 포함된 모든 개별 마우스를 케이지에서 꺼내고 꼬리에 긴장도가 있는지 확인합니다.

손가락으로 꼬리를 위쪽으로 움직입니다. 건강한 쥐는 꼬리를 위로 올립니다. 임상 EAE가 시작되면 꼬리가 점진적으로 떨어지면서 꼬리 긴장도가 낮아집니다. 결국 마우스는 꼬리를 전혀 들어 올릴 수 없습니다.