October 1st, 2007
제 이름은 항문입니다. 저는 콘돔 교수님과 함께 일하고 있습니다. 그와 저는 XYJ 스테이지를 사용하여 세포의 3D 구조를 만듭니다.
안녕하세요, 저는 PE와 Lynn이며 세포 캡슐화 및 미디어 및 젤을 사용하여 세포 인쇄 프로젝트를 진행하고 있습니다. 이것은 세포의 배출을 위한 솔레노이드이고 세포 매체를 통한 aros의 세포 혼합물입니다. SO 밸브는 두 개의 신호 라인에 의해 활성화됩니다.
신호선은 여기 드라이 보드에서 나옵니다. 신호가 여기서부터 나왔다. 그 줄을 통과하는 그 줄, 저 줄은 function first generator입니다.
그래서 첫 번째는 우리의 프로그래밍 된 방식에 의해 생성됩니다. 따라서 원하는 경우 지갑을 변경하고 해당 스위치 라인으로 프로그램을 변경하거나 해당 프로세스 생성기를 컴퓨터로 제어할 수 있습니다. 셀룰러 밸브는 전기 신호에 의해 열리고 닫히지만 셀은 해당 라인을 통해 공급됩니다.
세포와 배지 또는 어그로 겔은 주사기 주사기를 통해 공급됩니다. 물 안쪽의 주사기는, 주사기의 안쪽에 공기에 의하여 압박 빛입니다. 가압된 공기는 여기 라인과 같은 탱크에서 공급됩니다.
따라서 작은 선과 ized 공기는 에어 필터를 통해 비행합니다. 에어 필터는 먼지 및 다른 종류의 먼지를 구별합니다. 그것은 우리가 그것을 부르는 압력 발전기이고, 열려있는을 위해 사용된 신호를 생성하고 있습니다 또는 닫히는 태양 기복 컴퓨터는 P-I-B-U-S-V 연결관을 통해서 연결해 입니다.
그래서 우리는 컴퓨터, 노트북 컴퓨터로 USB 포트를 직접 사용할 수 있습니다. 그래서 저쪽은 여기 저쪽에 연결되어 있습니다. 그런 다음 여기에서 제어 노트북을 통해 제어할 수 있습니다.
따라서 무대의 움직임을 동기화하고 벨을 열려면 노트북과 동일한 컨트롤러로 제어할 수 있습니다. 그래서 우리는 그것이 열릴 때, 닫힐 때, 움직일 때와 멈출 때를 제어할 수 있습니다. 그리고 우리는 모션과 오프닝 벨을 동기화할 수 있습니다.
그 무대가 바로 전동 무대입니다. 사망 신호 라인과 모터를 통해 자동으로 자동으로 이동합니다. 따라서 모터화는 0.1마이크로미터입니다.
따라서 이상적으로는 최대 100mm 선까지 선을 그릴 수 있습니다. 그래서 제트 축은 그런 식으로 위아래로 움직입니다. 따라서 기판과 태양 벨트 사이의 캡을 제어합니다.
따라서 방출 높이를 제어할 수 있습니다. 이 기판은 XY 스테이지에 여기, X는 여기, Y는 저기에 연결되어 있습니다. 따라서 계획 XY 계획을 중심으로 움직이는 것입니다.
그래서 일부 기능 데모 오른쪽 단계는 3 개의 X, X, Y이며 G.So 제트 콘 제트 축 또는 XY 축은 여기에서 신호에 의해 제어됩니다. 따라서 신호 라인은 여기에서 모션 컨트롤러에 연결됩니다. 이 모션 컨트롤러에는 수동으로 제어할 수 없기 때문에 수동 스위치가 전혀 없습니다.
랩톱 컴퓨터를 통해 제어됩니다. 따라서 랩톱 컴퓨터가 연결되어 있습니다. 컨트롤러의 뒷면에는 인쇄 셀 XY 제트를 위한 3개의 x가 있습니다.
따라서 독립적으로 세 가지 종류의 신호를 만듭니다. 그런 다음 모션 컨트롤러는 USV에 직접 연결된 rf 2, 3, 2 커넥터를 통해 통신합니다. 그런 다음 USV가 랩톱 컴퓨터에 연결됩니다.
그래서 노트북은 차용자를 통제했습니다. 우리는 AutoCAD 프로그램을 사용하여 그런 식으로 gen A 경로를 만듭니다. 그런 다음 기계어로 바뀝니다.
그래서 기계어는 그런 단순한 문자와 숫자로 옮겨집니다. 여기에서 X, Y, Z 단계와 관련된 각 위치가 있습니다.여기에서 파일을 선택하고 그런 종류의 프로그램을 포함 한 다음 그런 식으로 다운로드 프로그램을 엽니 다. 그런 다음 텍스트 파일과 정확히 동일한 파일을 선택합니다.
텍스트 파일만 다운로드되고 텍스트 파일을 선택하고 노트북에서 com 모션 컨트롤러 임원으로 자동으로 다운로드한 다음 앞에서 언급했듯이 BAM 문자로 이동합니다. 이 플라스크에는 N IH 3G 3 개의 마우스 섬유 아세포 세포가 있습니다. 그리고 저는 먼저 낡은 미디어에 대해 이야기할 것입니다.
이 과정은 세포를 계대화하는 것이며 세포는 플라스크 바닥에 부착됩니다. 그래서 배지를 흡인한 후, 효소인 6개의 RYS를 넣을 것입니다. 그래? 따라서 트립신을 플라스크에 넣은 후 세포가 플라스크 바닥에서 분리될 때까지 3-5분을 기다려야 합니다.
이제 배지를 넣고 세포를 원심분리기 튜브로 통로를 만들 준비가 되었습니다. 일대일 희석입니다. 그래서 저는 바로 여기에 6mil의 배지를 넣고 톱을 약간 씻어내서 모든 톱이 통과되었는지 확인할 것입니다.
이제 세포는 이 튜브에서 원심분리할 준비가 되었습니다. 이제 우리는 이 세포들을 3분에서 5분 동안 1,000RPM으로 원심분리할 것입니다. 이제 세포가 펠릿으로 회전했으니 상층액을 흡인할 것입니다.
이제 PBS로 세포를 씻어낼 것입니다. 그리고 이것은 세포를 염색하기 위한 것입니다. 우리가 사용하는 염색은 에스테라제 기질입니다.
자, 이제 다시 원심분리를 해서 세포를 입천장으로 만들 겁니다. 그리고 PBS를 흡인하고 세포에 수지를 공급할 것입니다. 나는 집계되기 위해 미디어에 있다.
저는 세포를 혼합하여 샘플을 채취할 때 농도가 튜브 전체에 균일하게 유지되도록 합니다. 이제 100마이크로리터의 세포를 사용하여 세포 밀도를 측정하겠습니다. 이제 저는 100 마이크로 리터의 타입과 파란색을 넣고 있는데, 이는 얼룩입니다.
염색이 죽은 세포막에 침투할 때까지 3분에서 5분 정도 기다립니다. 우리가 셀을 셀 때, 파란색 셀은 계산하지 않습니다. 세포는 혈세포 분석기로 계수할 준비가 되었으며, 50마이크로리터의 세포 혼합물을 혈세포 분석기의 양쪽으로 옮길 것입니다.
좋아요, 유리 슬라이드 면으로 덮겠습니다. 혈세포 분석기에는 두 가지 측면이 있습니다. 첫 번째 면을 세고 양쪽을 세고 나서 평균을 취한 다음 2를 곱할 것입니다.
따라서 기본적으로 우리의 세포 밀도는 135 곱하기 10 x 1mil당 4개의 세포가 될 것입니다. 이 실험에서는 밀당 50만 개 세포 농도의 세포 용액을 사용할 것입니다. 그래서 우리는 1,350만 개의 세포를 가지고 있기 때문에 저는 27mil의 배지에 세포를 현탁시켜 소생시킬 것입니다.
우리는 두 가지 유형의 얼룩을 사용하고 있습니다. 이것은 분자 프로브의 살아있는 죽은 분석법입니다. 우리의 첫 번째 얼룩은 칼슘 암이라고 합니다.
두 번째 염색은 AUM 동형이머라고 합니다. 그것은 죽은 세포를 얼룩지게 합니다. 우리는 녹색 형광을 얻기 위해 파란색 여기(blue excitation)를 사용하고 빨간색 형광을 얻기 위해 녹색 여기(green excitation)를 사용합니다.이 두 가지 염색의 경우 이미징할 때 주사위 용액이 PBS에서 준비됩니다.
먼저 5mil의 PBS를 인산염 완충 식염수 튜브로 옮길 것입니다. 그것은 식염수입니다. 이제 밀당 칼슘 am 반 마이크로리터를 추가하겠습니다.
이제 튜브에 2.5 마이크로 리터의 칼슘 am을 추가하고 PBS 1 마일당 2 마이크로 리터의 homodimer를 추가하고 있습니다. 다음은 btex 기계입니다. 그것은 세포와 매체를 전체 부피에 걸쳐 잘 분산시킵니다.
이제 우리는 200 마이크로 리터의 셀을 여기에있는 7 개에로드합니다. 그런 다음 캡을 씌우고 이것은 이렇게 단단히 밀봉되어 있습니다 여기 밸브를 열고 압력이 가벼우며 가벼운 공기가 들어오고 벨트를 그렇게 조정합니다. 그런 다음 압력이 변경됩니다.
그래서 적응합니다. 압력은 5PSI입니다. 튜빙 압력 내부는 5PSI입니다.
여기에서 여기로, 구멍 안의 이것을 통해 연결되었습니다. 그래서 우리는 여기서 벨을 열고 5 PSI 압력으로 주입 된 셀이 열리기 시작합니다. 그런 다음 Sona 밸브 시작이 작동합니다.
그런 다음 기판을 굴립니다. 그것은 기판은 단순한 슬라이드 유리입니다. 그런 다음 적절한 부분을 로드하고 스케치 테이프를 넣어 기판을 그렇게 고정합니다.
그리고 단순히 나는 그것을 고칩니다. 그래서 우리는 세포와 아리 밸브와 기질을 움직이는 동안 모든 것을 설정하고 작업을 시작합니다. 그래서 우리는 모든 것을 설정 한 다음 ARY 밸브를 시작합니다.
그리고 나서 우리는 무대를 그렇게 움직입니다, 그렇죠? 그런 다음 우리는 기판 패턴에 몇 가지 패턴을 만들고 기판 및 bam 캐릭터에 패턴을 만듭니다. 저는 우리가 이전에 만든 이 염료 용액에 인쇄한 이 물방울을 담글 것입니다.
이제 방울을 10분 동안 배양한 다음 이미지화합니다. 먼저 접안렌즈를 통해 이미지를 조정하겠습니다. 첫 번째 이미지는 명시야 이미지입니다.
조명을 끄고 필터를 변경하여 녹색 형광을 보여주는 파란색 여기가 되도록 하겠습니다. 세 번째 이미지는 Thm Homodimer 염색인 죽은 세포입니다. 그리고 초록불로, 우리는 빨간 형광을 얻을 것입니다.
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이 기사는 세포 인쇄 프로젝트를 사용한 3D 세포 구조의 개발에 대해 논의합니다. 이 연구는 세포 캡슐화와 인쇄 과정을 개선하기 위해 미디어 및 겔을 사용하는 것을 포함합니다.
This work presents a programmable microfluidic platform for precise cell encapsulation and deposition, enabling reproducible 3D cellular architectures. The system supports early-stage target validation by providing controlled microenvironments for phenotypic screening and mechanistic de-risking of cellular responses. Integration with automated staging and valve control enhances throughput and reproducibility in discovery workflows.
The method positions itself within the discovery continuum from Early Discovery to Lead Identification by enabling hypothesis-driven cellular patterning and quantitative response measurement.