Name: 흩뿌려진의 제목 셀 캡슐화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T13:09:54.000+00:00
Duration: 13 min 10 s
Description: 배우세요 3D 바이오프린팅을 이용한 세포 캡슐화 방법을 연구하세요. 솔레노이드 밸브와 다양한 배지 및 젤을 활용하여 세포 생존율을 높이는 조직 공학 기술을 탐구합니다.

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NIH3T3 세포 준비 : 탈출을위한 A. 셀 <ol><li> 다음 세포, 세포 매체와 희석 1시 1분, 그리고 T75 플라스크에서 15 ML 팔콘 튜브로 전송 Trypsinize </li><li> , centrifuging하여 펠렛으로 세포를 스핀 다운 뜨는을 기음과 DPBS로 세포를 씻어 </li><li> 다시 펠렛으로 세포를 스핀 다운 및 뜨는을 기음 </li><li> 미디어 Resuspend 세포 </li><li> hemocytometer (~ 200 T75 플라스크 당 X 10 4 셀 / ML)의 세포 밀도를 결정 </li><li> 원심 분리기 세포 솔루션은 뜨는 대기음 및 세포 농도 변화에 대한 미디어의 적절한 금액에 resuspend </li></ol> B. 세포 방출 <ol><li> 방출을 위해 사용하기 전에 소용돌이 세포 </li><li> 주사기로 세포 솔루션을 200 μL를 전송 </li><li> 펄스 발생기에 적절한 모드를 설정 <ol><li> 꺼내기 한 방울 여러 방울을 위해 (파열), &quot;E. 버&quot;모드로 펄스 발생기를 설정 </li><li> 연속 비말의 방출 들어, &quot;상식을 훨씬&quot;모드로 펄스 발생기를 설정 </li></ol></li><li> 신호 설정 변경 <ol><li> 5 V 및 LOL 0 V 및 확인 &quot;LIM&quot;LED가 켜져입니다 힐러리 : 높은 수준과 낮은 수준의 출력 전압을 설정 </li><li> 사각형 펄스로 신호를 설정 </li><li> ( &quot;의무&quot;) 솔레노이드 밸브가 &#39;졌 그나 &quot;에 대한 값을 변경하거나 듀티 사이클을 변경하여 비말의 방출을 위해 열려있는 시간을 변경 </li><li> &#39;PER&#39;에 대한 값을 변경하여 배출의 주파수를 변경 </li><li> &quot;버&quot;에 대한 값을 변경하여 버스트에 탈출 방울의 개수를 변경 </li></ol></li><li> 현미경으로 영상 준비 기판에 추출 세포 솔루션 </li></ol> C.의 스테 이닝 <ol><li> 0.5 μL calcein - AM 및 DPBS의 ML 당 2 μL ethidium의 homodimer로 염료 용액을 만들어 </li><li> 염색 용액에 담가 준비 기판 </li><li> 샘플 37 10 분 동안 부화 허용 ° 이미징하기 전에 C를 </li></ol> 실험 검증 <ol><li> 니콘 이클립스 TE - 2000 U 형광 현미경에서 <ol><li> 스팟 고급 소프트웨어 (진단 주식 회사) </li><li> 데드 / 라이브 어세이 </li></ol></li></ol>

저자들은 공개할 사항이 없습니다.

<table><tbody><tr><td>형광 현미경</td><td></td><td>Nikon Instruments</td><td>Eclipse TE-2000 U</td><td></td></tr><tr><td>솔레노이드 밸브 세포 이젝터</td><td></td><td></td><td></td><td>작동 주파수: 1 KHz, 30psi, 50nl~0.5ul. 12V 밸브 드라이버: 2.5 Amp 구동 전류</td></tr><tr><td>5갤런 휴대용 공기 탱크</td><td></td><td>Coleman</td><td>Powermate CT5</td><td>가압 공기: 30 PSI </td></tr><tr><td>압력 조절기</td><td></td><td>Marsh Bellofram</td><td></td><td></td></tr><tr><td>펄스 발생기</td><td></td><td></td><td>HP8112A</td><td>구동 주파수 생성: 50 MHz</td></tr><tr><td>XYZ-스테이지</td><td></td><td>Newmark Systems</td><td></td><td>스테핑 모터 포함: 6inch 이동 xy-스테이지(NLS4-6-25), 2.5inch 이동 z-스테이지(NLS4-2.5-25), 3축 컨트롤러(NSC-G3), 0.1um 분해능</td></tr><tr><td>NIH 3T3</td><td>세포주</td><td></td><td></td><td>섬유아세포</td></tr><tr><td>Trypsin</td><td></td><td></td><td></td><td>0.05% 용액</td></tr><tr><td>NIH 3T3 세포 배지</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>완충액</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>T75</td><td></td><td></td><td></td><td>조직 배양 플라스크</td></tr><tr><td>플라스틱 원뿔형 튜브</td><td></td><td></td><td></td><td>15 ml, 조직 배양용</td></tr></tbody></table>

흩뿌려진의 제목 셀 캡슐화

Title Cell Encapsulation by Droplets

제 이름은 문항입니다. 저는 콘돔 전공 교수님과 함께 연구하고 있습니다. 저와 교수님은 XYJ 스테이지를 사용하여 세포의 3D 구조를 제작하는 연구를 수행하고 있습니다.안녕하세요, 저는 세포 캡슐화, 배지 및 겔을 이용한 세포 프린팅 프로젝트를 수행하고 있는 PE와 Lynn입니다. 이것은 세포 배지 위로 세포 및 세포 혼합물을 분사하기 위한 솔레노이드 밸브입니다. 이 솔레노이드 밸브는 두 개의 신호선에 의해 활성화됩니다.신호선은 여기 드라이 보드에서 나옵니다. 신호가 여기서 발생합니다. 해당 라인을 통해 연결되는 장치가 바로 함수 발생기입니다.먼저 프로그램된 방식으로 생성됩니다. 따라서 펄스를 변경하고 싶다면 해당 스위치 라인을 통해 프로그램을 변경하거나, 컴퓨터로 프로세스 생성기를 제어할 수 있습니다. 솔레노이드 밸브는 전기 신호에 의해 개폐되며, 세포는 해당 라인을 통해 공급됩니다.세포와 배지 또는 아그로 겔(agro gel)은 시린지를 통해 공급됩니다. 물속에 있는 시린지의 내부가 공기에 의해 가볍게 가압됩니다. 가압된 공기는 여기 라인과 같은 탱크에서 공급됩니다.따라서 작은 라인과 이온화된 공기가 공기 필터를 통해 흐릅니다. 공기 필터는 먼지와 기타 오염 물질을 걸러냅니다. 압력 생성기라고 불리는 장치는 솔라 공기 밸브를 열거나 닫는 데 사용되는 신호를 생성하며, 컴퓨터는 P-I-B-U-S-V 커넥터를 통해 연결됩니다.USB 포트를 컴퓨터 또는 노트북에 직접 연결하여 사용할 수 있습니다. 해당 포트는 이쪽에 연결되어 있으며, 여기 있는 제어용 노트북을 통해 조작할 수 있습니다.따라서 스테이지의 이동과 벨의 개폐 동작을 동기화하려면 노트북과 동일한 컨트롤러로 제어할 수 있습니다. 이를 통해 벨이 열리고 닫히는 시점과 스테이지가 이동하고 정지하는 시점의 타이밍을 조절할 수 있으며, 결과적으로 이동 동작과 벨의 개폐를 동기화할 수 있습니다.해당 스테이지는 전동 스테이지입니다. 이는 제어 신호 라인과 모터를 통해 자동으로 이동합니다. 모터 구동 정밀도는 0.1 micrometers입니다.따라서 이상적으로는 최대 100mm 길이의 선을 그릴 수 있습니다. 제트 축이 그와 같이 상하로 이동하며, 이를 통해 기판과 솔라 벨트 사이의 간격을 조절합니다.따라서 분사 높이를 조절할 수 있습니다. 해당 기질은 여기 있는 XY 스테이지, 즉 이쪽의 X축과 저쪽의 Y축에 연결되어 있습니다. 따라서 XY 평면을 따라 이동하게 됩

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

우리는 합성 hydrogels 내에서 세포의 3 차원 (3D) 캡슐에 대한 프로토콜을 제시한다. 캡슐화 절차는 캡슐화된 세포의 행동을 평가하는 두 가지 일반적으로 사용되는 crosslinking의 방법 (마이클 타입뿐만 아니라 가벼운 - 시작 자유 라디칼 메커니즘),뿐만 아니라 기술의 번호를 설명합니다.

조직 공학을위한 3D Hydrogels에서 셀룰러 봉지

세포 및 입자의 관성 주문과 monodisperse 드롭 생성을 결합하여, 우리는 kHz에서 속도에서 한 방울의 세포 또는 입자의 원하는 숫자를 캡슐하는 방법을 설명합니다. 우리는 두 번 단일 및 이중 입자 술을 정렬되지 않은 캡슐 분들을 초과 효율성을 보여줍니다.

높은 처리량 마이크로 캡슐 단일 셀 및 다중 셀

이 동영상은 3D 하이드로겔로 캡슐화된 세포를 면역 염색하는 기술을 보여줍니다. 신경전구세포를 포함하는 하이드로겔 배양액은 고정, 투과화 및 차단 용액으로 처리되어 비특이적 면역 염색을 방지합니다. 특정 단백질에 결합하기 위해 1차 항체 칵테일을 첨가한 다음 형광 표지된 2차 항체와 핵 염색을 추가합니다. 그런 다음 샘플을 슬라이드에 장착하고 컨포칼 현미경으로 관찰합니다.

3D 하이드로겔 시스템에 캡슐화된 세포의 면역염색

이 동영상과 원고는 단순 교반 용기를 사용하여 큰 배치로 생산할 수있는 0.5 % ~ 10 % 알긴산 염 비즈로 포유류 세포를 캡슐화하는 유제 기반 방법을 설명합니다. 캡슐화 된 세포는 시험 관내에서 배양 되거나 세포 치료 응용을 위해 이식 될 수 있습니다.

간단한 교반 용기를 사용하여 알긴산 염 비즈에서 포유류 세포 캡슐화

이 문서 시드 방울에 세포의 캡슐화 능률을 제공 하기 위해 물방울 미세 장치에 피 펫 팁을 사용 하 여 셀의 부족 한 인구를 위한 프로토콜을 제공 합니다.

피 펫 팁 드롭릿 미세 플랫폼 시드 셀에 대 한 메서드를 기반으로

여기에 제시된 것은 설치류 눈에 생물학적 제제의 장기 전달을 위한 불멸화된 세포의 미세 캡슐화에서 중합체로서 알긴산을 사용하기 위한 프로토콜이다.

마우스 아이에 생물학적 제제의 전달을 위한 캡슐화된 세포 기술

물방울 분석은 분석 화학, 효소 진화 및 단일 세포 분석에 유용하지만 일반적으로 액적을 형성하기 위해 미세 유체학이 필요합니다. 여기서는 액적 저술을 수행하기 위한 미세유체없는 접근 방식인 입자 템플릿 유화제를 설명합니다.

입자 템플릿 유화제를 통해 미세 유체가 없는 물방울 분석을 가능하게 합니다.

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거대한 Unilamellar 소포 안에 재구성 된 세포 골격의 신속한 캡슐화

이 논문은mm2당 수백 개의 마이크로컨테이너를 사용하는 새로운 유형의 배양 기질에 대한 제조 프로토콜을 제시하며, 이 배양에서 오가노이드는 고해상도 현미경을 사용하여 배양 및 관찰할 수 있습니다. 세포 파종 및 면역 염색 프로토콜도 자세히 설명되어 있습니다.

오가노이드의 배양 및 3D 이미징을 위한 고처리량 플랫폼

이 초보자 가이드는 액적 전달 방법을 통해 GIV(Giant Unilamellar Vesicles)를 준비하기 위한 일반적인 프로토콜을 제시하고, 중요한 단계를 논의하고, 합성 생물학 및 마이크로로보틱스를 포함한 다양한 응용 분야에 필요한 가능한 조정에 도움이 되는 통찰력을 제공합니다.

액적 전달 방법을 사용하여 거대한 단층 소포를 안정적으로 준비

배우세요 3D 바이오프린팅을 이용한 세포 캡슐화 방법을 연구하세요. 솔레노이드 밸브와 다양한 배지 및 젤을 활용하여 세포 생존율을 높이는 조직 공학 기술을 탐구합니다.

흩뿌려진의 제목 셀 캡슐화

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