Name: 를 사용하여 금 나노 입자의 효율적인 방사성 표지를위한 최적화 된 프로토콜 (125) I-표시 아 지드 보철 그룹 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 23 s
Description: 학습하세요 금 나노입자의 방사성 요오드 표기법을 위해 무구리 클릭 반응을 활용한 효율적인 합성 방법을. 이 기술은 방사화학 수율과 순도를 높여 영상 연구용 프로브 개발에 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

본 연구는 대한민국 정부지원지원기금(지원번호 2012M2B2B1055245, 2012M2A2A6011335)과 한국원자력연구원 RI-Biomics Center의 지원을 받았다.

주의 : 방사성 요오드의 산화 된 형태가 매우 휘발성 적절한 리드 방패와 리드 유리 병 취급해야합니다. 모든 방사 단계는 통풍이 잘되는 숯을 여과 후드에서 수행 한 실험 절차는 방사능 검출 장치에 의해 모니터링해야한다. I 125 - 표지 된 아 지드의 합성 화학 및 역상 카트리지 (1)의 제조 <ol><li> 용액의 시약의 조제 <ol><li> 150 μL의 아 지드 전구체 (2) 무수 에탄올 (그림 1)의 1 mg의 용해. 참고 : 아 지드 전구체에 대한 자세한 합성 절차 (2) 이전의 종이 (22)에보고되었다. </li><li> 1X 인산 완충 생리 식염수 (pH는 7.4) 20 μL를 1 mg을 클로라민 T를 녹인다. </li><li> 20 μL의 H 2 O 2 mg의 나트륨 메타 비설 파이트를 녹여 </li></ol></li><li> Prepara카트리지 기 <ol><li> 10 ㎖의 H 2 O이어서 10 ㎖의 무수 에탄올로 TC18 카트리지 워시 공기와 카트리지의 행렬을 건조하지 마십시오. </li></ol></li></ol> 125 I 표지 아 지드 보철 그룹의 2 Radiosynthesis <ol><li> 전구체의 방사성 요오드화 반응 <ol><li> 1.5 ml의 마이크로 원심 튜브에 지드 전구체 용액 및 아세트산 (10 μL) (무수 에탄올 150 ㎕의 1 mg)을 추가한다. </li><li> 반응 혼합물에 0.1 M의 NaOH (50 μL)에 [125 I]의 NaI 150 MBq의 추가. </li><li> 클로라민 T 용액 (1X 인산 완충 식염수 20 ㎕의 1 mg)을 첨가하고 튜브를 마이크로 원심 함유하는 반응 혼합물을 닫는다. </li><li> 방사성 요오드화 반응이 완료 될 때까지 실온에서 15 분간 반응 혼합물을 인큐베이션. </li><li> 반응 혼합물에 소듐 메타 바이 설 파이트 용액 (2 ㎎을 20 μL의 H 2 O)를 추가방사성 요오드화 반응을 해소합니다. </li><li> 조 생성물을 0.2 μl를 인출 한 후 용액을 100 ㎕로 희석 (H 2 O / CH 3 CN, 1 : 1) HPLC 분석. 참고 : 모든 HPLC 실험의 경우, H 2 O (용매 A)를 포함하는 0.1 % 포름산 및 이동상 0.1 % 포름산 함유 아세토 니트릴 (용매 B)를 사용합니다. </li><li> 칼럼 상 반전 (역상 분석 무선-HPLC를 이용하여 희석하고, 조 생성물을 C18 분석; 유속 : 1 ml / 분 용리액 구배 : 0-2 분 동안 20 % 용매 B, 20 % ~ 80 % 용매 B에 대한 2-22 분, 22 ~ 23 분 80~100% 용매 B, 그리고 23-28 분 동안 100 % 용매 B, 체류 시간 : 16.4 분) (그림 2). </li></ol></li><li> 분취 HPLC로 조 생성물을 정제하여 주 : 이러한 주입기, 컬럼, 검출기 수집 튜브 및 폐수 수집 된 컨테이너 HPLC 부품 주위에 충분한 납 차폐를 제공한다. <ol><li> 일 철수HPLC 바이알에 전체 반응 혼합물을 전자. 아세토 니트릴 (0.5 mL)로 반응 관을 씻어 동일한 주입 병에 린스를 추가합니다. H 2 O (1 mL)로 수집 된 용액을 희석. </li><li> (조제 무선 HPLC 상에 주입하여 조 생성물을 C18 컬럼 상 역방향 유속 : 10 ㎖ / 분 용리액 구배 : 2-22 분 동안 0-2 분, 20 % ~ 80 % 용매 B 20 % 용매 B를 22 ~ 23 분 동안 80~100% 용매 B, 그리고 23-28 분 동안 100 % 용매 B). </li><li> I 125 - 표지 지드 (1)를 나타내는 피크 방사능 수집을 유리 시험관에 (도 2) (이들의 HPLC 조건에서의 t R은 17.8-18.8 분이다). </li><li> 제조사의 프로토콜에 따라 방사선 도즈 교정기를 사용하여 분획의 방사 화학적 수율을 측정한다. </li><li> 제품의 방사 화학적 순도를 결정하기위한 동일한 HPLC 조건을 사용하여 분석 무선 HPLC로 정제 된 생성물을 주입한다. </li></ol></li><li> 제품의 고체상 추출 <ol><li> 40ml의 순수 H 2 O로 원하는 생성물 (1)을 포함하는 분획을 희석 </li><li> 컨디셔닝 TC18 카트리지에 희석액을 추가합니다. </li><li> 추가로 15 ML의 H 2 O와 카트리지를 세척 </li><li> 리드 방패에 의해 보호되는 10 ml의 유리 바이알에 2 ㎖의 아세톤으로 카트리지에 갇혀 제품 (1) 용출. 제조사의 프로토콜에 따라 방사선 도즈 교정을 사용하여 용출 된 생성물의 방사능을 측정한다. 주 : 디메틸 설폭 사이드 (DMSO) 또는 무수 에탄올 또한 카트리지로부터의 생성물의 용출을 위해 사용될 수있다. 방사능의 약 5-10 %는 보통 카트리지 스틱, 남은 방사선 표지 생성물은 완전히 유기 용매의 과잉을 사용하여 용출 될 수 없다. </li><li> 질소 또는 아르곤 가스의 흐름과 함께 아세톤을 증발시켰다. </li><li> 재를 녹여다음 방사성 표지 단계에 대한 DMSO (100-200 μL)와 sidue. </li></ol></li></ol> DBCO 기 - 금 나노 입자 컨쥬 게이트 (3)의 합성 <ol><li> 13 나노 크기의 금 표면 변형 DBCO 기 함유 폴리에틸렌 글리콜 나노 입자 <ol><li> 준비 나트륨 구연산 안정화 된 금 나노 입자 (3) (평균 크기 = 13 ㎚) 이전의 보고서 (24)에 따라. </li><li> (10 nM 내지 15 mL) 중 시트 레이트 - 안정화 된 금 나노 입자에 트윈 20 (1 ㎜, 1.5 ㎖)의 수용액을 추가한다. 궤도 통에 20 분의 솔루션을 흔들어. </li><li> DBCO 기 함유 폴리에틸렌 글리콜 티올 (평균 분자량 = 5,000, 100 μM, 1.5 ㎖)의 수용액을 추가한다. 오비탈 진탕 기에서 2 시간 동안 용액을 흔들어. </li></ol></li><li> DBCO 그룹 - 개질 된 금 나노 입자의 정제 <ol><li> 정제 DBCO 그룹 - 개질 된 금 나노 입자 (4) &lt;/ 연속 원심 분리 (11,400 XG, 15 분 × 3)로&gt; 강한. </li><li> 뜨는을 가만히 따르다 및 금 나노 입자 펠릿의 재 부유 순수을 추가합니다. </li></ol></li></ol> 4. 구리 무료 클릭 반응을 통해 DBCO - 그룹 - 개질 된 금 나노 입자의 방사성 표지 <ol><li> I 125 - 표지 된 아 지드를 사용하여 125 I 표지 된 금 나노 입자의 합성 (1) <ol><li> 원심 분리 (11,400 × g으로 15 분간)을 사용하여 DBCO 그룹 - 개질 된 금 나노 입자의 농축 용액을 제조하고, 2 μM로 금 나노 입자의 농도를 조절한다. </li><li> 금 나노 입자의 현탁액을 DMSO (5 μL)의 125I 표지 지드 (1) 4.1 MBq의 추가 (4) (2 μM, 50 μL). </li><li> 60 분 동안 40 ° C에서 얻어진 반응 혼합물을 인큐베이션. </li><li> 조 생성물로부터 분취 량 (0.2 μL)를 인출하고, 실리카 - 코에 적용ated 박층 크로마토 그래피 (TLC) 판. </li><li> 이동상으로서 에틸 아세테이트를 사용하여 TLC 판을 개발한다. </li><li> 전파 TLC 스캐너의 TLC 플레이트를 배치하고, 제조자의 프로토콜에 따라 방사성 표지 반응 (도 3)을 감시하는 스캐너를 실행. </li></ol></li><li> 조 생성물을 정제하여 <ol><li> 원심 분리하여 125 I 표지 된 금 나노 입자 (4) (11,400 × g으로 15 분간)를 포함하는 반응 혼합물을 정제 하였다. </li><li> 뜨는을 가만히 따르다 및 금 나노 입자 펠릿의 재 부유 순수을 추가합니다. </li><li> 정제 된 제품에서 나누어지는 (0.2 μl를) 철회 및 실리카 코팅 된 TLC 판에 적용합니다. </li><li> 이동상으로서 에틸 아세테이트를 사용하여 TLC 판을 개발한다. </li><li> 무선-TLC 스캐너에 TLC 판을 놓고 125I 표지 GOL의 방사 화학적 수율 및 방사 화학적 순도를 결정하기 위해 스캐너를 실행제조 업체의 프로토콜에 따라 D 나노 입자 (4) (그림 3). </li></ol></li></ol>

<ol><li>Jewett, J. C., Bertozzi, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cu-free+Click+Cycloaddition+Reactions+in+Chemical+Biology%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">Cu-free Click Cycloaddition Reactions in Chemical Biology.</a> Chem. Soc. Rev. 39, 1272-1279 (2010).</li>
<li>Debets, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioconjugation+with+Strained+Alkenes+and+Alkyne%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">Bioconjugation with Strained Alkenes and Alkyne.</a> Acc. Chem. Res. 44, 805-815 (2011).</li>
<li>Sletten, E. M., Bertozzi, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+Mechanism+to+Mouse%3A+A+Tale+of+Two+Bioorthogonal+Reactions%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">From Mechanism to Mouse: A Tale of Two Bioorthogonal Reactions.</a> Acc. Chem. Res. 44, 666-676 (2011).</li>
<li>Koo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioorthogonal+Cu-Free+Click+Chemistry+in+vivo+for+Tumor-Targeted+Delivery+of+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Bioorthogonal Cu-Free Click Chemistry in vivo for Tumor-Targeted Delivery of Nanoparticles.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 51, 11836-11840 (2012).</li>
<li>Chang, P. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Copper-Free+Click+Chemistry+in+Living+Animals%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Copper-Free Click Chemistry in Living Animals.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107, 1821-1826 (2010).</li>
<li>Bostic, H. E., Smith, M. D., Poloukhtine, A. A., Popik, V. V., Best, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+Labeling+and+Immobilization+via+copper-free+Click+Chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Commun%22%5BJournal%5D)">Membrane Labeling and Immobilization via copper-free Click Chemistry.</a> Chem. Commun. 48, 1431-1433 (2012).</li>
<li>Someya, T., Ando, A., Kimoto, M., Hirao, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Site-Specific+Labeling+of+RNA+by+Combining+Genetic+Alphabet+Expansion+Transcription+and+Copper-Free+Click+Chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Site-Specific Labeling of RNA by Combining Genetic Alphabet Expansion Transcription and Copper-Free Click Chemistry.</a> Nucl. Acids Res. 43, 6665-6676 (2015).</li>
<li>Lee, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesoporous+Silica+Nanoparticle+Pretargeting+for+PET+Imaging+Based+on+a+Rapid+Bioorthogonal+Reaction+in+a+Living+Body%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Mesoporous Silica Nanoparticle Pretargeting for PET Imaging Based on a Rapid Bioorthogonal Reaction in a Living Body.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 52, 10549-10552 (2013).</li>
<li>Sachin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((F-18+Labeling+Protocol+of+Peptides+Based+on+Chemically+Orthogonal+Strain-Promoted+Cycloaddition+under+Physiologically+Friendly+Reaction+Conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chem%22%5BJournal%5D)">F-18 Labeling Protocol of Peptides Based on Chemically Orthogonal Strain-Promoted Cycloaddition under Physiologically Friendly Reaction Conditions.</a> Bioconjugate Chem. 23, 1680-1686 (2012).</li>
<li>Evans, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Copper-Free+Click+-+A+Promising+Tool+for+Pre-targeted+PET+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Commun%22%5BJournal%5D)">Copper-Free Click - A Promising Tool for Pre-targeted PET Imaging.</a> Chem. Commun. 48, 991-993 (2012).</li>
<li>Campbell-Verduyn, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-Promoted+Copper-Free+%26%2334%3BClick%26%2334%3B+Chemistry+for+18F+Radiolabeling+of+Bombesin%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Strain-Promoted Copper-Free &#34;Click&#34; Chemistry for 18F Radiolabeling of Bombesin.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 50, 11117-11120 (2011).</li>
<li>Arumugam, S., Chin, J., Schirrmacher, R., Popik, V. V., Kostikov, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((18F%5DAzadibenzocyclooctyne+%28%5B18F%5DADIBO%29%3A+A+Biocompatible+Radioactive+Labeling+Synthon+for+Peptides+using+Catalyst+Free+%5B3%2B2%5D+Cycloaddition%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem.+Lett%22%5BJournal%5D)">18F]Azadibenzocyclooctyne ([18F]ADIBO): A Biocompatible Radioactive Labeling Synthon for Peptides using Catalyst Free [3+2] Cycloaddition.</a> Bioorg. Med. Chem. Lett. 21, 6987-6991 (2011).</li>
<li>Bouvet, V., Wuest, M., Wuest, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Copper-Free+Click+Chemistry+with+the+Short-Lived+Positron+Emitter+Fluorine-18%5BTitle%5D)+AND+%22Org.+Biomol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Copper-Free Click Chemistry with the Short-Lived Positron Emitter Fluorine-18.</a> Org. Biomol. Chem. 9, 7393-7399 (2011).</li>
<li>Satpati, D., Bauer, N., Hausner, S. H., Sutcliffe, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+%5B64Cu%5DDOTA-ADIBON3-Ala-PEG28-A20FMDV2+via+Copper-Free+Click+Chemistry+for+PET+Imaging+of+Integrin+%CE%B1v%CE%B26%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Radioanal.+Nucl.+Chem%22%5BJournal%5D)">Synthesis of [64Cu]DOTA-ADIBON3-Ala-PEG28-A20FMDV2 via Copper-Free Click Chemistry for PET Imaging of Integrin αvβ6.</a> J. Radioanal. Nucl. Chem. 302, 765-771 (2014).</li>
<li>Lee, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facile+Method+To+Radiolabel+Glycol+Chitosan+Nanoparticles+with+64Cu+via+Copper-Free+Click+Chemistry+for+MicroPET+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Facile Method To Radiolabel Glycol Chitosan Nanoparticles with 64Cu via Copper-Free Click Chemistry for MicroPET Imaging.</a> Mol. Pharmaceutics. 10, 2190-2198 (2013).</li>
<li>Zeng, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((64Cu+Core-Labeled+Nanoparticles+with+High+Specific+Activity+via+Metal-Free+Click+Chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">64Cu Core-Labeled Nanoparticles with High Specific Activity via Metal-Free Click Chemistry.</a> ACS Nano. 6, 5209-5219 (2012).</li>
<li>Jeon, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiosynthesis+and+in+vivo+Evaluation+of+%5B125I%5D2-4%28iodophenethyl%29-2-Methylmalonic+Acid+as+a+Potential+Radiotracer+for+Detection+of+Apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Radioanal.+Nucl.+Chem%22%5BJournal%5D)">Radiosynthesis and in vivo Evaluation of [125I]2-4(iodophenethyl)-2-Methylmalonic Acid as a Potential Radiotracer for Detection of Apoptosis.</a> J. Radioanal. Nucl. Chem. 308, 23-29 (2016).</li>
<li>Adam, M. J., Wilbur, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiohalogens+for+Imaging+and+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">Radiohalogens for Imaging and Therapy.</a> Chem. Soc. Rev. 34, 153-163 (2005).</li>
<li>Jeon, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiosynthesis+of+123I-Labeld+Hesperetin+for+Biodistribution+Study+of+Orally+Administered+Hesperetin%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Radioanal.+Nucl.+Chem%22%5BJournal%5D)">Radiosynthesis of 123I-Labeld Hesperetin for Biodistribution Study of Orally Administered Hesperetin.</a> J. Radioanal. Nucl. Chem. 306, 437-443 (2015).</li>
<li>Kil, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+%5B123I%5DIPEB+and+%5B123I%5DIMPEB+as+SPECT+Radioligands+for+Metabotropic+Glutamate+Receptor+Subtype%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Med.+Chem.+Lett%22%5BJournal%5D)">Development of [123I]IPEB and [123I]IMPEB as SPECT Radioligands for Metabotropic Glutamate Receptor Subtype.</a> ACS Med. Chem. Lett. 5, 652-656 (2014).</li>
<li>Chen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Utility+of+I-123+Pretherapy+Scan+in+I-131+Radioiodine+Therapy+for+Thyroid+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Thyroid%22%5BJournal%5D)">The Utility of I-123 Pretherapy Scan in I-131 Radioiodine Therapy for Thyroid Cancer.</a> Thyroid. 22, 304-309 (2012).</li>
<li>Jeon, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+Method+for+Iodine+Radioisotope+Labeling+of+Cyclooctyne-Containing+Molecules+using+Strain-Promoted+Copper-Free+Click+Reaction%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Efficient Method for Iodine Radioisotope Labeling of Cyclooctyne-Containing Molecules using Strain-Promoted Copper-Free Click Reaction.</a> Bioorg. Med. Chem. 23, 3303-3308 (2015).</li>
<li>Choi, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+Evaluation+of+an+125I-Labeled+Azide+Prosthetic+Group+for+Efficient+and+Bioorthogonal+Radiolabeling+of+Cyclooctyne-Group+Containing+Molecules+using+Copper-Free+Click+Reaction%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem.+Lett%22%5BJournal%5D)">Synthesis and Evaluation of an 125I-Labeled Azide Prosthetic Group for Efficient and Bioorthogonal Radiolabeling of Cyclooctyne-Group Containing Molecules using Copper-Free Click Reaction.</a> Bioorg. Med. Chem. Lett. 26, 875-878 (2016).</li>
<li>Kim, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+Targeting+and+Imaging+Using+Cyclic+RGD-PEGylated+Gold+Nanoparticle+Probes+with+Directly+Conjugated+Iodine-125%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Tumor Targeting and Imaging Using Cyclic RGD-PEGylated Gold Nanoparticle Probes with Directly Conjugated Iodine-125.</a> Small. 7, 2052-2060 (2011).</li>
</ol>

저자는 공개할 것이 없습니다.

일반적으로, 정제 된 I-125 표지 지드 (1)의 관찰 방사 화학적 수율은 75 ± 10 %이었다 (N = 8). 방사성 표지는 방사능 MBq의 50-150로 수행하고, 그 결과 방사 상당히 일치한다. [125 I]의 NaI (t 1/2 = 59.4 d) 방사성 요오드화 반응에 사용 하였다 개월 이상 방사성 붕괴를 시행 한의 방사 화학적 수율로 관찰하면 약간 (53~65%) 감소 하였다. 따라서, [125 I]의 NaI 그것이 생성 되 자마자 이용 될 최적의 방사 또는 수율을 획득하기 위해 실험실로 전달하는 것이 좋다. 또한, 새로 제조 클로라민 T 용액은 원하는 방사 화학적 수율을 획득하기 위해 상기 반응에 사용되어야한다. 프리 커서 (2)는 매우 소수성이기 때문에, 150 μL의 절대 에...

아지드와 시클로옥틴 사이의 변형 촉진 무동 클릭 반응은 광범위한 생체 분자, 나노 물질 및 살아있는 피험자1-7의 효율적인 생체 직교 표지에 광범위하게 적용되었습니다. 이 접합 반응의 우수한 부위 특이성과 빠른 반응 속도로 인해 방사성 표지된 추적자를 합성하는 데에도 사용되었습니다. 몇 개의 18F-표지 아지드 또는 DBCO 보철 그룹은 펩타이드 및 항체를 표적으로 하는 다양한 암의 체외 라벨링과종양 8-13의 생체 내 사전 표적 이미징을 위해 준비되었습니다. 이러한 예 외에도 양전자 방출 단층 촬영(PET) 이미징 연구를 위한 나노 물질의 금속-방사성 동위원소 라벨링에 동일한 접합 반응이 적용되었습니다14-16.
수십 년 동안 방사성 요오드는 PET 이미징(124I), 단일 광자 방출 컴퓨터 단층 촬영(SPECT) 이미징(123I, 125I) 및 갑상선암 치료(131I)를 통해 생물 의학 연구 및 임상 시험에 사용되었습니다17-21. 따라서 방사성 요오드 라벨링을 위한 효율적인 방법은 분자 이미징 연구, 생체 분자의 장기 분포 분석, 바이오마커 식별 및 약물 개발을 포함한 다양한 조사에서 근본적으로 중요합니다. 구리가 없는 클릭 반응 전략은 방사성 요오드 라벨링에 사용될 수 있습니다. 그러나 이 응용 분야는 18개의 F-표지된 생체 분자22-23만큼 광범위하게 조사되지 않았습니다. 여기에서는 DBCO 그룹 유래 분자의 방사성 표지를 위한 125I 표지 아지드의 합성을 위한 단계별 프로토콜을 제공합니다. 본 보고서의 절차에는 주석화 전구체의 방사성 요오드화, HPLC를 사용한 정제 단계 및 고체상 추출이 포함됩니다. 또한 125I-표지된 아지드화물을 사용하여 DBCO-group 변형 13-nm 크기의 금 나노입자의 효율적인 방사성 표지를 입증합니다. 이 보고서의 자세한 프로토콜은 합성 화학자가 방사성 표지 제품의 합성을 위한 새로운 방사성 표지 방법론을 이해하는 데 도움이 될 것입니다.

<table><tbody><tr><td>클로라민 T 삼수화물</td><td>시그마</td><td>402869</td><td></td></tr><tr><td>[125I]NaI in aq. NaOH</td><td>Perkin-Elmer</td><td>NEZ033A010MC</td><td></td></tr><tr><td>나트륨 메타중아황산염&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S9000</td><td></td></tr><tr><td>포름산</td><td>Sigma</td><td>251364</td><td></td></tr><tr><td>Sep-Pak tC18 plus 카트리지</td><td>Waters</td><td>WAT036800</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl sulfoxide&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>아세톤</td><td>Sigma</td><td>650501</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>Sigma</td><td>459844</td><td></td></tr><tr><td>Gold(III) chloride trihydrate</td><td>Sigma</td><td>520918</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>P1379</td><td></td></tr><tr><td>DBCO PEG SH (MW 5,000)</td><td>NANOCS</td><td>PG2-DBTH-5k</td><td></td></tr><tr><td>TLC 실리카 겔 60 F254</td><td>Merck</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Analytical HPLC</td><td>Agilent</td><td>1290 Infinity</td><td>모델 번호</td></tr><tr><td>Prep HPLC</td><td>Agilent</td><td>1260 Infinity</td><td>모델 번호</td></tr><tr><td>Analytical C18 역상 컬럼</td><td>Agilent</td><td>Zorbax Eclipse XDB-C18</td><td></td></tr><tr><td>Prep C18 역상 컬럼</td><td>Agilent</td><td>PrepHT XDB-C18</td><td></td></tr><tr><td>Radio TLC 스캐너</td><td>Bioscan</td><td>AR-2000</td><td>모델 번호</td></tr><tr><td>방사성 동위원소 선량 교정기</td><td>Capintec, Inc</td><td>CRC -25R 선량 교정기</td><td>모델 번호</td></tr></tbody></table>

를 사용하여 금 나노 입자의 효율적인 방사성 표지를위한 최적화 된 프로토콜<sup&gt; (125)</sup&gt; i-표시 아 지드 보철 그룹

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

여기에서는 125I-표지된 아지드 보철기의 방사선 합성을 위한 자세한 프로토콜과 구리가 없는 클릭 반응을 사용하여 DBCO-그룹 기능화된 금 나노 입자의 효율적인 방사 표지에 대한 적용을 보여줍니다. 주석화된 전구체 (2)의 방사성 요오드화는 [125I]NaI 및 클로라민 T를 산화제로 사용하여 실온에서 15분 동안 수행하였다. 조생성물의 HPLC 정제 후, 정제된 125I-표지 아지드(1)를 높은 방사성 화학적 수율(75 ± 10%, n = 8) 및 우수한 방사성 화학적 순도(>99%)로 얻었다. 방사성 표지 된 13nm 크기의 금 나노 입자의 합성을 위해 DBCO 기능성 금 나노 입자 (3)는 티올 화 폴리에틸렌 글리콜 중합체를 사용하여 제조 하였다. 1과 3 사이의 구리가 없는 클릭 반응은 125개의 I-표지된 금 나노입자(4)에 방사성 박막 크로마토그래피(radio-thin-layer chromatography, radio-TLC)에 의해 측정된 95% 이상의 방사성 화학적 수율을 제공했습니다. 이러한 결과는 스트레인 촉진 구리가 없는 클릭 반응을 사용하는 현재의 방사성 표지 방법이 DBCO 그룹 함유 나노 물질의 효율적이고 편리한 방사성 표지에 유용할 것임을 분명히 나타냅니다.

stannylated 전구체 (2)의 방사성 요오드화 반응은 방사능 표지 된 생성물을 제공하기 위해 실온에서 15 분 동안 [125 I] NaI를 아세트산 및 클로라민 T 150 MBq의를 사용하여 수행 하였다 (1). 조 혼합물을 예비 HPLC 정제 후, 목적 생성물을 방사 화학적 수율은 75 ± 10 % (N = 8)을 얻었다. HPLC 분석은 125 I 표지 된 생성물의 방사 화학적 순도는 99 % 이상 (도 2)이고, 제품 (1)의 관찰 특정 방사능 40.7 MBq의 / μmol 않은 것을 확인했다. 카트리지를 사용하여 정제 된 생성물을 함유하는 분획을 고체상 추출 (1)의 아세톤 용액을 제공 하였다. 질소 또는 아르곤 가스의 스트림을 사용하여, 유기 용매가 증발 될 수 있...

I 125 - 표지 지드의 합성 및 무도 클릭 반응을 이용 dibenzocyclooctyne (DBCO) - 기 - 컨쥬 게이트 13 나노 크기의 금 나노 입자의 방사성 표지에 대한 세부 절차를 설명한다.

를 사용하여 금 나노 입자의 효율적인 방사성 표지를위한 최적화 된 프로토콜<sup&gt; (125)</sup&gt; I-표시 아 지드 보철 그룹

Here, we demonstrate a detailed protocol for the radiosynthesis of a 125I-labeled azide prosthetic group and its application to the efficient ...

이 프로토콜의 전반적인 목표는 변형 촉진 구리-프리 클릭 반응(strain promoted copper free click reaction)을 이용하여 방사성 요오드 표지 금 나노 입자를 효율적이고 빠르게 합성하는 방법을 제공하는 것입니다. 이 방법은 방사성 동위원소 표지 및 PET 또는 SPECT 영상 연구를 위한 일반 영상 프로브의 합성과 같은 방사화학 분야의 핵심 질문들에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 아지드 보조 그룹(azide prosthetic group)을 사용하여 우수한 방사화학적 수율과 방사화학적 순도로 요오드 표지 금 입자를 효율적으로 합성할 수 있다는 점입니다.방사성 평가 단계는 습득하기 어렵기 때문에 이 방법의 시각적 시연이 매우 중요합니다. 이러한 절차에는 적절한 시설과 방사성 표지 처리 경험이 필요합니다. 이번 연구와 더불어, 방사성 전공 학생인 심하은 님이 해당 절차를 시연할 예정입니다.방사성 요오드화 반응을 수행하려면, 전구체 용액을 1.5 mL 튜브에 넣습니다. 상온에서 전구체 용액에 10 µL의 아세트산을 첨가합니다. 그런 다음 0.1 M 수산화나트륨 50 µL에 녹인 150 MBq의 iodine 125를 반응 혼합물에 첨가합니다.chloramine T 용액을 첨가하고 반응 혼합물이 담긴 마이크로원심분리 튜브를 닫습니다. 방사성 요오드 표지 반응이 완료될 때까지 반응 혼합물을 상온에서 15분 동안 배양합니다. 그런 다음, 방사성 요오드 표지 반응을 정지시키기 위해 반응 혼합물에 sodium metabisulfite 용액을 첨가합니다.조제품 0.2 µL를 취한 후, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석을 위해 50% 수성 아세토나이트릴 100 µL로 희석한다. 역상 분석용 방사능 HPLC를 사용하여 희석된 조제품을 분석한다. 반응 혼합물 전체를 HPLC 바이알로 옮긴다.반응 튜브를 0.5 mL의 aceto nitryl로 헹구고, 헹군 액체를 동일한 주입 바이알에 넣습니다. 수집된 용액을 1 mL의 물로 희석합니다. 분취 HPLC로 조생성물을 정제하려면, 조생성물을 분취 방사능 HPLC에 주입하십시오.요오드 125(iodine 125) 표지 아지드(azide)를 나타내는 방사성 피크를 유리 시험관에 수집합니다. 제조사의 프로토콜에 따라 방사능 선량 교정기를 사용하여 해당 분획의 방사화학적 수율을 측정합니다. 그 후, 정제된 생성물을 분석용 방사성 HPLC에 주입하여 동일한 HPLC 조건으로 생성물의 방사화학적 순도를 측정합니다.제품의 고상 추출을 수행하려면, 원하는 제품이 포함된 분획을 40 mL의 순수로 희석하십시오. 희석된 용액을 전처리된 TC18 카트리지에 넣습니다. 카트리지를 15 mL의 물로 추가 세척하십시오.카트리지에 포집된 생성물을 2 mL의 acetone으로 용출시켜 납 차폐 장치로 보호된 10 mL 유리 바이알에 담습니다. 제조사의 프로토콜에 따라 방사능 선량 교정기(radioactivity dose calibrator)를 사용하여 용출된 생성물의 방사능을 측정합니다. acetone을 증발시킨 후, 다음 방사성 표지 단계를 위해 잔류물을 100 내지 200 µL의 DMSO로 용해합니다.텍스트 프로토콜에 기술된 대로 DBCO 그룹이 수식된 금 나노입자를 합성합니다. 원심분리를 이용하여 DBCO 그룹이 수식된 금 나노입자의 농축 용액을 준비합니다. 그리고 금 나노입자의 농도를 2 µM로 조정합니다.5 µL의 DMSO에 녹인 4.1 MBq의 iodine 125 표지 azide를 2 µM 금 나노입자 50 µL 현탁액에 첨가합니다. 생성된 반응 혼합물을 40 °C에서 60분 동안 배양합니다. 조생성물(crude product)에서 0.2 µL의 분취액을 취하여 실리카 코팅된 박층 크로마토그래피(TLC) 판에 도포합니다.에틸 아세테이트를 이동상으로 사용하여 TLC 플레이트를 전개합니다. TLC 플레이트를 방사능 TLC 스캐너에 놓고 제조사의 프로토콜에 따라 스캐너를 작동시켜 방사성 표지 반응을 모니터링합니다. 원심분리를 통해 요오드 125가 표지된 금 나노입자가 포함된 반응 혼합물을 정제합니다.상청액을 따라내고 순수를 가해 금 나노입자 펠렛을 재현탁합니다. 정제된 생성물에서 0.2 µL의 분취액을 취해 실리카 코팅 TLC 판에 점적합니다. 이동상으로 에틸 아세테이트를 사용하여 TLC 판을 전개합니다.제조사의 프로토콜에 따라 radio TLC 스캐너에 TLC 플레이트를 놓고 스캔을 수행하여 iodine 125 표지 금 나노입자의 방사화학적 수율과 방사화학적 순도를 측정합니다. iodine 125 표지 아지드 보철기의 대표적인 결과가 여기에 제시되어 있습니다. 방사능 선량 교정기를 사용하여 75%의 방사화학적 수율이 측정되었습니다.분석용 라디오 HPLC 결과는 생성물의 방사화학적 순도가 매우 우수함을 보여줍니다. 여기에는 iodine 125로 표지된 금 나노입자의 대표적인 결과가 제시되어 있습니다. 라디오 TLC 분석 결과, 정제된 금 나노입자의 방사화학적 수율과 순도는 모두 95% 이상이었습니다. 이 기술을 숙달하면 적절하게 수행했을 때 3시간 이내에 완료할 수 있습니다.본 방법의 표지 화학 반응이 매우 효율적이고 간편하기 때문에, 이 기술의 활용 범위는 핵의학 영상 진단 및 치료 목적의 다양한 분자 프로브 제작으로 확장될 수 있습니다. 방사성 요오드를 다루는 작업은 매우 위험할 수 있으므로, 이 절차를 수행하는 동안에는 항상 납 벽돌이나 납 신발과 같은 보호 조치를 취해야 함을 잊지 마십시오.

an-optimized-protocol-for-efficient-radiolabeling-gold-nanoparticles

Research

연구

JoVE Journal

Chemistry

화학

이 비디오는 종양 치료를 위해 면역접합체와 방사선 리간드를 투여하는 사전 표적 방사선 면역 요법 또는 PRIT의 기술을 설명합니다. 이 방사성 면역 요법은 건강한 조직에 대한 방사선량을 줄이고 항체 기반 벡터와 호환되지 않는 반감기가 매우 낮은 방사성 핵종을 사용합니다.

사전 표적 방사선 면역 요법: 종양에 치료용 방사성 핵종을 표적 전달하는 방법

생물직교 역전자 수요 Diels-Alder cycloaddition은 암에 대한 효과적이고 모듈화된 사전 표적 PET 이미징 전략을 수립하기 위해 활용되었습니다. 이 프로토콜에서 이 방법론의 단계는 대장암 표적 항체 huA33 및 64Cu 표지 방사성 리간드를 사용하는 모델 시스템의 맥락에서 설명됩니다.

Pretargeted PET 영상에 대한 Bioorthogonal 역 전자 수요 딜스 - 알더 고리 모으고

수일 방사성 반감기와 유리한 붕괴 특성으로 인해 양전자 방출 방사성 금속 89Zr은 PET 이미징을 위한 항체 기반 방사성 의약품에 사용하기에 매우 적합합니다. 이 프로토콜에서는 89Zr 표지 항체의 생체접합, 방사성 합성 및 전임상 적용에 대해 설명합니다.

바이오 콘쥬 게이션과의 Radiosynthesis<sup&gt; 89</sup&gt; ZR-DFO 표지 항체

여기에서는 아지드 함유 아미노산을 유전적으로 통합한 후 균주 촉진 아지드-알킨 고리첨가(SPAAC)에 의해 아지드를 화학 프로브와 결합하여 항체 조각에 화학적 프로브를 부위 특이적으로 도입하는 프로토콜을 제시합니다.

효율적이고 사이트 별 스트레인 승진 아 지드 - 알킨 사이클로에 의해 항체 라벨링

이 작품에서는, nanoprobe 기반 바이오 센 싱의 신호 향상을 위한 프로토콜 제공 됩니다. 프로토콜은 금은, 실리 카 또는 산화 철 나노 입자의 구성 된 기존 nanoprobes의 표면에 chloroauric 산의 감소를 기반으로 합니다.

에 라 골드 나노 입자 합성에 의해 급속 한 Nanoprobe 신호 향상

이 프로토콜 합성 및 트랜스-cyclooctene (TCO)의 특성에 설명 합니다-항 체와 177루 표시 tetrazine (Tz) radioligand pretargeted radioimmunotherapy (PRIT)에 대 한 수정. 또한, 그것은 자세히 biodistribution vivo에서 및 colorectal 암의 murine 모델에 경도 치료 연구에 대 한 이러한 두 가지 구조를 사용 하 여를 설명합니다.

Pretargeted Radioimmunotherapy 역 전자 수요 Diels 오리 나무 반응에 따라

유세포 분석 및 공초점 레이저 스캐닝 현미경검사법에 의한 기능적, 근적외선 발광 광발광 금 나노클러스터 및 HeLa 세포 내부의 직접 검출을 위한 신뢰할 수 있고 쉽게 재현 가능한 방법이 설명되어 있습니다.

생물학적 응용 을 위한 근적외선 방출 금 나노클러스터의 합성

여기에 제시된 것은 바로 사용할 수 있는 방사성 표지 합성 [89 Zr]Zr-p-isothiocyanatobenzyl-desferrioxamine([89Zr]Zr-DBN)을 사용하여 양전자 방출 단층 촬영(PET) 방사성 동위원소, 89Zr(t1/2 78.4 h)로 세포를 방사성 표지하는 프로토콜입니다. [89Zr]Zr-DBN을 사용한 방사성 표지 세포는 투여 후 최대 7일 동안 PET를 사용하여 체내에서 투여된 방사성 표지 세포의 비침습적 추적 및 이미징을 가능하게 합니다.

세포 이동의 양전자 방출 단층 촬영 이미징: 세포 방사선 표지 방법

이 논문은 새로운 방사성 표지 프로브(즉, 68Ga-표지된 나노바디 NM-02)의 방사선 합성, 제형, 품질 관리 및 이종 이식 모델에서 소동물 PET/CT 이미징에 사용하는 방법에 대해 설명합니다.

68ga 표지 나노 분자의 방사선 합성, 품질 관리 및 소동물 양전자 방출 단층 촬영 이미징

이 프로토콜은 "루프 방법"[11C]메틸화를 통해 4개의 탄소-11 방사성 추적자를 준비하는 자세한 절차를 제시합니다. [11C]ER-176을 3개의 추가 방사성 추적자([11C]MRB, [11C]mHED 및 [11C]PiB)에 대한 데이터와 함께 합성하는 절차를 설명합니다. 루프 방법은 전통적인 반응 용기 [11C] 메틸화에 대한 증가된 방사성 화학적 수율로 효율적인 합성을 제공합니다.

Enhancing Efficiency and Radiolabeling Yields of Carbon-11 Radioligands for clinical research with the loop method(루프 방법을 사용한 임상 연구를 위한 탄소-11 방사성 리간드의 효율성 및 방사성 표지 수율 향상)

이 연구는 섬유아세포 활성화 단백질의 PET 이미징을 위해 GAIA V2 신디사이저를 사용한 [68Ga]Ga-3BP-3940 생산을 위한 자동화 프로세스를 설명합니다. 3개의 테스트 배치에 대해 수행된 품질 관리 테스트의 결과도 제공됩니다.

종양 미세환경의 PET 이미징을 위한 합성 모듈에서 [68Ga]Ga-3BP-3940의 자동 제조

학습하세요 금 나노입자의 방사성 요오드 표기법을 위해 무구리 클릭 반응을 활용한 효율적인 합성 방법을. 이 기술은 방사화학 수율과 순도를 높여 영상 연구용 프로브 개발에 활용됩니다.

를 사용하여 금 나노 입자의 효율적인 방사성 표지를위한 최적화 된 프로토콜

더 많은 동영상 탐색