를 사용하여 금 나노 입자의 효율적인 방사성 표지를위한 최적화 된 프로토콜 ⁽¹²⁵⁾ I-표시 아 지드 보철 그룹

이 프로토콜의 전반적인 목표는 균주 촉진 구리 자유 클릭 반응을 사용하여 방사성 요오드 표지 금 나노 입자에 대한 효율적이고 신속한 합성 방법을 제공하는 것입니다. 이 방법은 약 3년 동안 표지된 방사성 동위원소의 합성과 패드 또는 사양 이미징 연구를 위한 일반 이미징 프로브와 같은 방사선 화학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 황금 입자로 표지 된 1-5 개의 요오드를 효율적으로 합성 할 수 있다는 것입니다., 우수한 방사 화학적 수율과 방사 성 화학적 순도를 가진 아지드 보철물을 사용하여.

무선 평가 단계를 배우기 어렵기 때문에 이 방법의 시각적 시연이 중요합니다. 이러한 절차에는 적절한 시설이 필요하고 무선 라벨링 경험을 처리해야 하기 때문입니다. 이 연구와 함께 라디오 전공 학생인 심하은(Ha Eun Shim)이 시연을 할 예정이다.

방사 요오드화 반응을 수행하려면 1.5mL 튜브에 전구체 용액을 추가합니다. 실온에서 전구체 용액에 10마이크로리터의 아세트산을 첨가합니다. 그런 다음 50 마이크로 리터에 150 메가 베카렐의 요오드 125, 0.1 몰 수산화 나트륨을 반응 혼합물에 첨가합니다.

클로라민 T 용액을 추가하고 반응 혼합물이 들어 있는 미세 원심분리기 튜브를 닫습니다. 방사 요오드화 반응이 완료될 때까지 15분 동안 실온에서 반응 혼합물을 배양합니다. 그런 다음 반응 혼합물에 메타중아황산나트륨 용액을 첨가하여 방사 요오드화 반응을 냉각시킵니다.

0.2마이크로리터의 조제품을 회수한 다음 고성능 액체 크로마토그래피 또는 HPLC 분석을 위해 100마이크로리터의 50% 아세토 니트릴로 희석합니다. 역상 분석 무선 HPLC를 사용하여 희석된 원유 생성물을 분석합니다. 전체 반응 혼합물을 HPLC 바이알로 옮깁니다.

0.5mL의 아세토 니트릴로 반응 튜브를 헹구고 동일한 주입 바이알에 린스를 추가합니다. 수집된 용액을 물 1mL로 희석합니다. 원유 생성물을 회복 HPLC로 정제하려면 원유 생성물을 분취용 방사 HPLC에 주입합니다.

유리 시험관에서 요오드 125로 표시된 아지드를 나타내는 방사성 피크를 수집합니다. 제조업체의 프로토콜에 따라 방사능 선량 교정기를 사용하여 분획의 방사성 화학 물질 수율을 측정합니다. 그런 다음 제품의 방사성 화학적 순도를 측정하기 위해 동일한 HPLC 조건을 사용하여 정제된 생성물을 분석 무선 HPLC에 주입합니다.

생성물의 고체상 추출을 수행하려면 원하는 생성물을 포함하는 분획을 40mL의 순수로 희석하십시오. 희석된 용액을 사전 컨디셔닝된 TC18 카트리지에 추가합니다. 추가로 15mL의 물로 카트리지를 세척합니다.

2mL의 아세톤이 함유된 카트리지에 갇힌 제품을 납 실드로 보호되는 10mL 유리 바이알로 용리합니다. 제조업체의 프로토콜에 따라 방사량 교정기(radioactivity dose calibrator)를 사용하여 용출된 생성물의 방사능을 측정합니다. 아세톤을 증발시킨 후 다음 무선 라벨링 단계를 위해 100-200마이크로리터의 DMSO로 잔류물을 용해합니다.

텍스트 프로토콜에 설명된 대로 DBCO 그룹 변형 금 나노입자의 합성을 수행합니다. 원심분리를 이용하여 DBCO 그룹 변형 금 나노입자의 농축 용액을 제조합니다. 그리고 금 나노 입자의 농도를 2 마이크로 어금니로 조정하십시오.

5 마이크로 리터의 DMSO에 4.1 메가 베카렐의 요오드 125 표지 아지드를 5 마이크로 리터의 2 마이크로 몰 금 나노 입자의 현탁액에 첨가합니다. 생성된 반응 혼합물을 섭씨 40도에서 60분 동안 배양합니다. 원유에서 0.2마이크로리터 동종표본을 추출하여 실리카로 코딩된 박층 크로마토그래피 또는 TLC 플레이트에 적용합니다.

에틸 아세테이트를 이동상으로 사용하여 TLC 플레이트를 개발합니다. TLC 플레이트를 무선 TLC 스캐너에 놓고 스캐너를 실행하여 제조업체의 프로토콜에 따라 무선 라벨링 반응을 모니터링합니다. 원심분리에 의해 요오드 125로 표지된 금 나노입자를 포함하는 반응 혼합물을 정제합니다.

상층액을 디캔팅하고 금 나노 입자 펠릿의 재현탁을 위해 순수한 물을 첨가합니다. 정제된 생성물에서 0.2마이크로리터 동종표본을 추출하여 실리카로 코팅된 TLC 플레이트에 적용합니다. 에틸 아세테이트를 이동상으로 사용하여 TLC 플레이트를 개발합니다.

TLC 플레이트를 무선 TLC 스캐너에 놓고 스캐너를 실행하여 제조업체의 프로토콜에 따라 요오드 125 표지된 금 나노 입자의 방사성 화학적 수율과 방사성 화학적 순도를 결정합니다. 요오드 125 표지된 아지드 보철 그룹의 대표적인 결과가 여기에 나와 있습니다. 75%의 방사성 화학 물질 수율은 방사능 선량 계산기를 사용하여 측정되었습니다.

분석용 무선 HPLC 결과는 제품의 우수한 방사화학적 순도를 보여줍니다. 요오드 125 표지 금 나노 입자의 대표적인 결과가 여기에 나와 있습니다. 전파 TLC 분석은 정제된 금 나노 입자의 방사성 화학적 수율과 순도가 모두 95% 이상임을 보여주며, 이 기술을 제대로 수행하면 3시간 내에 완료할 수 있습니다.

이 기술의 의미는 핵 이미징 치료 목적을 위한 다양한 분자 프로브의 준비로 확장되었는데, 이는 현재 방법의 라벨링 화학이 매우 효율적이고 간단하기 때문입니다. 방사성 요오드로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으므로 이 절차를 수행하는 동안 항상 더 가벼운 벽돌이나 더 가벼운 신발과 같은 예방 조치를 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.