전위차 적정에 의한 바이오 오일의 카르보닐 작용기 측정: Faix 방법

여기에서는 열분해 바이오 오일에서 카르보닐 화합물을 정확하게 정량화하기 위한 전위차 적정 기술을 제시합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 적정 방법으로 다양한 바이오매스 유래 물질의 완전한 카르보닐 함량을 측정하는 것입니다. 이 방법은 열분해 오일과 같은 바이오매스 유래 제품에 포함된 반응성 카르보닐 화합물과 이러한 화합물이 바이오 오일의 노화에 미치는 영향에 대한 통찰력을 제공합니다. 이 방법은 더 작은 표본 크기와 독성 물질이 적으며 이전에 확립된 방법보다 더 정밀하고 정확합니다.

이 절차를 시작하려면 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 시약 용액을 준비합니다. 탄산나트륨 기본 표준물질을 섭씨 105도의 오븐에서 밤새 건조시킵니다. 그런 다음 탄산나트륨을 실온으로 식히십시오.

건조된 탄산나트륨 100-150mg의 무게를 금속 팬에 넣습니다. 적정 용기로 옮기고 실제 중량을 기록합니다. 그런 다음 교반 막대와 pH 전극 전구와 접합부를 덮을 만큼 충분한 물을 추가합니다.

자동 적정기를 사용하여 염산 용액을 적정 곡선의 변곡점인 종말점까지 적정합니다. 매번 새로운 탄산나트륨 샘플을 사용하여 이 적정을 두 번 반복하여 총 3개의 종말점 값을 얻습니다. 블랭크 A를 준비하기 시작하려면 스핀 베인이 있는 5ml 바이알에 5mm의 DMSO를 추가합니다.

다음으로, 제조된 하이드록실아민 하이드로클로라이드 용액 2밀리리터와 제조된 트리에탄올아민 용액 2밀리리터를 첨가합니다. 바이알의 뚜껑을 단단히 씌운 다음 바이알을 섭씨 80도로 예열된 블록 히터에 넣습니다. 2시간 동안 저어줍니다.

교반이 완료된 후 샘플을 적정 용기로 옮깁니다. 반응 바이알을 에탄올과 물로 따로 여러 번 세척하여 최종 용액이 80% 에탄올이 되도록 합니다. 그런 다음 자동 적정기를 사용하여 산성 용액을 종말점까지 적정합니다.

5ml 바이알에 약 100mg의 4-BBA를 넣습니다. 실제 무게를 기록한 다음 스핀 베인을 추가합니다. DMSO 5ml를 추가합니다.

그 후, 준비된 하이드록실아민 하이드로클로라이드 용액 2밀리리터에 샘플을 용해시킵니다. 준비된 트리에탄올아민 용액 2ml를 추가합니다. 다음으로, 바이알의 뚜껑을 단단히 닫고 섭씨 80도로 예열된 블록 히터에 넣습니다.

2시간 동안 저어줍니다. 교반이 완료된 후 열 블록에서 샘플을 제거하고 식히십시오. 그런 다음 샘플을 적정 용기로 옮깁니다.

반응 바이알을 에탄올과 물로 따로 여러 번 세척하여 최종 용액이 80% 에탄올이 되도록 합니다. 그런 다음 자동 적정기를 사용하여 산성 용액을 종말점까지 적정합니다. 이 유효성 검사를 두 번 반복하여 세 개의 엔드포인트 값을 얻습니다.

먼저, 약 100mg의 바이오 오일 샘플을 5ml 바이알에 넣습니다. 실제 샘플 중량을 기록합니다. 그런 다음 스핀 베인을 추가하십시오.

DMSO 5ml를 추가합니다. 다음으로, 제조된 하이드록실아민 하이드로클로라이드 용액 2밀리리터에 샘플을 용해시킵니다. 준비된 트리에탄올아민 용액 2ml를 추가합니다.

그런 다음 바이알의 뚜껑을 단단히 닫고 섭씨 80도에서 2시간 동안 저어줍니다. 교반이 완료된 후 샘플을 적정 용기로 옮깁니다. 반응 바이알을 에탄올과 물로 따로 여러 번 세척하여 최종 용액이 80% 에탄올이 되도록 합니다.

자동 적정기를 사용하여 염산 용액을 적정 곡선의 변곡점까지 적정합니다. 이 종말점을 기록하고 바이오 오일 분석을 두 번 더 반복하여 총 3개의 종말점 값을 얻습니다. 그런 다음 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 데이터를 분석합니다.

이 연구에서는 열분해 바이오 오일에서 카르보닐 화합물을 정확하게 정량화하기 위해 전위차 적정 기법을 사용합니다. 미가공 바이오 오일 샘플과 블랭크 적정 모두에 대한 대표적인 적정이 여기에 나와 있습니다. 1차 도함수는 각 적정 곡선에서 변곡점을 쉽게 식별할 수 있도록 플롯됩니다.

그런 다음 이 값은 열분해 오일 샘플의 총 카르보닐 함량을 계산하는 데 사용됩니다. 염산 적정제 농도는 리터당 07032 몰로 결정되었습니다. 3개의 블랭크의 평균 산 소비량은 13.0085 밀리리터로 결정되었으며, 첫 번째 적정에 대한 해당 종말점은 4.8909 밀리리터로 결정되었습니다.

두 부피를 빼고, 샘플의 무게로 나누고, 산 농도를 곱하면 바이오 오일 샘플에 대해 그램당 4.9724밀리몰의 카르보닐 함량이 나옵니다. 바이오 오일 분석의 전통적인 Nicolaides 방법은 실온에서 일반적인 교반 시간이 18-24 시간 동안 수행되며, 이는 일부 카르 보닐의 입체 방해로 인해이 샘플에 존재하는 모든 카르 보닐의 완전한 반응에는 충분하지 않습니다. 혼합물을 가열하면 반응 속도가 급격히 증가하지만 니콜라이데스 방법에 필요한 시약의 부피는 열에서 안정적으로 교반하기 어려울 수 있습니다.

그러나 제시된 Black/Faix 방법은 더 정확한 결과를 더 빨리 제공하고 더 적은 재료를 사용합니다. 여기서, 히드록실아민 염산염은 과량으로 존재하며 소비되지 않은 히드록실아민 염산염은 적정에 영향을 미치지 않습니다. 이 방법에는 적정 오류를 확인하기 위해 테스트당 여러 개의 독립적인 샘플도 포함됩니다.

이것은 빠르고 쉽게 수행 할 수있는 방법입니다. 최대 11개의 고유 시료를 8시간 이내에 분석할 수 있습니다. 절차가 시작되면 가능한 한 빨리 적정을 완료하는 것이 중요합니다.

트리에탄올아민은 샘플을 밤새 방치하면 형성될 수 있으며, 이로 인해 부정확성이 발생할 수 있습니다. 이 비디오는 카르보닐 성분 및 바이오매스 유래 물질에 대한 산화 반응을 수행하는 데 필요한 도구를 제공합니다. 이 방법은 빠르고 정확하며 상대적으로 위험이 낮은 시약을 사용합니다.

이 절차를 수행하는 동안 열분해 오일, 하이드록실아민 염산염, 트리에탄올아민 및 에탄올에는 모두 이와 관련된 위험이 있음을 유의하십시오. 이러한 화학 물질을 사용하는 동안 실험실 가운, 장갑 및 보안경과 같은 개인 보호 장비를 착용해야 합니다.