Name: 다 잘 판에 대 한 시스템을 삽입 하는 결단 력과 침투성 막에 3 차원 조직 모델에서 보급의 시뮬레이션 하는 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: 배우세요 3D 피부 모델의 투과성 및 확산 계수를 소형 멤브레인 인서트 시스템에서 측정하는 방법을. 시뮬레이션 소프트웨어를 활용한 매개변수 최적화로 제약 및 화장품 응용 분야의 조직 공학 연구에 필수적인 데이터를 제공합니다.

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이 작품 호 부여에서 재정 지원 도이치 가운데 (DFG)에서 만든 PO413/12-1과 라 1028/7-1.

1. 침투성 연구에 대 한 샘플 준비
참고: 투과 측정 및 시뮬레이션 확인, agarose 젤 또는 피부 모델의 재배 기반 셀 매트릭스 모델의 구성 된 샘플 사용 되었다.
<ol><li>Agarose 젤
	<ol>
<li>H2O의 10 mL에 agarose 고해상도 가루 0.2 g (이중 증 류 물)을 분해.</li>
		<li>솔루션을 혼합 하 고 80 ° C까지가 열 8 분에 대 한 온도 유지 합니다.</li>
		<li>96-잘 막 삽입 시스템 (4.26 m m 직경에서)의 멤브레인에 28.6 µ L agarose 젤을 적용 또는 사용 226 µ L 12 잘 막에 대 한 삽입 시스템 (직경에서 12 m m) (예를 들어, Transwell 시스템).</li>
		<li>젤 경화 될 때까지 10 분을 기다립니다.</li>
	</ol></li>
	<li>콜라겐 젤 참고: 모든 단계는 무 균 조건 하에서 수행 하 고 솔루션 콜라겐 젤의 중 합 속도를 얼음에 보관 됩니다.<ol>
<li>0.4% 콜라겐 R 솔루션 (쥐 꼬리 콜라겐)의 1 mL와 혼합 125 µ L의 행 크 스 균형 소금 솔루션 (HBSS).</li>
		<li>빨간색 노란색에서 페 놀 레드 변경의 색상까지 1 M NaOH (수산화 나트륨) (~ 6 µ L)와 솔루션을 적정 하십시오.</li>
		<li>콜라겐 젤에 Dulbecco의 수정이 글 중간 (DMEM) + 10% 태아 종 아리 혈 청 (FCS) 125 µ L을 추가 하 고 피 펫 팁을 신중 하 게 혼합.</li>
		<li>콜라겐 젤의 28.6 µ L 96-잘 막 삽입 시스템 또는 12-잘 막 삽입 시스템 226 µ L의 막에 적용 됩니다.</li>
		<li>30 분 동안 인큐베이터 (37 ° C, 5% CO2)에 젤을 둡니다.</li>
	</ol></li>
	<li>섬유 아 세포와 콜라겐 세포 모델 참고: 모든 단계는 무 균 조건 하에서 실행 됩니다.<ol>
<li>기본 섬유 아 세포는 실험 하기 전에 5-7 일 준비. DMEM + 셀 문화 플라스 크 (75 cm2 </li><li></li><li><li><li> </li><li><li><li></li><li><li></li><li><li></ol></li><li> <ol><li> </li><li></li><li><li> </li><li><li><li><li><li></li><li><li><li></ol></li><li> <ol><li><li><li></li><li><li></li><li><li></li><li></li><li><li> </li></ol></li></ol><ol><li> <ol><li></li><li> </li></ol></li><li> <ol><li><li><li> </li><li><li><li> </li></ol></li><li><ol><li><li></li><li></li><li> <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/56412/56412eq1.jpg"> </li><li></ol></li></ol><ol><li> <img alt="Equation 9" src="/files/ftp_upload/56412/56412eq9.jpg"> <ol><li><li> </li><li> </li><li> </li><li> </li><li> </li><li> </li><li></li><li> </li><li><li> </li><li></ol></li><li> <ol><li><li><li><li><li><li><li><li><li><li><li><li><li></ol></li><li> <ol><li><li> </li><li><li> </li><li><li><li> </li><li></ol></li></ol>

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</ol>

Uwe 마르크스는 CEO와 주주 이며 식도 린드 너는 TissUse GmbH, MOC 기술 및 제조 회사의 주주. 다른 저자는이 종이의 간행물에 관한 관심사의 충돌을 선언합니다.

이 연구는 조직 구조는 멤브레인에 설계를 통해 투과 척도를 개발 하는 방법 문서. Agarose 젤을 통해 분자 크기 변화와 물질의 투과 먼저 테스트 하 고 유효성 검사 메서드와 해당 시뮬레이션 시험 되었다. 그것은 잘 알려진 작은 분자 (젤 침투 착 색 인쇄기에 의해 여과 효과)를 제외 하 고 매트릭스 메쉬를 통해 빠르게 침투. 유사한 관측 sclera26, 인간 표 피 막27, 인간의 피부17및 쥐 피부28을 통해 물질의 크기-배제 실험 되었다. 침투성 계수와 해당 스톡 반경 (설명, 일반적으로 효과적인 분자 반경 보다 작은 분자와 같은 확산 속도와 이동 하드 구의 반지름) 사이 역 상관 관계 표시 되었습니다 26 , 28와 유사한 관계는 다른 분자 크기의 물질 실험에서 관찰 되었다. 침투성 계수 1/스톡 반경에 그려서 작은 분자 크기와 4 개의 그룹에는 선형 상관 관계가 발견 (R2 = 0.93) (그림 6). 이 제안 하는 방법으로 시뮬레이션된 침투성 계수는 현실적인 범위에서 나타냅니다.
실험에서 46.15%의 오차 프란츠 보급 셀 시스템10침투성 실험에 대 한 보도 보다 약간 큽니다. 1 개의 가능한 설명은 나중에 설명 fluorescein-isothiocyanate-dextran의 크기 분포 될 수 있습니다.
설명 하는 방법을 중요 한 장점에 비해 프란츠 보급 셀 시스템을 사용 하 여 방법 있다. 첫째, 설치는 더 조밀한; 실험은 상업 잘 플레이트 (∼ 13 cm x 8.5 c m)의 규모를가지고 하는 막 삽입 시스템에서 직접 실행 됩니다. 반면 별도 프란츠 보급 셀은 각 샘플에 필요한 여러 샘플을을 동시에 실행 될 수 있습니다. 둘째, 피부 모델의 침투성 막 삽입, 재배 수행에 직접 측정할 수 있습니다. 프란츠 유포 세포를 사용 하 여 샘플 밖으로 이동 하 여 더 작은 샘플에 대 한 성가신 이며 또한 보다 시스템에 장착 된 있다.
콜라겐 세포 매트릭스 투과 실험이이 방법은 수 셀 시드 시스템에 성공적으로 적용 될 것을 보였다. 여기에 제시 된 모델 피부 모델;에 대 한 확인 그러나, 다른 종류의 유기 셀 문화, 예를 들면, 신장 또는 간 메서드를 적용할 수 있습니다.
이 연구에서 콜라겐 셀 모델 있는 HaCaT 세포는 완전히 모델 표면 덮여 사용 되었다 ( 그림 5참조). 이 방법은 충분히 HaCaT 레이어 없이 콜라겐 세포 모델 사이의 침투성 계수를 구별 하는 민감한 시연 침투성 계수 감소에 지도 했다. 이상적으로, 피부 모델 진짜 피부29의 표 피에 접근, 방 벽을 구축 해야 합니다 그리고 그것은 따라서 실제 사용 하기 전에 피부 모델의 품질 (예, 진 피, 표 피의 건물)를 확인 해야 합니다. 피부 모델의 개발 기술 얼룩과 시각화 하 고 피부 단백질과 콜라겐30,,3132의 탐지에서 측정할 수 있습니다. 침투성 계수 또한 피부 모델의 개발을 평가 하기 위한 중요 한 요소가 있을 수 있습니다 하지만 추가 실험 이것을 확인 하는 데 필요한. 앞에서 설명한 대로이 메서드는 동시에 여러 개의 샘플을 실행 수 있습니다. 그것은 또한 침투성, 측정 하 고이 매개 변수는 피부 모델의 개발을 관찰 함으로써 재배 기간 동안 샘플을 걸릴 수 있습니다.
침투성 막 젤/콜라겐-셀-모델을 동시에 측정은 주목 한다. 검색 된 침투성 계수는 시스템 관련, 그것에 의하여 다른 피부 모델의 결과 비교 될 수 있다 동일한 막 삽입을 사용 하는 경우. 또한, 피부 모델 테스트 물질 것입니다 모델을 통해 침투 하지 그것에 인접 한, 어떤 것이 유도 오류 침투성 측정 확인 하기 위해 전체 재배 면적을 커버 해야 합니다. 실험 앞으로 간주 되어야 하는 또 다른 측면은 피부 주변 자연 환경. 일반적으로, 피부 표면의 온도 투과 조건에 영향을 미칠 수 있는 내부 지역에 비해 낮습니다.
컴퓨터 시뮬레이션으로 실험실 실험을 정렬 하기 위해 적용 된 시뮬레이션에 대 한 매개 변수 최적화를 가능 하 게 하는 방법 제시 되었다. 시뮬레이션은 작은 분자 크기와 물질에 대 한 실험 데이터를 잘 맞춰을 발견 했다. 그러나, 시뮬레이션 및 실험 데이터 간의 편차는 더 큰 분자 크기와 물질에 대 한 관찰 되었다. 큰 다 당 류 분자는 마찰을 증가 하 고 젤에 확산 과정을 느리게 수 있습니다. 이 효과 사용 하면 비정상적인 확산 실험 간의 편차에 대 한 가능한 이유 및 시뮬레이션 값33,34. 또 다른 설명은 fluorescein isothiocyanate dextran 작은 또는 큰 입자의 존재를 수 있습니다. 제조 업체는 작고 큰 입자가 있을 수 있는 특정된 범위와 평균 크기로 물질의 분자량을 지정 합니다. 그것 아니다 또한 명확 어떻게 분산 된이 물질은, 작은 입자는 젤과 유체 채널 통해 빠르게 침투. 이러한 확산 및 마찰 효과 고려 하는 시뮬레이션을 확장할 수 있다.
침투성 실험 및 시뮬레이션 2 OC.에 사용 하기 위해 개발 되었다 시뮬레이션의 도움으로,이 실험 방법은 더 정교한 실험 설정에 직접 전송할 수 있습니다. 예를 들어 막 삽입 시스템 시뮬레이션 2 OC의 형상 또는 비슷한 설정으로 다른 시스템에 전송 쉽게 수 있습니다. 이 옵션은 변조 시뮬레이션의 미래 실험의 디자인을 지원 하기 위해 사용할 수 있습니다. 또한, 증발, 비정상적인 보급 및 막 효과 등 부작용 시뮬레이션, 정확도 향상을 향상 시키기 위해 통합할 수 있습니다. 시뮬레이션 프로그램을 변경 하거나 피부 모델 개발의 다른 측면을 조사 하기 위하여 다른 물리적 모듈을 통합으로 뿐만 아니라 시뮬레이션 방정식을 향상 기회를 제공 합니다. 한 예로 포도 당 소비와 젖 산 생산 콜라겐 세포 모델에서의 시뮬레이션입니다.
의료 물질의 테스트는 특히 흥미로운 점은 어떻게 물질 기관-칩 시스템에 배포 됩니다. 내 도움 답변을 질문에 얼마나 빨리 같은 물질 시스템에 침투 하는 시뮬레이션 및 침투성 매개 변수는 농도 멀티 organ 칩에 다른 조직에 사용할 수 있을 것입니다 뿐만 아니라. 이 메서드는 지원 하 고 개발과 같은 장기-온-칩 시스템의 테스트를 향상 시킬 수 있습니다.

유기 일반 3D 문화 약물 개발 및 물질1테스트를 위한 강력한 도구가 되고있다. 이런 점에서 인간의 피부 모델은 화장품 업계에서 그 같은 규제 요구 사항으로 인해 특별 한 관심의. 그들은 그 후로 자신의 단일 기관 문화 다 잘 접시, 또는 추가 기관 모델, 예를 들면, 간2와 함께에서 멀티 organ-칩에 사용 하기 위해 수많은 3D 피부 모델의 개발에 들어서있다.
피부 상응의 재배, 관련 공기 액체 인터페이스 (알리) 적절 한 표 피 분화3에 대 한 필수적인 요소입니다. 하단에 액체 침투성 막으로 혈관의 구성 세포 문화 삽입 일반적으로 알리를 설정 하는 데 사용 됩니다. ALIs (지름 12.2 m m) 12-잘 접시까지 EpiDerm4, Phenion5, Episkin6, 96-잘 (4.26 m m 직경에서)에서 크기와 피부 모델의 문화에 대 한 상업적으로 이용 가능한 피부 모델에서 널리 활용 됩니다. 여기 설명 하는 방법을 막 삽입 시스템에서 물질의 투과를 결정 합니다.
침투성 계수 네이티브 피부5에 비해 어떤 배양된 피부 모델의 품질을 평가 하기 위한 중요 한 매개 변수 이며 얼마나 빨리 평가 하는 데 사용 됩니다 활성 물질이 피부를 통해 마이그레이션. 특히 약 또는 화장품 제품 피부에 적용 될 필요가 있다,이 매개 변수는 활성 에이전트 정확 하 게 그것을 통과 하는 때 이해에 필수적. 시스템의 동작을 예측 하 고 이후 필요한 시간이 걸리는 실험적인 노력을 줄이기 위해 시뮬레이션 수 더, 특히 때 큰 집합이 물질 관련.
프란츠 보급 셀 피부 투과 실험 및 피부 모델5,6,7,,89-의 상태--예술입니다. 이 장치는 고정된 샘플 (확산 배리어) 가진 두 개의 구획이의 사이 구성 됩니다. 물질을 테스트 샘플 (기증자 구획)의 상단에 직접 적용 되 고 반대 (수락자) 구획에 스며드는 화합물의 농도 검출 될 수 있다. 수락자 측에 일정 한 온도 균질 물질 농도 온도 챔버와 자기 활동가 통해 보장 됩니다. 샘플은 프란츠 셀의 수락자에 샘플링 팔에서 취해질 수 있다. 19 센티미터 사이의 179 cm 높이 범위,이 시스템은 비교적 큰10,11. 젤 같은 물질과 조직에 확산 계수 결정에 대 한 또 다른 방법은 FRAP입니다. 이 기술을 사용 하 여 표백의 원리 붙일 젤 하 고 다음 표백된 지역의 복구 시간을 결정에서 입자를 표시 확산 계수12,,1314계산.
또한, 피부15,16에서 물질의 투과 과정을 결정 하기 위하여 푸리에 변환 적외선 (FTIR) 분광학 적외선 빛 흡 광도와 입자 움직임을 감지를 사용할 수 있습니다. 그러나, 이러한 또는 다른 이미징 방법 (예를 들어, 2-광자 형광 상관 분광학17) 집중적인 악기 비용 필요.
이 문서에서는 메서드 제공 됩니다 직접 측정 막 삽입 시스템 내에서 방 벽의 침투성 피부 모델 경작 하 게 될 수 있다. 이 메서드는 침투성 실험을 작은 샘플 (잘 크기 4.26 m m 최대)의 다 수 있는 소형 시스템에서 실행 될 수 있습니다. 이것은 별도 장치를 장치에 탑재 될 각 조사 필요 하며 작은 샘플 (4.26 m m의 크기)에 대 한 실현 하기 어려운 프란츠 확산 셀 달리 이다. 또한, 메서드 (예:, confocal 또는 multiphoton 현미경) 주요 계측을 필요 하지 않습니다, 때문에 시간 및 비용 감소가 이루어집니다.
실험은 미소 한 구멍이 있는 막에서 수행 된 모든 삽입 agarose 젤 또는 막에 콜라겐 세포 모델의 구성 된 샘플 (장벽) 시스템. 다양 한 분자 크기와 형광 물질 (기증자) 샘플의 상단에 적용 된 및 침투 물질의 농도 형광 플레이트 리더를 사용 하 여 하단 (수락자)에서 발견 되었습니다 ( 그림 1참조). 메서드를 사용 하면 유효성을 검사 하 고이 시뮬레이션의 정확도 테스트, agarose 젤 생산 되었고 장벽으로 사용. Hydrogels는 생물학13에 다공성 매체 확산와 투과 과정의 수사를 위해 일반적으로 사용 됩니다. 메서드는 단순화 된 피부 모델18,19 기본 섬유 아 세포 및 인간 성인 낮은 칼슘 높은 온도 keratinocytes (HaCaT) 세포 (세포-매트릭스 모델), 콜라겐 매트릭스의 구성 된 셀 시드 시스템에서 다음 테스트를 했다 .
또한, 투과 과정 흐름 시뮬레이션 전산 유체 역학을 통해 시뮬레이션 했다. 그것은 즉, 매개 변수 최적화에 의하여 확산 계수 수 계산 실험 데이터에서 발견 되었다. 일반적으로,이 시뮬레이션은 다른 응용 프로그램; 예를 들어, 그것은 짧은 실험에 따라 투과 과정을 예측 가능 하 고 시뮬레이션 실험의 수를 크게 줄일 수 있습니다.
실험 방법 및 시뮬레이션 응용 프로그램 기관-칩 시스템1,20,21을 위해 설계 되었습니다, 그리고 특히 2-기관-칩 (2-OC)1,22, 상업적으로 개발 23,,2425. 원칙적으로, 막 삽입 시스템에 따라 어떤 기관 모델의 투과 과정이 방법으로 설명할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>아가로스</td><td>Carl Roth</td><td>K297.2</td><td>고해상도 파우더</td></tr><tr><td>콜라겐</td><td>Serva</td><td>47256.01</td><td>콜라겐 R 용액 0.4 %</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Lonza (Biozym Scientific GmbH)</td><td>880010-12</td><td>L-글루타민 함유 고포도</td></tr>당 <tr><td>FCS</td><td>Biochrom GmbH</td><td>S0615 0114F</td><td>태아 송아지 혈청</td></tr><tr><td>플루오레세인 나트륨 염</td><td>시그마-알드리치</td><td>46960-25G-F</td><td></td></tr><tr><td>플루오레세인 이소티오시아네이트-덱스트란</td>, <td>시그마-알드리치</td><td>46944-500MG</td>, <td>4000g/mol</td></tr>, <tr><td>플루오레세인 이소티오시아네이트-덱스트란</td><td>, 시그마-알드리치</td><td>FD10S-250MG</td>, <td>10,000g/mol</td></tr>, <tr><td>플루오레세인 이소티오시아네이트-덱스트란</td>, <td>시그마-알드리치</td><td>, FD20S-250MG</td>, <td>20,000g/mol</td></tr>, <tr><td>플루오레세인 이소티오시아네이트-덱스트란</td>, <td>시그마-알드리치</td><td>FD40S-250MG</td><td>40 000 g / mol</td></tr><tr><td>HBSS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14170120</td><td>칼슘 없음, 마그네슘 없음, 페놀 레드</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Merck</td><td>1.06467.9010</td><td>과립</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Gibco</td><td>18912-014</td><td>정제</td></tr><tr><td>Transwell 세포 배양 인서트</td><td>Corning</td><td>3391</td><td>96 well, 0.4 &micro; m 기공 크기</td></tr><tr><td>Transwell 세포 배양 삽입</td><td>코닝 (VWR)</td> <td>734-1563</td><td>12 웰, 0.4 &마이크로; m 기공 크기</td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Biochrom GmbH</td><td>L2143</td><td>EDTA 포함</td></tr></tbody></table>

다 잘 판에 대 한 시스템을 삽입 하는 결단 력과 침투성 막에 3 차원 조직 모델에서 보급의 시뮬레이션 하는 방법

A Method for Determination and Simulation of Permeability and Diffusion in a 3D Tissue Model in a Membrane Insert System for Multi-well Plates

체 외에서 배양 피부 모델 제약 및 화장품 응용 프로그램에 대 한 점점 관련 되 고 물질 테스트 뿐만 아니라 신약 개발에도 사용 됩니다. 이러한 모델은 대부분 막 삽입 시스템의 필수적인 요소가 되 고 다른 물질 쪽으로 그들의 침투성에 경작 된다. 일반적으로 이러한 매개 변수의 결정에 대 한 적용된 방법 일반적으로 큰 샘플 크기 (예를 들어, 프란츠 보급 세포) 또는 힘 드는 장비 (예를 들어, photobleaching (FRAP) 후 형광 복구) 필요합니다. 이 연구는 4.26 m m와 12.2 m m (재배 면적)의 직경 크기 막 삽입 시스템에서 직접 침투성 계수를 결정 하기 위한 메서드를 제공 합니다. 메서드를 사용 하면 피부 모델을 나타내는 콜라겐 세포 모델 뿐만 아니라 agarose 및 콜라겐 젤 검증 했다. 다른 분자 크기와 다른 세포 모델 (콜라겐 젤, 섬유, 및 HaCaT 구성)를 통해 투과 물질의 투과 과정 정확 하 게 설명 했다.
또한, 위의 실험 방법을 지원 하기 위해 시뮬레이션은 설립 되었다. 14 x 10-10 m 스톡 반경 시뮬레이션 맞는 잘 작은 분자 크기, 물질에 대 한 실험 데이터까지 (4000 MW), 시스템을 설명 하기 위해 유망 도구 이므로. 또한, 시뮬레이션 상당히 실험적인 노력을 줄일 수 있습니다 하 고 확장 하 여 더 복잡 한 설정에 맞게 충분히 강력.

96-잘 막에 침투성 실험 삽입할 2 %agarose 젤 시스템 장벽을 시뮬레이션의 정확도 평가 하기 위해 실시 했다. 45 x 10-10 m 스톡 반경 (376.27-40000 mol wt) 최대 5 x 10-10 m에서 확산 물질의 분자 크기의 영향을 확인 하는 fluorescein 나트륨 소금 (NaFl)와 fluorescein isothiocyanate 항생물질 (FD) 사용 되었다. 시뮬레이션의 기본 매개 변수 최적화 시뮬레이션 실험 데이터에 맞게 사용 되었다.
이 위해, 시뮬레이션된 침투성의 선형 부분의 실험 결과에 비교 했다. 작은 분자 크기에 대 한 시뮬레이션 및 실험 데이터 ( 그림 4a 및 4b 그림참조) FD 4000 80.2%와 99.2 %NaFl 좋은 계약에 있었다. 더 큰 분자 크기 FD만 50.5%, FD 20000, 79.7%, FD 40000 53.6%의 상관 관계를 보여주는 높은 편차를 생성. 시뮬레이션에서 곡선 진행 지연 시작 및 그래프 (참조 그림 4 c-4e)의 더 과정에서 강한 상승에서 보였다.
침투성 계수 및 시뮬레이션된 확산 계수 표시 됩니다 표 4. 투과 계수는 분자 크기 증가 함께 감소 합니다. 표준 편차는 10-8 m/s x 0.08 사이 10-8 m/s x 0.47 (N = 7)는 4.18%와 46.15%의 절대 오차에 대응. 더 큰 분자와 실험 더 큰 절대 오차를 보였다. 시뮬레이션 된 유포 계수 실험 침투성 계수에 매우 유사 하 게 행동 했다. 더 큰 스톡 반지름와 물질 보여 감소 확산 계수, 9.09%와 18.46 %ranged 절대 오차 (N = 3).
추가 투과 실험에서 4 개의 다른 콜라겐 세포 모델 유형 12-잘 막 장벽 삽입 시스템으로 사용 되었다. 이러한 모델 셀 무료 모델 및 셀 모델 표면에 콜라겐 젤에 HaCaT 기본 fibroblasts의 다른 조합으로 구성 됩니다. 다음과 같이 사용 되었다: 셀-무료 모델로, 콜라겐 + 섬유 아 세포 (대령 + F.), 콜라겐 (대령) 콜라겐 + HaCaT (대령 + 헤), 그리고 콜라겐 + 섬유 아 세포, HaCaT (대령 + F. + H.). DMEM + 10% FCS fluorescein 나트륨 소금 기증자 물질으로 사용 되었다. 이미지에 대 한 되며와 (그가) 오신 얼룩 콜라겐 세포 모델의 분석은 사용 되었다. 이 얼룩 이루어졌다 제조업체의 프로토콜을 사용 하 여. 그림 5에서 대표 대령 + F. + H. 모델 같은 얼룩은 표시 됩니다. 그가 약간의 콜라겐 매트릭스 조직 구조 얼룩. 섬유 아 세포는 매트릭스에 있으며 섬유 및 HaCaT 세포의 핵은 어두운 바이올렛에 스테인드. 콜라겐 매트릭스 위에 모델 상단 바깥쪽 레이어를 구축 HaCaTs의 핵 해야 많은 핵을 포함 하는 계층입니다.
표 5, 실험적인 투과 계수 및 시뮬레이션된 유포 계수 나열 됩니다. 대부분 HaCaT 없이 모델에 비해 낮은 투과/확산 계수는 HaCaT와 모델의 추세를 볼 수 있습니다. 투과 계수의 절대 오차는 10.9-24.4%, 그리고에 대 한 확산 계수 5.2%-12.9%.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56412/56412fig1.jpg"> 그림 1: 시스템을 삽입 하는 막의 침투성 실험의 측면 보기. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56412/56412fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56412/56412fig2.jpg"> 그림 2: 침투성 실험의 모범적인 그래프. 수락자의 농도 시간이 지남에 따라 플롯 됩니다. 2 점선된 라인 그래프의 거의 선형 부분 대괄호. 선형 부분의 기울기는 침투성 계수를 결정 하는 데 사용 됩니다. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56412/56412fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56412/56412fig3.jpg"> 그림 3: 형상 및 막의 메쉬 삽입 시스템 시뮬레이션에. (한) 96-잘 막의 형상 삽입 시스템. (b) 12-잘 막의 형상 삽입 시스템. (c) 96-잘 막의 메쉬 삽입 시스템. (d) 12-잘 막의 메쉬 삽입 시스템. (e) 횡단면 및 막의 매개 변수 삽입 시스템. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56412/56412fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56412/56412fig4.jpg"> 그림 4: 최적화 된 시뮬레이션을 투과 실험에서 실험 데이터의 비교. fluorescein 나트륨 소금 (a), (b) fluorescein isothiocyanate-dextran 4000 mol wt., (c) 10000 mol wt., (d) 20000 mol wt., 및 (e) 40000 몰 wt. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56412/56412fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56412/56412fig5.jpg"> 그림 5: 대표 그 콜라겐 세포 모델 (콜라겐 + Fibroblasts HaCaT)의 얼룩. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56412/56412fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56412/56412fig6.jpg"> 그림 6: 96-잘 막에서 fluorescein 나트륨 소금, fluorescein isothiocyanate-dextran을 사용 하 여 1/스톡 반경의 기능으로 침투성 계수 시스템 삽입. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56412/56412fig6large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>이름</td>
			<td>Experession mm에서 96 잘 시스템에 대 한</td>
			<td>12 잘 시스템 m m에 대 한 Experssion</td>
			<td>설명</td>
		</tr>
<tr>
<td>d_tran</td>
			<td>5.65 [mm]</td>
			<td>14.7 [mm]</td>
			<td>우물의 직경</td>
		</tr>
<tr>
<td>d_a</td>
			<td>4.26 [mm]</td>
			<td>12.1 [mm]</td>
			<td>막의 직경</td>
		</tr>
<tr>
<td>d_w</td>
			<td>8.79 [mm]</td>
			<td>21.97 [mm]</td>
			<td>수락자의 직경</td>
		</tr>
<tr>
<td>h_b</td>
			<td>2 [mm]</td>
			<td>2 [mm]</td>
			<td>방 벽의 Heigh</td>
		</tr>
<tr>
<td>h_sp</td>
			<td>1 [mm]</td>
			<td>1 [mm]</td>
			<td>거리 사이 잘 및 아래쪽</td>
		</tr>
<tr>
<td>h_a</td>
			<td>4.73 [mm]</td>
			<td>5.24 [mm]</td>
			<td>수락자의 높은</td>
		</tr>
<tr>
<td>b</td>
			<td>h_b/2</td>
			<td>-</td>
			<td>침수 깊이</td>
		</tr>
<tr>
<td>r</td>
			<td>((d_a)^2+4*b^2)/(8*b)</td>
			<td>-</td>
			<td>침수 공+ 의 반경
</td>
		</tr>
<tr>
<td>r_z</td>
			<td>r + h_b</td>
			<td>-</td>
			<td>z-침수 공+ 의 위치
</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1: "화학 종 전송" 시뮬레이션에 대 한 매개 변수 기하학. + Agarose의 시뮬레이션에 대 한 사용에 96 잘 막에서 젤 시스템을 삽입 합니다.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>이름</td>
			<td>식</td>
			<td>값</td>
			<td>설명</td>
		</tr>
<tr>
<td>C_fl</td>
			<td>0.1 [mg/ml]/376.28 [g/mol]</td>
			<td>0.26576 mol/m2
</td>
			<td>Fl.So의 농도입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td>C_4</td>
			<td>2 [mg/ml] / 4000 [g/mol]</td>
			<td>0.5 mol/m2</td>
			<td>FD 4.000의 농도</td>
		</tr>
<tr>
<td>C_10</td>
			<td>2 [mg/ml] / 10000 [g/mol]</td>
			<td>0.2 mol/m2</td>
			<td>FD 10.000의 집중</td>
		</tr>
<tr>
<td>C_20</td>
			<td>2 [mg/ml] / 20000 [g/mol]</td>
			<td>0.1 mol/m2</td>
			<td>FD 20.000의 농도</td>
		</tr>
<tr>
<td>C_40</td>
			<td>2 [mg/ml] / 40000 [g/mol]</td>
			<td>0.05 mol/m2</td>
			<td>FD 40.000의 농도</td>
		</tr>
<tr>
<td>Dif_w</td>
			<td>1e-9 [m ^2/s]</td>
			<td>1E-9 m2/s</td>
			<td>물 혼합의 확산 계수</td>
		</tr>
</tbody></table>표 2: "화학 종 전송" 시뮬레이션에 대 한 실제 매개 변수.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>이름</td>
			<td>식</td>
			<td>설명</td>
		</tr>
<tr>
<td>C</td>
			<td>Acceptor(c)</td>
			<td>수락자 농도의 정의</td>
		</tr>
<tr>
<td>D</td>
			<td>D_search * 1 e-10</td>
			<td>D 계수 변화</td>
		</tr>
</tbody></table>표 3: "최적화" 시뮬레이션에 대 한 매개 변수입니다.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>침투</td>
			<td>침투성 계수 (m/s) x 10-8</td>
			<td>확산 계수 (m/s2) x 10-10</td>
			<td>Permeate (m) x 10-10 의 스토크스 반경</td>
		</tr>
<tr>
<td>Fl.So입니다.</td>
			<td>4.79 ± 0.20</td>
			<td>1.94 ± 0.34</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>FD 4000</td>
			<td>2.37 ± 0.31</td>
			<td>0.65 ± 0.12</td>
			<td>14</td>
		</tr>
<tr>
<td>FD10, 000</td>
			<td>1.67 ± 0.47</td>
			<td>0.22 ± 0.02</td>
			<td>23</td>
		</tr>
<tr>
<td>FD 20000</td>
			<td>0.65 ± 0.30</td>
			<td>0.29 ± 0.04</td>
			<td>33</td>
		</tr>
<tr>
<td>FD 40000</td>
			<td>0.27 ± 0.08</td>
			<td>0.14 ± 0.02</td>
			<td>45</td>
		</tr>
</tbody></table>표 4: 2 %Agarose 젤 + 96 잘 막에서 막 통해 다른 스톡 radius와 물질의 침투성 및 확산 계수 시스템 삽입. (fluorescein 나트륨 소금 층 그래서, fitc dextran = FD =).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>모델</td>
			<td>침투성 계수 (m/s) x 10-8</td>
			<td>확산 계수 (m/s2) x 10-10</td>
		</tr>
<tr>
<td>대령</td>
			<td>2.18 ± 0.29</td>
			<td>1.22 ± 0.06</td>
		</tr>
<tr>
<td>대령 + F입니다.</td>
			<td>1.77 ± 0.38</td>
			<td>0.93 ± 0.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>대령 + H입니다.</td>
			<td>1.64 ± 0.40</td>
			<td>0.96 ± 0.05</td>
		</tr>
<tr>
<td>대령 + F. + H입니다.</td>
			<td>1.65 ± 0.18</td>
			<td>0.88 ± 0.11</td>
		</tr>
</tbody></table>표 5: 12에서 콜라겐 세포 모델을 통해 fluorescein 나트륨 소금의 침투성 및 확산 계수-잘 막 삽입 시스템 (대령 = 콜라겐, F. = 섬유, H. HaCaT =).

침투성 막에의 결심을 위한 방법은 다 잘 번호판에 대 한 시스템 삽입 하 고 매개 변수 최적화 시뮬레이션을 사용 하 여 확산 계수 계산에 대 한 실리콘에서 제공 됩니다.

In vitro cultivated skin models have become increasingly relevant for pharmaceutical and cosmetic applications, and are also used in drug development as ...

이 프로토콜의 전반적인 목표는 작은 멤브레인 삽입 시스템에서 3D 피부 모델의 투과성 및 확산 계수를 결정하는 것입니다. 이러한 문제는 투과성과 확산 계수가 필수적인 품질 요소인 제약 및 미용 응용 분야를 위한 3D 피부 조직 엔지니어링에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 작은 다중 웰 인서트 내에서 이러한 계수를 직접 측정할 수 있다는 것입니다.시뮬레이션의 작은 멤브레인 삽입 시스템은 선박 장치의 장기 및 멤브레인 삽입 시스템을 사용하는 기타 응용 프로그램에 사용하기 위해 추가로 수정할 수 있습니다. 아가로스 겔을 준비하려면 먼저 96웰 멤브레인 삽입 시스템의 각 멤브레인에 갓 준비된 80°C 액체 아가로스 젤 28.6마이크로리터를 도포하는 것으로 시작합니다. 10 분 후에, 젤은 응고되고 침투성 분석실험을 위해 ebe 사용될 수 있습니다.콜라겐 세포 모델을 준비하려면 먼저 얼음에 HBSS 125마이크로리터와 콜라겐 R 용액 1ml를 혼합한 다음 수산화나트륨으로 중화합니다. 다음으로, 125마이크로리터의 1차 섬유아세포를 완전한 배지에 현탁하여 혼합물에 첨가합니다. 그리고 생성된 세포 용액 28.6마이크로리터를 새로운 96웰 멤브레인 삽입 시스템의 각 웰에 추가합니다.세포 배양 인큐베이터에서 30분 후, 75마이크로리터의 완전 배지를 겔 표면에 추가하고 300마이크로리터의 완전 배지를 각 웰 바닥에 추가하여 세포 배양 인큐베이터에서 하룻밤 동안 배양합니다. 다음 날, 배지를 75마이크로리터의 인간 성인 저칼슘, 고온 각질 세포로 각 콜라겐 세포 모델에 교체하고 플레이트를 세포 배양 인큐베이터에 다시 3일 동안 넣습니다. 4일째에는 세포 모델의 표면에서 배지를 흡인하고 플레이트를 다시 7일 동안 인큐베이터에 다시 넣습니다.투과성 분석을 수행하려면 75마이크로리터의 공여체 물질을 관심 있는 작은 우물 삽입 모델 시스템에 분배하고 각 우물의 바닥에 300마이크로리터의 수용체 물질을 추가합니다. 플레이트를 섭씨 37도, 습도 95%, 약 480RPM의 셰이커에 5시간 동안 놓고 멤브레인 인서트 시스템을 매시간 한 번씩 빈 96웰 플레이트로 옮기고 플레이트 리더에서 실험 플레이트의 하단 웰 내에서 확산된 형광을 측정합니다. 투과성 실험이 끝나면 적절한 모델링 소프트웨어를 열고 새 모델을 시작합니다.모델 마법사 및 3D 모델을 선택합니다. Transport of Diluted Species를 추가하고 연구를 클릭합니다. 그런 다음 Time Dependent(시간 종속)를 선택하고 done(완료)을 클릭합니다.Global Definitions에서 마우스 오른쪽 버튼을 클릭하여 매개변수를 추가하고 기하학적 및 물리적 매개변수를 그리드에 입력합니다. 실험에서 멤브레인 삽입 시스템의 형상을 설정하고 Definitions를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 두 개의 도메인 프로브를 추가하고 한 프로브를 수용체 도메인으로, 다른 프로브를 도너 도메인으로 선택합니다. 두 도메인을 표현식 C와 세제곱미터당 몰의 단위를 사용하여 평균으로 설정합니다.그리고 transport properties 1 및 transport of diluted species에서 확산 계수를 설정합니다. transport of diluted species(희석된 종의 수송)를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 두 번째 수송 속성을 추가하고 도메인 선택에서 두 번째 장벽을 선택합니다. 희석된 종의 운송 중, 초기 값 1에 대해 농도를 0으로 정의합니다.transport of diluted species를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 두 번째 초기 값 2를 추가하고 donor를 세 번째 domain으로 선택합니다. 농도를 형광 공여체 물질의 초기 농도로 설정합니다. Transport of Diluted Species를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 대칭 하나를 추가하고 전체 형상을 반영하는 경계 선택의 모든 표면을 선택합니다.mesh를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 두 개의 자유 사면체를 추가하고 두 번째 장벽을 도메인으로 설정합니다. free tetrahedral one을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 미리 정의된 메쉬의 크기를 extra-fine에 추가합니다. 두 번째 자유 사면체에서 수용체와 공여체를 도메인으로 설정하고 사전 정의된 메쉬를 더 미세하게 설정합니다.그런 다음 study one(스터디 1)에서 compute(컴퓨팅)를 클릭하여 시뮬레이션을 시작합니다. 확산 시뮬레이션에서 생성된 데이터에 확산 계수를 맞추려면 Add psychic 메뉴를 열고 mathematics를 선택합니다. 최적화 및 민감도를 찾습니다.최적화를 선택하고 구성요소에 추가를 클릭합니다. 그런 다음 definitions를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 변수를 추가하고 표 3의 변수를 수동으로 입력합니다. 그런 다음 component coupling 메뉴에서 definitions를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 average 1을 추가한 다음 연산자 이름으로 acceptor를 수동으로 추가하고 domain one을 선택합니다.실험 데이터를 새 텍스트 문서로 내보냅니다. 세미콜론을 사용하여 데이터를 열로 구분하고 줄 바꿈을 사용하여 데이터를 행으로 구분합니다. 최적화를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 전역 최소 제곱 목표를 추가하고 텍스트 문서를 실험 데이터에 첨부합니다.전역 최소 제곱 목표를 클릭하여 첫 번째 열을 시간 열 1로 정의하고 두 번째 열을 값 열 1로 정의합니다. expression of value 열에 변수 C를 입력합니다.최적화를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 전역 제어 변수를 추가합니다. 그리고 D 밑줄 검색을 초기 값이 1, 하한이 0, 상한이 1, 000인 변수로 선언합니다.스터디 1을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 최적화를 추가합니다. 그리고 최적화 솔버 방법으로 SNOPT를 선택합니다. 최적성 허용 오차를 1로 설정하여 마이너스 8의 거듭제곱을 설정합니다.그런 다음 장벽의 확산 계수를 D로 설정합니다.100초 간격으로 스터디 중 시뮬레이션 시간 설정을 0초에서 22, 000초로 설정하고 계산을 클릭하여 매개변수 최적화를 시작합니다. 콜라겐 세포 모델의 조직학적 분석은 중심 기질 내의 섬유아세포의 약간의 염색을 보여줍니다. 콜라겐 매트릭스의 맨 위에는 인간 성인의 저칼슘, 고온 각질 세포로 구성될 가능성이 있는 많은 핵을 포함하는 층이 관찰될 수 있습니다.플루오레세인 나트륨 염 및 플루오레세인 이소티오시아네이트 덱스트란을 사용하여 확산 물질의 분자 크기의 영향을 검증하면 작은 분자 크기의 경우 시뮬레이션과 실험 데이터가 두 분자 모두에 대해 잘 일치한다는 것을 알 수 있습니다. 그러나 분자 크기가 클수록 시뮬레이션에서 곡선 진행에서 더 높은 편차가 발생하며, 이는 그래프의 시작 부분에서 지연이 발생하고 후반 과정에서 더 강하게 상승함을 보여줍니다. 실제로, 투과 계수는 분자 크기가 증가함에 따라 감소하며, 시뮬레이션된 계수는 실험적 투과성 계수와 유사하게 동작합니다.주목할 점은 인간 성인 저칼슘, 고온 각질 세포를 사용하는 대부분의 모델은 인간 성인 저칼슘, 고온 각질 세포가 없는 모델에 비해 투과 및 확산 계수가 낮다는 것입니다. 콜라겐 시뮬레이션 모델은 11일에서 12일 이내에 확립할 수 있으며 투과 측정은 적절하게 수행되면 6시간 이내에 완료할 수 있습니다. 절차를 수행하는 동안 투과 계수의 변동을 줄이기 위해 온도, 충전량, 적용 물질의 농도, 습도 및 멤브레인 공정과 같은 경계 조건을 일정하게 유지하는 것이 중요합니다.이 모듈 시뮬레이션의 도움으로 실험 노력을 줄이고 장시간 성능을 예측할 수 있습니다. 또한 다른 투과 장치 또는 장기 소유권 시스템에도 적용할 수 있습니다. 이 기술은 제약 및 화장품 응용 분야의 연구자들뿐만 아니라 조직 공학의 상호 작용 개발이 인공 조직의 확산 투과 과정을 탐구할 수 있는 길을 열어줍니다.

a-method-for-determination-simulation-permeability-diffusion-3d

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

침입형 유체의 흐름은 고체 종양에서 상승되며 종양 세포 침공을 조절하실 수 있습니다. 여기에서 우리는 매트릭스에 포함된 세포에 침입형 유체 흐름을 적용한 다음 세포 침입에 미치는 영향을 측정할 수있는 기법을 설명합니다. 이 기술은 쉽게 다른 시스템을 연구하는 데 적용할 수 있습니다.

종양 세포 침략에 중간 유체 흐름의 효과를 측정하는 세 가지 차원 세포 배양 모델

이 동영상은 유리 FITC 및 FITC 로딩 페리틴과 함께 막 삽입부의 성상세포와 내피 세포를 사용하여 시험관 내 혈액 뇌 장벽(BBB) 모델을 통한 투과를 연구하는 방법을 보여줍니다. FITC-페리틴은 내피 세포의 수용체에 결합하여 막 장벽을 넘어 하부 챔버로 이동한 반면, 자유 FITC는 제한된 투과를 보이며 상부 챔버에 머물렀습니다.

체외 혈액-뇌 장벽 모델을 통한 FITC와 FITC-페리틴의 투과 연구

많은 치료 응용 프로그램은 신체의 세포 장벽에 걸쳐 약물 사업자와 그들의화물의 안전하고 효율적인 전송을 필요로합니다. 이 문서는 위장 (GI) 상피 세포와 같은 세포 장벽에 걸쳐 약 nanocarriers (나노 결정)의 전송 속도와 메커니즘을 평가하기 위해 설립 방법의 적응을 설명합니다.

모델 및 세포 장벽에 걸쳐 약물 전달 시스템의 전송을 평가하는 방법

혈액 - 뇌 장벽 (BBB)​​의 인체 모델의 확립 BBB 장애와 관련된 뇌 상태에 대한 연구를 혜택을 누릴 수 있습니다. 우리는 여기서, 다공질 막의 양측에 인간 성상 세포와 뇌 내피 세포의 공동 배양을 허용 접촉 BBB 모델의 제조를위한 개선 된 기술을 설명한다.

방법 혈액 - 뇌 장벽의 인간 세포 기반의 연락 모델의 준비를 위해 개선

여기서, 케 라티노 사이트에 Streptolysin S, 그룹 A 연쇄상 구균에 의해 생성되는 독소 분비 효과를 연구하기 위해 투과성 막 삽입 계 감염 시스템을 사용하는 방법을 설명한다. 이 시스템은 용이하게 감염 동안 각종 숙주 세포 유형에서 다른 박테리아 분비 단백질의 연구에 적용 할 수있다.

투과성 막 삽입 기반 감염 시스템의 구현은 포유 동물 숙주 세포에서 분비 세균 독소의 효과를 연구하기

종양 미세환경(TME)을 모방하기 위해 투과성 미다공성 멤브레인 삽입물을 조정했습니다. 이 모델은 혼합 세포 배양으로 구성되며, 형광 태깅 또는 세포 분류를 사용하지 않고 고도로 농축된 개별 세포 집단을 간단하게 생성할 수 있으며, 정상 또는 스트레스 조건에서 TME 내 세포 간 통신을 연구할 수 있습니다.

종양 미세 환경의 모방 : 세포 간 통신을 농축 세포 인구를 생성 및 조사를위한 간단한 방법

인간의 혈액-뇌 장벽은 선택적으로 친수성 분자와 병원체가 뇌에 침투하는 것을 방지합니다. 수막염과 수술 후 정신 착란을 포함한 여러 가지 병리는 혈액 - 뇌 장벽의 침투성 증가와 관련이 있습니다. 여기서, 우리는 미생물 통과에 의한 장벽 투과성을 시험하기 위해 내피 세포 배양 모델을 기술한다.

미세 혈관 내피 세포를 통해 미생물 통과에 의해 혈액 - 뇌 장벽의 투과성 분석

이 프로토콜은 섬유성 기질 구획을 동반한 3D 생체 모방 모델을 제공합니다. 생리학적으로 관련된 하이드로겔을 사용하여 기질 세포 외 매트릭스의 생체 물성 특성, 세포 상호 작용, 종양 성장 및 전이의 활성 중재자를 모방합니다.

튜닝 가능한 바이오 물속성과 3D 환경에서 종양-스트로마 상호 작용을 연구하는 간암을 위한 생체 모방 모형

이 프로토콜은 유니 지질 및 다중 지질 소포, 지원지질 이중층 및 일시 중단 된 지질 이중 층을 모방 하는 세포의 형성을 설명 합니다. 이러한 체외 모델은 다양한 지질 유형을 통합하도록 조정할 수 있으며 다양한 분자 및 거대 분자 상호 작용을 조사하는 데 사용할 수 있습니다.

분자 상호 작용 연구를 위한 세포 모방 지원 및 중단된 지질 이중층 모델의 조립

이 보고서는 혈액-뇌 장벽 모델 구축을 위한 μSiM 플랫폼의 조립, 세포 배양 및 분석을 위한 프로토콜을 제공합니다.

혈액-뇌 장벽 모델링을 위한 MicroSiM(μSiM) 장벽 조직 플랫폼 사용

당사는 VOP(vessels-on-a-plate)라고 하는 3D 바이오프린팅 기술을 사용하여 표준 6웰 플레이트에서 유연한 크기와 원하는 패턴을 가진 혈관 채널의 고처리량 생산을 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 플랫폼은 손상된 내피와 관련된 질환에 대한 치료법 개발을 발전시킬 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다.

크기 및 패턴 유연성을 갖춘 표준 six-well plates의 혈관 투과성을 모델링하기 위한 High-throughput Bioprinting 방법

배우세요 3D 피부 모델의 투과성 및 확산 계수를 소형 멤브레인 인서트 시스템에서 측정하는 방법을. 시뮬레이션 소프트웨어를 활용한 매개변수 최적화로 제약 및 화장품 응용 분야의 조직 공학 연구에 필수적인 데이터를 제공합니다.

다 잘 판에 대 한 시스템을 삽입 하는 결단 력과 침투성 막에 3 차원 조직 모델에서 보급의 시뮬레이션 하는 방법

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