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单缓步动物标本的超低输入基因组测序库制备
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Ultralow Input Genome Sequencing Library Preparation from a Single Tardigrade Specimen
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单缓步动物标本的超低输入基因组测序库制备
DOI:
10.3791/57615-v
•
10:28 min
•
July 15, 2018
•
Yuki Yoshida
2
,
Sayuri Konno
3
,
Ryousuke Nishino
3
,
Yumi Murai
3
,
Masaru Tomita
2,3
,
Kazuharu Arakawa
2,3
1
Institute for Advanced Biosciences
,
Keio University
,
2
Systems Biology Program, Graduate School of Media and Governance
,
Keio University
,
3
Faculty of Environment and Information Studies
,
Keio University
Chapters
00:00
Title
01:11
Sample preparation and contaminant exclusion
02:10
Homogenization and DNA extraction
04:41
Sequencing library construction
05:48
Purification of the PCR reaction
06:19
DNA quality check and quantification, and sequencing
07:43
Sequencing of the DNA library
08:02
Representative results
09:35
Closing remarks
Summary
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微生物基因组测序过程中的污染仍然是一个大问题。在这里, 我们展示了一种方法来序列的缓步动物的基因组从一个单一的样本, 只有 50 pg 的基因组 DNA 没有整个基因组的放大, 以减少污染的风险。
Tags
Tardigrade
Genome Sequencing
Single Specimen
Ultralow Input
Genomic DNA
Homogenization
Freeze-thaw
Pipette Crushing
Library Preparation
MiSeq Sequencing
Bacterial Contamination
Antibiotics
Agarose Gel
Microscopy
Lysis Buffer
DNA Extraction
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