Tracking microbiële verontreiniging in Retail Environments met fluorescerende poeder - Een Retail Delicatessen Milieu Voorbeeld

Het algemene doel van deze procedure is om het potentiële mechanisme van kruisbesmetting van de door voedsel overdraagbare pathogeen, listeria monocytogenes, aan te tonen in een detailhandelomgeving voor delicatessen. Dit wordt bereikt door eerst een fictieve delicatessenkeuken te ontwerpen om de detailhandelomgeving te simuleren.

In de tweede stap wordt het vlees geïnoculeerd met een fluorescerende verbinding, waarna vrijwilligers worden gevraagd om het gecoate vlees te snijden, te verpakken en in de koelkast te bewaren. In de laatste stap wordt de potentiële kruisbesmetting gevolgd door de fluorescerende verbinding onder zwart licht te observeren. Uiteindelijk kan spectrometrie worden gebruikt om de fluorescerende verbinding te kwantificeren, wat illustreert hoe kruisbesmetting optreedt in een retail-delicatessenomgeving.

Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van methoden die gebruikmaken van micro-organismen is dat de fluorescerende verbinding met deze techniek snel gekwantificeerd kan worden via spectrale fotometrie. Hoewel deze methode inzicht kan geven in de detailhandel, kan voedselveiligheid ook worden toegepast op andere systemen, zoals kleine boerderijen, voedselverwerkingsbedrijven en andere horecagelegenheden. Begin met het klaarleggen van schone handschoenen en 70% ethanol op de werkbank voor gebruik tijdens de procedure.

Gebruik vervolgens een schoon mes en een snijplank om het vleeswarenproduct in drie monsters van ongeveer 100 millimeter dik te snijden. Gebruik daarna een licht vochtige, schone spons om één monster gelijkmatig te bestrijken met vers bereid fluorescent poeder. Wikkel vervolgens alle monsters in vershoudfolie en gebruik plakband om het monster met het fluorescente poeder te labelen als a en de overige twee monsters als b en c.

Plaats de monsters vervolgens bij vier graden Celsius en installeer zwarte compacte fluorescentielampen met 13 watt lampen rondom het snijgedeelte. Snijd een stuk aluminiumfolie van vijf bij vijf centimeter om als sjabloon voor het afnemen van monsters te dienen en vul op dit moment ook 1315 milliliter buisjes met zes milliliters 95%ethanol. Installeer vervolgens drie videocamera's op strategische locaties om alle gebieden van de gesimuleerde delicatessenzaak tegelijkertijd te observeren.

Om de contaminatie van het vleeswarenproduct met fluorescent poeder te volgen, schakelt u de camera's in om de deelnemers tijdens de procedure te filmen en maakt u een foto van de gesimuleerde delicatessenzaak onder zwart fluorescent licht. Laat vervolgens elke deelnemer het volgende doen. Verwijder eerst het met A gelabelde vleesmonster uit de koelkast.

Pak vervolgens het vlees uit, bewaar de plastic folie en plaats het monster op de transportplaat van de snijmachine. Zet het monster vast met de vleesgreep, schakel daarna de snijmachine in en stel de indexknop van de snijmachine in op twee. Snijd vervolgens vijf plakjes vlees en leg deze op het delicatessenpapier, schakel daarna de stroom uit en laat de vleesgreep los.

Plaats de plakjes vlees in een plastic zak met het label A, en wikkel het vleesmonster vervolgens opnieuw in en leg het terug in de koelkast nadat monsters B en C zijn gesneden zoals zojuist gedemonstreerd, nadat er een foto van de nagebootste keuken is gemaakt. Om de contaminatie met fluorescent poeder te kwantificeren, plaatst u de steriele aluminiumfolie-sjabloon op elk in de afbeelding aangegeven gebied. Stryk vervolgens elk gebied af met een steriel calciumalginaat-wattenstaafje, gedrenkt in 95%Ethanol, en plaats één wattenstaafje in elk van de buisjes met 95%Ethanol.

Vortex elke buis grondig en breng de inhoud vervolgens over naar individuele glazen cuvetten. Meet de absorbentie van elk wattenstaafmonster bij 370 nanometer en gebruik vervolgens de formule om de hoeveelheid fluorescerend poeder te berekenen die van elk gebied is afgenomen. Bekijk tot slot de video om het aantal keren te kwantificeren dat de verschillende oppervlakken van de gesimuleerde huid zijn aangeraakt.

In dit representatieve experiment werden vrijwilligers gefilmd om de gemiddelde frequentie van handcontact op verschillende oppervlakken van de vleessnijmachine te analyseren tijdens het bereiden van de delicatessenschijfjes. Vervolgens analyseerden verschillende waarnemers de video en werd de frequentie van de handcontacten gemiddeld. De gegevens geven aan dat, zoals verwacht, de vleesgreep, het vleeswikkelpapier, het delicatessenvlees en het delicatessenpapier de hoogste percentages handcontact hadden, met een gemiddelde van acht tot 14 contacten per deelnemer.

Oppervlakken, zoals de koelkast, de greeptafel, de vleesgreep, het snijmes en diverse componenten van de slede, werden vervolgens afgenomen met swabs, waarna de hoeveelheid fluorescent poeder op de verschillende onderdelen van de snijmachine en de nagebootste keuken werd gekwantificeerd. Zoals zojuist aangetoond, verliep dit conform de verwachting. De resultaten gaven aan dat de hoogste contaminatieniveaus werden aangetroffen op de koelkast, de greep, de vleesgreep en de achterplaten.

Tijdens het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om te onthouden de videocamera's gelijktijdig in te schakelen om te garanderen dat de beelden gesynchroniseerd zijn. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van cruciale vragen op het gebied van voedselveiligheid, zoals de wijze waarop kruisbesmetting optreedt, en op basis van onze resultaten kunnen effectieve trainingsmethoden worden ontwikkeld.