Name: Een op fluorescentie gebaseerd protocol voor voorlopige screening van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Leer een fluorescentiegebaseerde methode voor het screenen van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen. Dit protocol ondersteunt medicinale chemie en drug discovery onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Merrick, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+regulation+of+eukaryotic+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanism and regulation of eukaryotic protein synthesis.</a> Microbiol Rev. 56, 291-315 (1992).</li>
<li>Ng, L., Navarro, A., Law, W. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Editorial%3A+evolving+roles+of+piRNAs+in+solid+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Editorial: evolving roles of piRNAs in solid tumors.</a> Front Oncol. 13, 1178634(2023).</li>
<li>Brown, J. M., Giaccia, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+unique+physiology+of+solid+tumors%3A+opportunities+%28and+problems%29+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The unique physiology of solid tumors: opportunities (and problems) for cancer therapy.</a> Cancer Res. 58 (7), 1408-1416 (1998).</li>
<li>Kovalski, J. R., Kuzuoglu-Ozturk, D., Ruggero, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+synthesis+control+in+cancer%3A+selectivity+and+therapeutic+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Protein synthesis control in cancer: selectivity and therapeutic targeting.</a> EMBO J. 41 (8), e109823(2022).</li>
<li>Liu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+silvestrol+analogues+as+potent+and+selective+protein+synthesis+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Synthetic silvestrol analogues as potent and selective protein synthesis inhibitors.</a> J Med Chem. 55 (20), 8859-8878 (2012).</li>
<li>Liu, L., Li, Z., Wu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harnessing+natural+inhibitors+of+protein+synthesis+for+cancer+therapy%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Harnessing natural inhibitors of protein synthesis for cancer therapy: a comprehensive review.</a> Pharmacol Res. 209, 107449(2024).</li>
<li>Dias, D. A., Urban, S., Roessner, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+historical+overview+of+natural+products+in+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolites%22%5BJournal%5D)">A historical overview of natural products in drug discovery.</a> Metabolites. 2 (2), 303-336 (2012).</li>
<li>Broach, J. R., Thorner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+screening+for+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">High-throughput screening for drug discovery.</a> Nature. 384 (6604 Suppl), 14-16 (1996).</li>
<li>Fang, X., Zheng, Y., Duan, Y., Liu, Y., Zhong, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+design+of+fluorescence-based+assays+for+high-throughput+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Recent advances in design of fluorescence-based assays for high-throughput screening.</a> Anal Chem. 91 (1), 482-504 (2019).</li>
<li>McKay, C. S., Finn, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Click+chemistry+in+complex+mixtures%3A+bioorthogonal+bioconjugation%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">Click chemistry in complex mixtures: bioorthogonal bioconjugation.</a> Chem Biol. 21 (9), 1075-1101 (2014).</li>
<li>Schneider-Poetsch, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+eukaryotic+translation+elongation+by+cycloheximide+and+lactimidomycin%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">Inhibition of eukaryotic translation elongation by cycloheximide and lactimidomycin.</a> Nat Chem Biol. 6 (3), 209-217 (2010).</li>
<li>Liu, J., Xu, Y., Stoleru, D., Salic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+protein+synthesis+in+cells+and+tissues+with+an+alkyne+analog+of+puromycin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Imaging protein synthesis in cells and tissues with an alkyne analog of puromycin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (2), 413-418 (2012).</li>
<li>Liu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+cell+lines+as+models+for+metastatic+breast+cancer+through+integrative+analysis+of+genomic+data%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Evaluating cell lines as models for metastatic breast cancer through integrative analysis of genomic data.</a> Nat Commun. 10, 2138(2019).</li>
<li>Ma, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dehydroabietylamine+exerts+antitumor+effects+by+affecting+nucleotide+metabolism+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Dehydroabietylamine exerts antitumor effects by affecting nucleotide metabolism in gastric cancer.</a> Carcinogenesis. 45 (10), 759-772 (2024).</li>
<li>Shinde, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+single-cell+adhesion+force+kinetics+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">A review of single-cell adhesion force kinetics and applications.</a> Cells. 10 (3), 577(2021).</li>
<li>Vargas-Accarino, E., Herrera-Montávez, C., Ramón y Cajal, s, Aasen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+cell+detachment+and+reattachment+in+cancer+cell+lines%3A+an+in+vitro+model+of+metastasis+and+malignancy%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spontaneous cell detachment and reattachment in cancer cell lines: an in vitro model of metastasis and malignancy.</a> Int J Mol Sci. 22 (9), 4929(2021).</li>
<li>Song, L., Hennink, E. J., Young, I. T., Tanke, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobleaching+kinetics+of+fluorescein+in+quantitative+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Photobleaching kinetics of fluorescein in quantitative fluorescence microscopy.</a> Biophys J. 68 (6), 2588-2600 (1995).</li>
<li>Ling, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dehydroabietylamine+derivatives+target+triple-negative+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Dehydroabietylamine derivatives target triple-negative breast cancer.</a> Eur J Med Chem. 102, 9-13 (2015).</li>
<li>Gautam, L. N., Ling, T., Lang, W., Rivas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-proliferative+evaluation+of+monoterpene+derivatives+against+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Anti-proliferative evaluation of monoterpene derivatives against leukemia.</a> Eur J Med Chem. 113, 75-80 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Agilent Biotek Cytation 1 Cell Imaging Multi-Mode Reader</td><td>Agilent&nbsp;</td><td>BTCYT1V</td><td></td></tr><tr><td>Compound 1 (Dehydroabietylamine, CAS 1446-61-3)</td><td>Enamine</td><td>EN300-7409771</td><td></td></tr><tr><td>Compound 2 (Bakuchiol, CAS 10309-37-2)</td><td>ChemFaces</td><td>CFN99047</td><td></td></tr><tr><td>Heraeus Megafuge 16R</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td>75004271</td><td></td></tr><tr><td>Ibidi Gmbh-slide 96-well plate</td><td>Ibidi</td><td>80826</td><td></td></tr><tr><td>MDA-MB-231 Cell Lines</td><td>ATCC</td><td>ATCC HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate Buffered Saline pH 7.4</td><td>ATCC</td><td>ATCC 30-2200</td><td></td></tr><tr><td>Protein Synthesis Assay Kit (Green)</td><td>Abcam</td><td>Ab239725</td><td></td></tr></tbody></table>

een op fluorescentie gebaseerd protocol voor voorlopige screening van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen

A Fluorescence-based Protocol for Preliminary Screening of Protein Synthesis Inhibitors from Natural Sources

Een op fluorescentie gebaseerd protocol voor voorlopige screening van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen

Natural products represent a rich source of therapeutic compounds with applications across multiple diseases, particularly cancer. By leveraging these ...

a-fluorescence-based-protocol-for-preliminary-screening-protein

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

In this video, we demonstrate the amplified luminescent proximity homogeneous assay—a bead-based proximity assay. It utilizes homogeneously-sized acceptor and donor beads, immobilized with two proteins that tend to interact to screen potential small molecules inhibiting protein interactions.

Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay: A Bead-Based Proximity Assay to Screen Small Molecules Inhibiting Protein-Protein Interactions

This video demonstrates the screening of immunomodulatory compounds via fluorescent-based assay. Transgenic mouse-derived T lymphocytes with green fluorescent protein expression cassettes are treated with these compounds. The enhanced and reduced GFP signals enable the identification of the compounds' stimulatory and inhibitory effects, respectively.

A Fluorescence-Based Assay Using Engineered Lymphocytes for Screening Immunomodulatory Compounds

Een gestroomlijnde benadering screening op de expressie van recombinant membraaneiwitten in Escherichia coli gebaseerd op fusie met groen fluorescent proteïne gepresenteerd.

Green Fluorescent Protein gebaseerd Expression Screening van membraaneiwitten in<em&gt; Escherichia coli</em

Een protocol voor screening van kleine moleculaire geneesmiddelen op basis van in-situ synthese van ultrakleine fluorescerende gouden nanoclusters (Au NC's) met behulp van een door geneesmiddelen geladen eiwit als sjabloon wordt gepresenteerd. Deze methode is eenvoudig om de bindingsaffiniteit van geneesmiddelen aan een doeleiwit te bepalen door een zichtbaar fluorescerend signaal dat wordt uitgezonden door de eiwit-gesjabloniseerde Au NC's.

Een snelle en kwantitatieve Fluorimetrische Methode voor-eiwit targeting Small Molecule drugscontrole

We presenteren in de huidige studie een nieuwe fluorescentie gebaseerde assay middels lymfocyten afkomstig van een transgene muis. Deze test is geschikt voor high-throughput screening (HTS) van kleine moleculen begiftigd met de hoedanigheid van het remmen of bevorderen van lymfocyt activering.

Een fluorescentie gebaseerde lymfocyt Assay geschikt voor high-throughput screening van kleine moleculen

Dit manuscript beschrijft een methode om te visualiseren en te kwantificeren van gelokaliseerde vertaling gebeurtenissen in subcellular compartimenten. De in dit manuscript voorgestelde benadering is vereist van een basissysteem voor confocal beeldvorming en reagentia en snelle en kostenefficiënte.

Kwantitatieve immunofluorescentie te meten Global gelokaliseerd vertaling

Een eenvoudig en flexibel Bouillon microdilution methode voor het screenen van antischimmel verbindingen en extracten.

Bouillon Microdilution In Vitro Screening: een gemakkelijke en snelle methode om te ontdekken van nieuwe antischimmel Compounds

Hier presenteren we de gedetailleerde procedure van een onlangs ontwikkelde protease assay platform met behulp van N-terminal hexahistidine/maltose-bindend-proteïne en fluorescente proteïne-gesmolten recombinante substraten gekoppeld aan het oppervlak van nikkel-nitrilotriacetic zure magnetische agarose kralen. Een latere in-gel-analyse van de monsters van de assay gescheiden door elektroforese van het gel van natrium dodecyl sulfaat-polyacrylamide is ook gepresenteerd.

Gebruik van recombinante Fusion eiwitten in een fluorescerende Protease Assay Platform en hun In-gel renaturatie

Het volgen van individuele vertaalgebeurtenissen maakt kinetische studies met hoge resolutie van cap-afhankelijke vertaalmechanismen mogelijk. Hier demonstreren we een in vitro single-molecule assay op basis van beeldvormende interacties tussen fluorescerend gelabelde antilichamen en epitoop-gelabelde ontluikende peptiden. Deze methode maakt single-molecule karakterisering van initiatie en peptide rekkinetiek mogelijk tijdens actieve in vitro cap-afhankelijke vertaling.

Een in vitro single-molecule imaging assay voor de analyse van cap-afhankelijke vertaalkinetiek

Het monitoren van veranderingen in de smelttemperatuur van een doeleiwit(d.w.z.thermische verschuivingstest, TSA) is een efficiënte methode voor het screenen van fragmentbibliotheken van een paar honderd verbindingen. We presenteren een TSA-protocol dat robotica-ondersteunde nano-Differential Scanning Fluorimetry (nano-DSF) implementeert voor het monitoren van intrinsieke tryptofaanfluorescentie en lichtverstrooiing voor fragmentscreening.

Nanodifferentiële scanningfluormetrie voor screening in fragmentgebaseerde looddetectie

Dit protocol beschrijft een biochemische test met gelverschuiving voor het meten van de activiteit van FEN1 (Flap Endonuclease 1) en de ontwikkeling van remmers.

Op fluorescentie gebaseerde detectie van FEN1-nuclease-activiteit en screening van kleinmoleculaire remmers

Leer een fluorescentiegebaseerde methode voor het screenen van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen. Dit protocol ondersteunt medicinale chemie en drug discovery onderzoek.

Een op fluorescentie gebaseerd protocol voor voorlopige screening van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen

Meer video's verkennen