Uzyskiwanie komórek pierwotnego raka jajnika z próbek litych: metoda hodowli komórek nabłonkowego raka jajnika z próbek guza jajnika

Komórki nabłonkowe obecne na zewnętrznej powierzchni jajnika mogą ulegać złośliwej transformacji w komórki rakowe, które mogą przekształcić się w guzy jajnika.

Aby wyizolować te nabłonkowe komórki raka jajnika lub EOC, zacznij od pobrania próbki guza jajnika i zmielenia jej na małe kawałki. Przenieść zmielone kawałki do probówki zawierającej bufor wytrawiający uzupełniony pożądanym enzymem proteazą.

Proteazy te degradują białka macierzy zewnątrzkomórkowej w tkance, uwalniając komórki EOC, erytrocyty i kilka zdysocjowanych fibroblastów do zawiesiny.

Przefiltruj zawiesinę komórek przez sitko, aby oddzielić zawieszone pojedyncze komórki od niezdysocjowanych kawałków tkanki. Odwirować zawiesinę w celu granulacji komórek EOC, erytrocytów i fibroblastów. Odrzucić supernatant zawierający enzym.

Zawiesić osad komórkowy w nabłonkowym pożywce wzrostowej i przenieść go do naczynia hodowlanego. Inkubuj kulturę, aby umożliwić komórkom EOC i fibroblastom przyczepienie się do podstawy szalki, podczas gdy erytrocyty unoszą się w pożywce.

Usuń zawieszone erytrocyty, odświeżając pożywkę. Z biegiem czasu pożywka ułatwia selektywny wzrost komórek EOC nad fibroblastami, tworząc monowarstwę komórek pier