Decelularyzacja kompleksu krążeniowo-oddechowego: technika decelularyzacji serca i płuc na podstawie modelu mysiego

Decelularyzacja pozbawia narządy ich składników komórkowych, pozostawiając nienaruszoną strukturę ECM. Pomaga to w zachowaniu architektury 3D narządów. W celu przeprowadzenia procedury decelularyzacji należy umieścić uśpioną mysz w pozycji leżącej. Wypreparuj mysz i odsłoń kompleks krążeniowo-oddechowy.

Podwiązywać wszystkie główne naczynia wychodzące z serca z wyjątkiem aorty i głównych naczyń krążenia płucnego. Ten krok zapobiega wyciekowi płynu podczas późniejszej procedury perfuzji. Utwórz otwór w tchawicy i wprowadź cewnik przez ten otwór. Cewnikować aortę zstępującą od dołu, aż cewnik dotrze do łuku aorty.

Zszyj cewniki, aby zabezpieczyć ich pozycję i podłącz je do pompy perfuzyjnej. Rozpocznij perfuzję wodą dejonizowaną. Perfuzja przez aortę umożliwia sprawne usunięcie krwi z całego naczynia krwionośnego serca. W końcu woda dostaje się do tętnicy płucnej prowadzącej do płuc.

Po całkowitym usunięciu krwi z układu naczyniowego płuc zatrzymaj perfuzję wody i zastąp ją różnymi roztworami detergentów, od łagodnych do silnych. Ta procedura powoduje lizę komórek uwalniających składniki wewnątrzkomórkowe, dzięki czemu serce i płuca wydają się przezroczyste.

Ponownie przetopić wodą d