Name: Przewlekłe zwężenie nerwu kulszowego i testy nadwrażliwości na ból u szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-03-13T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 23 s
Description: Poznaj model przewlekłego zwężenia nerwu kulszowego u szczurów do badania bólu neuropatycznego. Naucz się oceniać nadwrażliwość mechaniczną i termiczną za pomocą testów von Frey oraz płytowego analgezymetru.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy pragną podziękować za pierwotny opis modelu CCI opracowany przez Bennetta i Xie (1988). 
Praca ta była częściowo finansowana z grantów National Health and Medical Research Council of Australia (ID # 568637) oraz NSW Office for Science and Medical Research przyznanych GMT.

1. Przewlekłe uciskanie nerwu kulszowego
Podczas procedury chirurgicznej należy stosować techniki aseptyczne. Powierzchnię roboczą należy zdezynfekować 70% etanolem, a sterylne instrumenty (np. precyzyjne nożyczki, pęsetę i rozieracz), gazy, zszywki oraz tampony przygotować wcześniej w autoklawie. W przypadku przeprowadzania wielu zabiegów instrumenty należy czyścić i wysterylizować ponownie za pomocą 70% etanolu lub sterylizatora koralikowego pomiędzy kolejnymi szczurami. Należy nosić maseczkę chirurgiczną, czepek oraz sterylne rękawiczki.
W celu przeprowadzenia konstrikcji nerwu przygotować chromowaną nić jelitową, tnąc ją na małe kawałki o długości około 3 cm i zanurzając w sterylnym roztworze soli fizjologicznej, aby zapobiec ich wysychaniu. Do zamknięcia rany należy użyć dostępnych w handlu sterylnych nici jedwabnych.
<ol>
	<li>Zanurz szczura w komorze indukcyjnej z 5% izofluranem w O2, następnie podawaj 2% izofluran w O2 za pomocą specjalnie wykonanej maski twarzowej i monitoruj znieczulone zwierzę podczas procedury. Powszechnie stosowanymi alternatywnymi środkami znieczulającymi są wziewny halotan lub wewnątrzbrzusznopodawany pentobarbital sodu. Należy unikać ketaminy, będącej antagonistą receptorów N-metylo-D-asparaginianu (NMDA), ponieważ receptory te są istotne w rozwoju bólu neuropatycznego.</li>
	<li>Wygolić lewą tylną kończynę szczura. Następnie umieścić zwierzę na termoregulatorowanej macie grzewczej w temperaturze 37°C i nałożyć smarującą maść oftalmiczną na oczy.</li>
	<li>Zdezynfekować wygolony obszar, stosując naprzemiennie trzy aplikacje 70% alkoholu izopropylowego i roztworu jodu.</li>
	<li>Przy szczurze leżącym na klatce piersiowej unieść lewą tylną kończynę i utrzymać ją w pozycji z kością udową pod kątem 90° do kręgosłupa, mocując stopę taśmą maskującą.</li>
	<li>Wykonać nacięcie skóry równolegle, ale 3-4 mm poniżej kości udowej, a następnie oddzielić skórę od mięśni otaczających nacięcie poprzez przecięcie tkanki łącznej.</li>
	<li>Za pomocą tępych nożyczek przeciąć tkankę łączną między mięśniem pośladkowym powierzchownym a mięśniem dwugłowym uda.</li>
	<li>Użyć rozwieraka, aby poszerzyć szczelinę między dwoma mięśniami, co umożliwi wyraźną wizualizację nerwu kulszowego.</li>
	<li>Używając zakrzywionej pęsety z tępymi końcami i mikronożyczek, ostrożnie uwolnić około 10 mm nerwu kulszowego (proksymalnie od trifurkacji nerwu kulszowego) z otaczającej go tkanki łącznej.</li>
	<li>Pod mikroskopem i przy dobrym źródle światła zawiązać cztery ligatury (catgut chromowany 4.0, Ethicon, USA) podwójnym węzłem w odstępach 1 mm, proksymalnie od trifurkacji nerwu kulszowego. Dla każdej ligatury należy zacząć od pojedynczej luźnej pętli, następnie chwycić oba końce blisko pętli i zaciągnąć, aż pętla będzie ledwie dopasowana i ligatura nie będzie przesuwać się wzdłuż nerwu. Aby utrzymać pętlę w prawidłowej pozycji, nałożyć drugą pętlę na pierwszą w celu dokończenia węzła. Na koniec odciąć wolne końce ligatury do długości około 1 mm. Ucisk nerwu powinien być minimalny i natychmiast przerwany w przypadku zauważenia krótkiego drgnienia, aby zapobiec zatrzymaniu przepływu krwi epineuralnej. Zbyt mocne zaciśnięcie ligatur prowadzi do aksotomii i autotomii (samookaleczenia) — obu niepożądanych efektów ubocznych, które uniemożliwiają pomyślne testy nadwrażliwości bólowej.</li>
	<li>Użyć szwów (Mersilk 5.0, Ethicon) do zamknięcia warstwy mięśniowej i zszywek (Autoclip, 9 mm) do zapięcia skóry. Następnie zdezynfekować ranę roztworem jodu (Riodine).</li>
	<li>Uważnie obserwować szczura podczas okresu wybudzania z narkozy i pozwolić mu dojść do siebie w oddzielnej klatce z płaską papierową ściółką (nie standardową ściółką hodowlaną), aby zapobiec zadławieniu się nieprzytomnego zwierzęcia. 
	Przed podaniem jakiejkolwiek przeciwbólowej terapii pooperacyjnej badacze powinni wziąć pod uwagę fakt, że może ona zakłócić testy nadwrażliwości bólowej. Istnieją dowody na to, że miejscowe zastosowanie znieczulenia, lidokainy, w momencie urazu może zmienić rozwój bólu neuropatycznego i zmniejszyć stopień hiperalgezji w kolejnych tygodniach7. Dalszą dyskusję na ten temat można znaleźć w przeglądzie autorstwa Bennett et al8.</li>
</ol>
2. Pomiary zachowań bólowych
<ol>
	<li>Zaleca się codzienne obchodzenie się ze szczurami przez kilka dni przed rozpoczęciem eksperymentu, aby przyzwyczaić zwierzęta do opiekuna, zredukować stres oraz ryzyko ugryzień.</li>
	<li>Przed testami behawioralnymi szczury muszą zostać poddane habituacji do procedury testowej oraz klatki badawczej. Środowisko testowe powinno być ciche i dobrze kontrolowane, z zachowaniem stałej temperatury i wilgotności, a każda sesja testowa powinna odbywać się o podobnej porze dnia.</li>
	<li>Testy nadwrażliwości na ból należy przeprowadzić kilkukrotnie przed CCI (poziom bazowy) oraz w różnych punktach czasowych po CCI, zależnie od potrzeb.</li>
</ol>
3. Mechaniczny próg wycofania
<ol>
	<li>W dniu testowania umieść szczury w klatce testowej z podwyższoną siatkową podłogą na 15-30 minut przed pomiarem progów wycofania, aby umożliwić zaprzestanie eksploracji klatki i pielęgnacji oraz aby szczury mogły się zrelaksować i unieruchomić.</li>
	<li>Używając dynamicznego estezjometru von Frey do badania powierzchni podeszwowych (Ugo Basile, Włochy), ustaw jednostkę stymulatora dotykowego z filamentem bezpośrednio pod środkową powierzchnią podeszwową tylnej łapy, unikając kontaktu z metalową siatką, a następnie naciśnij klawisz start. Spowoduje to uniesienie filamentu w celu mechanicznej stymulacji powierzchni podeszwowej tylnej łapy z rosnącą siłą.</li>
</ol>
Ręczne włókna von Frey to seria filamentów o rosnącej średnicy, które są skalibrowane tak, aby wywierać określoną siłę podczas przykładania do skóry. Mogą one służyć jako alternatywa dla elektronicznego dynamicznego plantarnego estezjometru von Frey do pomiaru progu wycofania łapy, jak opisano wcześniej4. Istnieje również kilku alternatywnych producentów elektronicznych estezjometrów von Frey (np. IITC, USA i Somedic, Szwecja).
<ol start="3">
	<li>Zarejestruj próg wycofania mechanicznego dla obu tylnych łap, uszkodzonej i nieuszkodzonej, w kolejności zbalansowanej. Urządzenie to wywiera nacisk na łapę, a w momencie wystąpienia reakcji wycofania system automatycznie rejestruje i wyświetla maksymalną przyłożoną siłę (w gramach). W przypadku wystąpienia niejednoznacznej odpowiedzi (np. podczas poruszania się lub pielęgnacji), powtórz stymulację i ponownie zarejestruj próg. Lizanie lub potrząsanie tylną łapą po stymulacji jest oznaką zachowania związanego z bólem.</li>
	<li>Powtórz stymulację mechaniczną 3 razy w odstępach około 5 min między bodźcami, zarejestruj progi, a następnie oblicz średnią wartość progów wycofania łapy.</li>
</ol>
4. Latencja wycofania termicznego
Intensywność promieniowania cieplnego podczerwieni (I.R.) w urządzeniu do testu podeszwy powinna zostać dostosowana przed rozpoczęciem eksperymentu. W naszym laboratorium dostosowujemy intensywność I.R. tak, aby średni czas utraty odruchu wycofania łapy u szczurów naiwnych wynosił około 10 sekund, a maksymalny czas odcięcia (cut-off latency) ustawiamy na 20 sekund, aby uniknąć uszkodzenia tkanek w przypadku braku wycofania łapy.
<ol>
	<li>W dniu testu umieść szczury w klatce testowej z szklanym dnem na 15-30 minut przed pomiarem latencji, aby umożliwić im zaprzestanie eksploracji klatki i toalety oraz doprowadzić do stanu odprężenia i bezruchu zwierząt.</li>
	<li>Używając urządzenia do pomiaru analgezji podeszwowej (Ugo Basile, Włochy), ustaw źródło podczerwieni bezpośrednio pod powierzchnią środkową podeszwy tylnej łapy i naciśnij klawisz start. Powoduje to wystawienie powierzchni podeszwowej tylnej łapy na wiązkę promieniowania cieplnego poprzez przezroczystą szklaną powierzchnię. Istnieją również alternatywni producenci urządzeń do pomiaru analgezji podeszwowej (np. IITC, USA oraz Stoelting, USA).</li>
	<li>Zapisz latencję cofnięcia łapy zarówno dla uszkodzonej, jak i nieuszkodzonej tylnej łapy, zachowując zrównoważoną kolejność. Urządzenie to automatycznie rejestruje czas (w sekundach) od momentu rozpoczęcia bodźca termicznego do cofnięcia łapy ze źródła ciepła. W przypadku wystąpienia niejednoznacznej reakcji (np. w przypadku przemieszczania się lub toalety), powtórz bodziec i ponownie zapisz latencję. Lizanie lub potrząsanie tylną łapą po stymulacji jest oznaką zachowania związanego z bólem.</li>
	<li>Powtórz stymulację cieplną co najmniej 3 razy w odstępach około 5 min między bodźcami, zapisz latencje, a następnie oblicz średnią latencji cofnięcia łapy.</li>
</ol>
4. Reprezentatywne wyniki
Przykład progu wycofania mechanicznego i latencji wycofania termicznego w łapach ipsilateralnej (uszkodzonej) i kontralateralnej (nieuszkodzonej) szczurów Wistar pokazano przed zabiegiem (poziom bazowy) oraz od 2 do 12 dni po CCI na Rysunku 3A i Rysunku 3B. Z tych rycin wynika, że CCI powoduje znaczną redukcję zarówno progów wycofania mechanicznego, jak i latencji wycofania termicznego w ipsilateralnej tylnej łapie, co wskazuje na występowanie mechanicznej i termicznej nadwrażliwości bólowej, będących cechami przewlekłego bólu neuropatycznego.
<img alt="Schemat przewlekłego uszkodzenia uciskowego; podwiązania nerwu kulszowego; przekrój poprzeczny rdzenia kręgowego; droga z zwojów rdzeniowych (DRG)." src="/files/ftp_upload/3393/3393fig1.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1. Schemat ilustrujący rozmieszczenie podwiązań w modelu CCI. Ten zwierzęcy model bólu neuropatycznego polega na założeniu czterech luźnych podwiązań z chromionego jelita na nerw kulszowy na poziomie połowy uda. Powoduje to uszkodzenie tylko części włókien doprowadzających do stopy i w konsekwencji nadwrażliwość bólową tylnej łapy.
<img alt="Schemat anatomiczny struktury skrzydła nietoperza; sekcje boczna i przyśrodkowa z zaznaczonym obszarem." src="/files/ftp_upload/3393/3393fig2.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2. Schemat obszaru tylnej łapy wykorzystywanego do testów bólowych. Do testowania bólu wykorzystuje się środkową powierzchnię podeszwy, tuż za opuszkami stopy, wskazaną czerwonym przerywanym okręgiem. Obszar ten jest unerwiony głównie przez gałęzie końcowe nerwu kulszowego. Należy unikać pięty i opuszek stopy ze względu na różnice w czułości skóry.
<img alt="Reakcja bólowa po operacji; wykresy liniowe przedstawiające próg i latencję wycofania łapy; metoda CCI." src="/files/ftp_upload/3393/3393fig3.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3. Nadwrażliwość bólowa po przewlekłej konstrikcji nerwu kulszowego u szczurów. Po zastosowaniu CCI obserwuje się istotne obniżenie progu wycofania łapy w odpowiedzi na bodźce mechaniczne (A) oraz latencji wycofania łapy w odpowiedzi na bodźce termiczne (B) w uszkodzonej (ipsilateralnej) tylnej łapie w porównaniu z nieuszkodzoną (kontralateralną) tylną łapą (P&lt;0.01, dwuczynnikowa ANOVA z powtarzanymi pomiarami). Dane przedstawiają średnią ± s.e.m, n=7 szczurów rasy Wistar.

<ol><li>Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+chronic+pain+with+neuropathic+characteristics+in+the+general+population%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population.</a> Pain. 136, 380-387 (2008).</li>
<li>Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+and+impact+of+chronic+pain+with+neuropathic+pain+symptoms+in+the+general+population%5BTitle%5D)+AND+%22Pain+Med%22%5BJournal%5D)">The prevalence and impact of chronic pain with neuropathic pain symptoms in the general population.</a> Pain Med. 10, 918-929 (2009).</li>
<li>Bennett, G. J., Xie, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+peripheral+mononeuropathy+in+rat+that+produces+disorders+of+pain+sensation+like+those+seen+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man.</a> Pain. 33, 87-107 (1988).</li>
<li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> J. Neurosci. Methods. 53, 55-63 (1994).</li>
<li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32, 77-88 (1988).</li>
<li>Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+foot+withdrawal+response+to+noxious+radiant+heat+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat.</a> Pain. 59, 85-94 (1994).</li>
<li>Dougherty, P. M., Garrison, C. J., Carlton, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+influence+of+local+anesthetic+upon+two+models+of+experimentally+induced+peripheral+mononeuropathy+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Differential influence of local anesthetic upon two models of experimentally induced peripheral mononeuropathy in the rat.</a> Brain Research. 570, 109-115 (1992).</li>
<li>Bennett, G. J., Chung, J. M., Honore, M., Seltzer, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+neuropathic+pain+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Models of neuropathic pain in the rat.</a> Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, (2003).</li>
<li>Attal, N., Jazat, F., Kayser, V., Guilbaud, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+evidence+for+%27pain-related%27+behaviours+in+a+model+of+unilateral+peripheral+mononeuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Further evidence for 'pain-related' behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy.</a> Pain. 41, 235-251 (1990).</li>
<li>Hu, B., Doods, H., Treede, R. -D., Ceci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression-like+behaviour+in+rats+with+mononeuropathy+is+reduced+by+the+CB2-selective+agonist+GW405833%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Depression-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the CB2-selective agonist GW405833.</a> Pain. 143, 206-212 (2009).</li>
<li>Jesse, C., Wilhelm, E., Nogueira, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression-like+behavior+and+mechanical+allodynia+are+reduced+by+bis+selenide+treatment+in+mice+with+chronic+constriction+injury%3A+a+comparison+with+fluoxetine%2C+amitriptyline%2C+and+bupropion%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Depression-like behavior and mechanical allodynia are reduced by bis selenide treatment in mice with chronic constriction injury: a comparison with fluoxetine, amitriptyline, and bupropion.</a> Psychopharmacology. 212, 513-522 (2010).</li>
<li>Monassi, C. R., Bandler, R., Keay, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+subpopulation+of+rats+show+social+and+sleep-waking+changes+typical+of+chronic+neuropathic+pain+following+peripheral+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A subpopulation of rats show social and sleep-waking changes typical of chronic neuropathic pain following peripheral nerve injury.</a> Eur. J. Neurosci. 17, 1907-1920 (2003).</li>
<li>Roeska, K., Doods, H., Arndt, K., Treede, R. D., Ceci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anxiety-like+behaviour+in+rats+with+mononeuropathy+is+reduced+by+the+analgesic+drugs+morphine+and+gabapentin%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Anxiety-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the analgesic drugs morphine and gabapentin.</a> Pain. 139, 349-357 (2008).</li>
<li>Kontinen, V. K., Kauppila, T., Paananen, S., Pertovaara, A., Kalso, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+measures+of+depression+and+anxiety+in+rats+with+spinal+nerve+ligation-induced+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Behavioural measures of depression and anxiety in rats with spinal nerve ligation-induced neuropathy.</a> Pain. 80, 341-346 (1999).</li>
<li>Urban, R., Scherrer, G., Goulding, E. H., Tecott, L. H., Basbaum, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+indices+of+ongoing+pain+are+largely+unchanged+in+male+mice+with+tissue+or+nerve+injury-induced+mechanical+hypersensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Behavioral indices of ongoing pain are largely unchanged in male mice with tissue or nerve injury-induced mechanical hypersensitivity.</a> Pain. 152, 990-1000 (2011).</li>
<li>Myers, R. R., Yamamoto, T., Yaksh, T. L., Powell, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+focal+nerve+ischemia+and+Wallerian+degeneration+in+peripheral+nerve+injury+producing+hyperesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">The role of focal nerve ischemia and Wallerian degeneration in peripheral nerve injury producing hyperesthesia.</a> Anesthesiology. 78, 308-316 (1993).</li>
<li>Grace, P. M., Hutchinson, M. R., Manavis, J., Somogyi, A. A., Rolan, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+animal+model+of+graded+neuropathic+pain%3A+utility+to+investigate+mechanisms+of+population+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel animal model of graded neuropathic pain: utility to investigate mechanisms of population heterogeneity.</a> J. Neurosci. Methods. 193, 47-53 (2010).</li>
<li>Kajander, K. C., Pollock, C. H., Berg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+hindpaw+position+in+rats+during+chronic+constriction+injury+%28CCI%29+produced+with+different+suture+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Somatosens+Mot.+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of hindpaw position in rats during chronic constriction injury (CCI) produced with different suture materials.</a> Somatosens Mot. Res. 13, 95-101 (1996).</li>
<li>Xu, J., Pollock, C. H., Kajander, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromic+gut+suture+reduces+calcitonin-gene-related+peptide+and+substance+P+levels+in+the+spinal+cord+following+chronic+constriction+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Chromic gut suture reduces calcitonin-gene-related peptide and substance P levels in the spinal cord following chronic constriction injury in the rat.</a> Pain. 64, 503-509 (1996).</li>
<li>Sommer, C., Schafers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Painful+mononeuropathy+in+C57BL%2FWld+mice+with+delayed+wallerian+degeneration%3A+differential+effects+of+cytokine+production+and+nerve+regeneration+on+thermal+and+mechanical+hypersensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Painful mononeuropathy in C57BL/Wld mice with delayed wallerian degeneration: differential effects of cytokine production and nerve regeneration on thermal and mechanical hypersensitivity.</a> Brain. Res. 784, 154-162 (1998).</li>
<li>Walczak, J. S., Beaulieu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+three+models+of+neuropathic+pain+in+mice+using+a+new+method+to+assess+cold+allodynia%3A+the+double+plate+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Lett%22%5BJournal%5D)">Comparison of three models of neuropathic pain in mice using a new method to assess cold allodynia: the double plate technique.</a> Neurosci. Lett. 399, 240-244 (2006).</li>
<li>Maves, T. J., Pechman, P. S., Gebhart, G. F., Meller, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possible+chemical+contribution+from+chromic+gut+sutures+produces+disorders+of+pain+sensation+like+those+seen+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Possible chemical contribution from chromic gut sutures produces disorders of pain sensation like those seen in man.</a> Pain. 54, 57-69 (1993).</li>
<li>Tall, J. M., Stuesse, S. L., Cruce, W. L., Crisp, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+and+the+behavioral+manifestations+of+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Gender and the behavioral manifestations of neuropathic pain.</a> Pharmacol Biochem. Behav. 68, 99-104 (2001).</li>
<li>Chung, J. M., Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+age+on+behavioral+signs+of+neuropathic+pain+in+an+experimental+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of age on behavioral signs of neuropathic pain in an experimental rat model.</a> Neurosci. Lett. 183, 54-57 (1995).</li>
<li>Tanck, E. N., Kroin, J. S., McCarthy, R. J., Penn, R. D., Ivankovich, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+age+and+size+on+development+of+allodynia+in+a+chronic+pain+model+produced+by+sciatic+nerve+ligation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Effects of age and size on development of allodynia in a chronic pain model produced by sciatic nerve ligation in rats.</a> Pain. 51, 313-316 (1992).</li>
<li>Shir, Y., Sheth, R., Campbell, J. N., Raja, S. N., Seltzer, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soy-containing+diet+suppresses+chronic+neuropathic+sensory+disorders+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth.+Analg%22%5BJournal%5D)">Soy-containing diet suppresses chronic neuropathic sensory disorders in rats.</a> Anesth. Analg. 92, 1029-1034 (2001).</li>
<li>Yoon, Y. W., Lee, D. H., Lee, B. H., Chung, K., Chung, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+strains+and+substrains+of+rats+show+different+levels+of+neuropathic+pain+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Different strains and substrains of rats show different levels of neuropathic pain behaviors.</a> Experimental Brain Research. 129, 167-171 (1999).</li>
<li>Mogil, J. S., Davis, K. D., Derbyshire, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+necessity+of+animal+models+in+pain+research%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">The necessity of animal models in pain research.</a> Pain. 151, 12-17 (2010).</li>
<li>Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+pain%3A+progress+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of pain: progress and challenges.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).</li>
<li>Langford, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nat. Methods. 7, 447-449 (2010).</li>
<li>Austin, P. J., Moalem-Taylor, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuro-immune+balance+in+neuropathic+pain%3A+involvement+of+inflammatory+immune+cells%2C+immune-like+glial+cells+and+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neuroimmunol%22%5BJournal%5D)">The neuro-immune balance in neuropathic pain: involvement of inflammatory immune cells, immune-like glial cells and cytokines.</a> J. Neuroimmunol. 229, 26-50 (2010).</li>
</ol>

Doświadczenia na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komisję ds. Opieki i Etyki Zwierząt Uniwersytetu Nowej Południowej Walii w Australii i przeprowadzono je zgodnie z wytycznymi wydanymi przez Międzynarodowe Stowarzyszenie Badania Bólu (International Association for the Study of Pain).

CCI jest powszechnie stosowanym modelem uszkodzenia nerwu obwodowego w badaniach nad chronicznym bólem neuropatycznym. Jest on stosunkowo prosty w wykonaniu i wywołuje silną oraz stabilną nadwrażliwość bólową utrzymującą się przez co najmniej miesiąc po urazie. Po zastosowaniu CCI u szczurów obserwuje się nieprawidłową postawę uszkodzonej tylnej łapy (palce złączone i zgięte podeszwowo, a stopa wywinięta na zewnątrz), a także powtarzające się potrząsanie, osłanianie i lizanie uszkodzonej łapy, co sugeruje występowanie bó...

<table><tbody><tr><td>Nici z jelit owczych chromowane</td><td>Ethicon Inc.</td><td>G-211</td><td>grubość 4-0</td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Mersilk</td><td>Ethicon Inc.</td><td>W-580</td><td>grubość 5-0</td></tr><tr><td>Autoclip</td><td>BD Biosciences</td><td>427631</td><td>9 mm stal nierdzewna</td></tr><tr><td>Riodine</td><td>Orion</td><td>R1000802F</td><td>1% w/v jod</td></tr><tr><td>Urządzenie do termicznej analizji bólu podeszwowego</td><td>Ugo Basile</td><td>37370</td><td></td></tr><tr><td>Dynamiczny estezjometr podeszwowy</td><td>Ugo Basile</td><td>37400</td><td></td></tr></tbody></table>

przewlekłe uciskowe uszkodzenie nerwu kulszowego i badanie nadwrażliwości bólowej u szczurów

Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Przewlekły ból neuropatyczny, wynikający z uszkodzenia ośrodkowego lub obwodowego układu nerwowego, jest powszechnym i wyniszczającym schorzeniem, dotykającym 7-18% populacji1,2. Objawy obejmują ból spontaniczny (mrowienie, pieczenie, uczucie porażenia prądem), dysestezję, parestezję, allodynię (ból wywołany bodźcami, które normalnie nie są bolesne) oraz hiperalgezję (zwiększoną reakcję na bodźce bólowe). Objawom sensorycznym towarzyszą zaburzenia behawioralne, takie jak bezsenność i depresja. W celu badania przewlekłego bólu neuropatycznego opracowano kilka modeli zwierzęcych naśladujących uszkodzenie nerwów obwodowych; jednym z najszerzej stosowanych jest model jednostronnego przewlekłego ucisku nerwu kulszowego (CCI) według Bennetta i Xie (1988)3 (Rysunek 1). W niniejszej pracy przedstawiamy metodę przeprowadzania procedury CCI oraz testowania nadwrażliwości bólowej.
CCI przeprowadza się w znieczuleniu, odsłaniając nerw kulszowy po jednej stronie poprzez wykonanie nacięcia skóry i przecięcie tkanki łącznej między mięśniem pośladkowym powierzchownym a mięśniem dwugłowym uda. Cztery ligatury z katgutu chromowego zawiązuje się luźno wokół nerwu kulszowego w odstępach 1 mm, tak aby jedynie ograniczyć, a nie całkowicie zatrzymać przepływ krwi w ośnie powłokowej. Ranę zamyka się szwami w mięśniach i zszywkami w skórze. Następnie zwierzę regeneruje się po operacji przez 24 hrs przed rozpoczęciem testów nadwrażliwości na ból.
W celu przeprowadzenia testów behawioralnych szczury są umieszczane w aparaturze badawczej, gdzie mogą przyzwyczaić się do procedury testowej. Badanym obszarem jest środkowa powierzchnia podeszwowa tylnej łapy (Rycyna 2), która znajduje się w obszarze unerwienia nerwu kulszowego. Próg wycofania mechanicznego ocenia się poprzez mechaniczną stymulację obu tylnych łap (zarówno uszkodzonej, jak i nieuszkodzonej), wykorzystując elektroniczny dynamiczny anestezjometr von Frey do pomiaru czucia podeszwowego lub manualne włókna von Frey4. Próg wycofania mechanicznego to maksymalny nacisk (wyrażony w gramach), który wywołuje cofnięcie łapy. W celu pomiaru czasu reakcji termicznej (latencji wycofania), po raz pierwszy opisanego przez Hargreaves et al (1988), tylna łapa jest wystawiona na wiązkę promieniowania cieplnego przez przezroczystą powierzchnię szklaną przy użyciu miernika analgezji podeszwowej5,6. Czas reakcji na bodziec cieplny jest rejestrowany jako czas wycofania łapy w obu tylnych łapach (uszkodzonej i nieuszkodzonej). Po przeprowadzeniu CCI zarówno próg wycofania mechanicznego, jak i czas reakcji termicznej w uszkodzonej łapie są istotnie obniżone w porównaniu z pomiarami bazowymi oraz łapą nieuszkodzoną (Rycina 3). Model CCI uszkodzenia nerwów obwodowych w połączeniu z testami nadwrażliwości bólowej stanowi system modelowy do badania skuteczności potencjalnych środków terapeutycznych w modyfikacji przewlekłego bólu neuropatycznego. W naszym laboratorium wykorzystujemy CCI wraz z oceną wrażliwości termicznej i mechanicznej tylnych łap do badania roli oddziaływań neuroimmunologicznych w patogenezie i leczeniu bólu neuropatycznego.

Ze względu na prostotę zabiegu chirurgicznego oraz wyraźne efekty behawioralne, przewlekłe uciskowe uszkodzenie nerwu kulszowego jest jednym z najważniejszych modeli zwierzęcych bólu neuropatycznego. W ciągu 24 h po operacji rozwija się nadwrażliwość bólowa, którą można zmierzyć ilościowo za pomocą estezjometru von Freya (test mechaniczny) oraz urządzenia do pomiaru analgesii podeszwowej (test termiczny).

Przewlekłe uciskowe uszkodzenie nerwu kulszowego i badanie nadwrażliwości bólowej u szczurów

Przewlekły ból neuropatyczny, wynikający z uszkodzenia ośrodkowego lub obwodowego układu nerwowego, jest powszechną i wyniszczającą dolegliwością, która dotyka 7-18% ...

Ogólnym celem tej procedury jest przeprowadzenie przewlekłego uciśnięcia (chronic constriction injury) nerwu kulszowego, będącego powszechnie stosowanym modelem bólu neuropatycznego u gryzoni, oraz ilościowy pomiar wynikających z tego zachowań bólowych. Jest to realizowane poprzez najpierw nałożenie czterech ligatur z nici jelitowej chromowej wokół odsłoniętego nerwu kulszowego na poziomie połowy uda, aby wywołać uraz uciskowy nerwu kulszowego. Następnie monitoruje się zachowania bólowe w tylnej łapie w wybranych punktach czasowych, ilościowo mierząc próg wycofania łapy w odpowiedzi na bodziec mechaniczny przy użyciu włókien von Frey oraz latencję wycofania łapy w odpowiedzi na bodziec termiczny przy użyciu plantarnego miernika analgesji.W rezultacie można uzyskać dane wykazujące istnienie bólu mechanicznego i termicznego oraz nadwrażliwość uszkodzonej tylnej łapy poprzez pomiar wywołanych reakcji wycofania w odpowiedzi na bodźce mechaniczne i termiczne. Ta metoda uszkodzenia nerwów obwodowych, opracowana pierwotnie przez bene i Z, może pomóc w udzieleniu odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie przewlekłego bólu, takie jak obwodowe i centralne mechanizmy generowania bólu neuropatycznego. Zastosowania tej techniki rozciągają się na terapię bólu neuropatycznego, ponieważ model ten stanowi podstawę do badania nowych strategii redukcji nadwrażliwości bólowej.Zazwyczaj osoby rozpoczynające pracę z tą metodą napotykają trudności, ponieważ założenie szwów jelitowych cmic wokół nieruchomego nerwu oraz uzyskanie odpowiedniego stopnia zaciśnięcia, aby wywołać wystarczający, lecz nie nadmierny uraz nerwu, jest szczególnie wymagające. Aby rozpocząć tę procedurę, należy zdezynfekować powierzchnię roboczą 70% ethanol i przygotować sterylne narzędzia, gazę, zszywki oraz tampony, które zostały wcześniej wysterylizowane w autoklawie. Następnie należy znieczulić szczura w komorze indukcyjnej, stosując 5% ISO fluorine.Podczas operacji podawaj zwierzęciu 2% ISO fluoranu za pomocą specjalnie wykonanej maski twarzowej. Następnie zgol skórę na lewej tylnej kończynie szczura, a potem umieść zwierzę na matach grzewczych z termoregulacją w temperaturze 37 °C. Na oczy nanieś smarującą maść oftalmiczną.Następnie przygotuj chromową nić jelitową, tnąc ją na małe kawałki o długości około trzech centymetrów i zanurzając je w sterylnej soli fizjologicznej. Dalej, zdezynfekuj ogoloną okolicę, stosując naprzemiennie trzy aplikacje alkoholu i roztworu jodu. Układając zwierzę na klatce piersiowej, unieś jego lewą tylną kończynę i utrzymaj kość udową pod kątem 90 stopni względem kręgosłupa, mocując stopę za pomocą taśmy maskującej.Następnie wykonaj nacięcie skóry około trzech do czterech milimetrów poniżej kości udowej. Oddziel skórę od mięśni otaczających nacięcie, przecinając tkankę łączną. Używając tępych nożyczek, przetnij tkankę łączną pomiędzy mięśniem pośladkowym powierzchownym (gluteus superficialis) a mięśniem dwugłowym uda (biceps fems).Następnie za pomocą retraktora poszerzyć szczelinę między dwoma mięśniami, aby umożliwić wyraźną wizualizację nerwu kulszowego, a następnie użyć pęsety i mikronożyczek, aby delikatnie uwolnić około 10 milimetrów nerwu kulszowego z otaczającej go tkanki łącznej. Związać pierwszą ligaturę proksymalnie względem trifurkacji nerwu kulszowego dla każdej ligatury. Rozpocząć od pojedynczej luźnej pętli.Następnie chwyć oba końce blisko pętli i pociągnij, aż pętla będzie przylegać ściśle, a więzadło przestanie przesuwać się wzdłuż nerwu. Następnie przytrzymaj pętlę w odpowiedniej pozycji i nałóż drugą pętlę na pierwszą, aby dokończyć węzeł. Następnie odetnij wolne końce więzadła tak, aby okrągłe zwężenie nerwu o szerokości jednego milimetra było minimalne.Powtórz kroki dla pozostałych trzech podwiązań, zawiązując każde kolejne podwiązanie o jeden milimetr bardziej proksymalnie niż poprzednie. Po zakończeniu operacji, przy minimalnym ucisku, użyj szwów do zamknięcia warstwy mięśniowej oraz zszywek do zamknięcia skóry. Następnie użyj roztworu jodu, aby wysterylizować ranę.W okresie wybudzania z narkozy należy uważnie obserwować zwierzę i pozwolić mu na regenerację w osobnej klatce z płaską ściółką papierową. Przed rozpoczęciem eksperymentu należy przez kilka dni codziennie utrzymywać kontakt z zwierzęciem.Następnie, przed testami behawioralnymi, poddaj szczura habituacji w klatce. Środowisko testowe powinno być ciche i dobrze kontrolowane pod kątem stałej temperatury i wilgotności, a każda sesja testowa powinna być przeprowadzana o podobnej porze dnia. Aby zbadać próg wycofania mechanicznego w dniu testu, umieść szczura w klatce testowej z podwyższoną siatkowaną podłogą od 15 do 30 minut przed eksperymentem; używając dynamicznego urządzenia von Frey do badania odruchu plantarnego, ustaw stymulator dotyku z włóknem bezpośrednio pod środkową powierzchnią podeszczową tylnej łapy i naciśnij klawisz start.Operacja ta unosi filament, aby mechanicznie stymulować powierzchnię podeszczową tylnej łapy z rosnącą siłą. Następnie należy zarejestrować próg wycofania mechanicznego dla obu tylnych łap – uszkodzonej i nieuszkodzonej. Urządzenie to automatycznie rejestruje i wyświetla maksymalną siłę przyłożoną w momencie wystąpienia reakcji wycofania.Powtórz stymulację mechaniczną trzykrotnie w odstępach około pięciu minut między próbami, badając nieuszkodzone tylne łapy w kolejności zrównoważonej, a następnie oblicz średnią wartości progów wycofania łapy. Aby zbadać czas utajenia odruchów cieplnych w dniu testu, umieść szczura w klatce testowej z szklaną podłogą na 15 do 30 minut przed eksperymentem. Korzystając z urządzenia do badania analgezji podeszwowej w teście termicznym, ustaw źródło podczerwieni bezpośrednio pod środkową częścią podeszwy tylnej łapy i naciśnij przycisk start.Pozwala to na wystawienie powierzchni podeszwowej tylnej łapy na działanie wiązki ciepła promieniującego przez przezroczystą szklaną powierzchnię. Następnie należy zarejestrować czas utajenia wycofania obu tylnych łap, zarówno tych uszkodzonych, jak i nieuszkodzonych. Urządzenie to automatycznie rejestruje czas od momentu rozpoczęcia bodźca termicznego do wycofania łapy ze źródła ciepła.Powtórz stymulację cieplną co najmniej trzy razy w odstępach około pięciu minut między bodźcami, badając uszkodzone i nieuszkodzone tylne łapy w kolejności zrównoważonej, a następnie oblicz średnią czasu latencji wycofania łapy. Przedstawiono tutaj mechaniczny próg wycofania w obu łapach, uszkodzonej i nieuszkodzonej, u szczurów szczepu Wistar przed oraz do 12 dni po chronicznej konstrikcji nerwu kulszowego. Obserwuje się istotne obniżenie progu wycofania łapy w odpowiedzi na bodźce mechaniczne w uszkodzonej tylnej łapie po stronie ipsilateralnej w porównaniu z nieuszkodzoną tylną łapą po stronie kontralateralnej. Przedstawiono tutaj czas latencji wycofania termicznego w obu łapach, uszkodzonej i nieuszkodzonej, przed oraz do 12 dni po chronicznej konstrikcji nerwu kulszowego.Podobnie, czas utajenia odruchu wycofania termicznego jest znacznie skrócony w uszkodzonej kończynie tylnej po stronie ipsilateralnej w porównaniu z nieuszkodzoną kończyną tylną po stronie kontralateralnej. Po opanowaniu techniki operacja CCI może być prawidłowo wykonana w czasie zaledwie 20 minut na zwierzę, co prowadzi do długotrwałej nadwrażliwości bólowej kończyny tylnej. Podczas wykonywania tej procedury należy pamiętać o luźnym wiązaniu ligaturek, ponieważ to samo zaciskanie się pod wiązaniami w wyniku obrzęku powoduje późniejszą konstrikcję.Ta technika uszkodzenia nerwu obwodowego w połączeniu z badaniem fali P nadwrażliwości bólowej pozwala badaczom z dziedziny bólu neuropatycznego na eksplorację mechanizmów leżących u podstaw chronicznego bólu spowodowanego uszkodzeniem nerwu.

chronic-constriction-sciatic-nerve-pain-hypersensitivity-testing

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Przewlekłe ściśnięcie nerwu kulszowego i testy nadwrażliwości na ból u szczurów

Opisano tutaj model zwierzęcy Spared Nerve Injury jako mysi model obwodowego bólu neuropatycznego po częściowej denerwacji nerwu kulszowego poprzez uszkodzenie gałęzi nerwu piszczelowego i wspólnego strzałkowego, przy zachowaniu nienaruszonego nerwu podszywkowego. Modyfikację behawioralną wynikającą z allodynii mechanicznej ilościowo określono za pomocą włókien von Freya.

Model Spared Nerve Injury (SNI) indukowanej allodynii mechanicznej u myszy

Opisujemy dwie metody testowania czucia dotykowego w ostrych lub przewlekłych okresach po urazie rdzenia kręgowego u szczurów. Te zwalidowane procedury pozwalają wykryć rozwój i utrzymywanie się doznań typu allodynii.

Ostre i przewlekłe badanie czucia dotykowego po uszkodzeniu rdzenia kręgowego u szczurów

Ból neuropatyczny jest konsekwencją uszkodzenia lub choroby wpływającej na układ somatosensoryczny. "Model mankietowy" bólu neuropatycznego u myszy polega na wszczepieniu mankietu polietylenowego wokół głównej gałęzi nerwu kulszowego. Mechaniczna allodynia jest testowana przy użyciu filamentów von Freya.

Model kajdanki nerwu kulszowego bólu neuropatycznego u myszy

Dostarczony jest tutaj protokół, który szczegółowo opisuje kroki prowadzące do stworzenia zwierzęcego modelu przewlekłego bólu po niedokrwieniu (CPIP). Jest to dobrze rozpoznawalny model naśladujący ludzki złożony zespół bólu regionalnego typu I. Dalej oceniane są nadwrażliwości mechaniczne i termiczne, a także zachowania nocyfensywne wywołane kapsaicyną obserwowane w modelu szczurzym CPIP.

Model przewlekłego bólu po niedokrwieniu złożonego zespołu bólu regionalnego typu I u szczurów

Aby opracować nowatorskie interwencje terapeutyczne w celu zapobiegania i leczenia bólu pleców, potrzebne są modele zwierzęce, które zbadają mechanizmy i skuteczność tych terapii z perspektywy translacyjnej. Niniejszy protokół opisuje test BMS, znormalizowaną metodę oceny wrażliwości mechanicznej pleców u szczura.

Ocena wrażliwości mechanicznej pleców u szczura do mechanistycznego badania przewlekłego bólu pleców

Częściowe podwiązanie nerwu kulszowego wywołuje długotrwały przewlekły ból neuropatyczny, charakteryzujący się przesadnymi reakcjami na bodźce termiczne i mechaniczne. Ten mysi model bólu neuropatycznego jest powszechnie stosowany do badania innowacyjnych terapii leczenia bólu. W tym artykule szczegółowo opisano procedurę chirurgiczną w celu poprawy standaryzacji i odtwarzalności.

Częściowe podwiązanie nerwu kulszowego: mysi model przewlekłego bólu neuropatycznego w celu zbadania antynocyceptywnego działania nowych terapii

Przedstawiamy protokół użycia podskórnego igłowania Fu w modelu przewlekłego uszkodzenia zwężonego w celu wywołania bólu nerwu kulszowego u szczurów.

Skuteczność podskórnego igłowania Fu w bólu nerwu kulszowego: zmiany behawioralne i elektrofizjologiczne w modelu szczura z przewlekłym zwężeniem

Przewlekłe uszkodzenie zwężenia dystalnego nerwu podoczodołowego u myszy wywołuje zmiany w spontanicznym zachowaniu (zwiększona aktywność pielęgnacji twarzy) i zachowaniu nocyfensyjnym w odpowiedzi na stymulację dotykową (nadreaktywność na stymulację włosów von Freya), które są oznakami trwającego bólu i allodynii oraz służy jako model dla trójdzielnego bólu neuropatycznego.

Przewlekłe uszkodzenie zwężenia dystalnego nerwu podoczodołowego (DIoN-CCI) u myszy w celu zbadania bólu neuropatycznego nerwu trójdzielnego

Przedstawiamy tutaj metodę oceny aktywacji i blokady aksonów czuciowych w nerwach obwodowych w ostrych, znieczulonych, in vivo eksperymentach na szczurach z użyciem dwóch typów elektrofizjologicznych pomiarów rdzenia, które pozwalają rozróżnić aktywność podtypów włókien nerwowych: lokalnych potencjałów pola oraz zapisów pojedynczego neuronu o szerokim zakresie dynamicznym.

Metody elektrofizjologiczne oceny blokady bólu obwodowego u znieczulonego szczura

Około 3-8 milionów ludzi w Stanach Zjednoczonych cierpi na śródmiąższowe zapalenie pęcherza moczowego/zespół bólu pęcherza moczowego (IC/BPS), wyniszczający stan charakteryzujący się częściowo bólem miednicy. W celu zbadania udziału układu nerwowego w tym stanie, stosuje się fizjologiczny model bólu pęcherza moczowego u myszy i szczurów.

Wzdęcie pęcherza moczowego wywołało reakcje trzewnomotoryczne jako model bólu pęcherza moczowego u myszy

Poznaj model przewlekłego zwężenia nerwu kulszowego u szczurów do badania bólu neuropatycznego. Naucz się oceniać nadwrażliwość mechaniczną i termiczną za pomocą testów von Frey oraz płytowego analgezymetru.

Przewlekłe uciskowe uszkodzenie nerwu kulszowego i badanie nadwrażliwości bólowej u szczurów

Przeglądaj więcej filmów