Name: Ukierunkowane różnicowanie indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych w kierunku limfocytów T (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 47 s
Description: Poznaj metodę różnicowania komórek iPS w limfocyty T na układzie OP9-DL1 in vitro i dojrzewanie in vivo w myszach rag-deficytowych. Technika umożliwia generowanie antygenowo specyficznych komórek T do immunoterapii nowotworowej.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dziękujemy dr. Shinyę Yamanakę (Kyoto University) za udostępnienie linii komórkowej iPS-MEF-Ng-20D-17, dr. Dario Vignaliemu (St. Jude Children's Research Hospital) za wsparcie w zakresie konstruktu OT1-2A•pMig II, dr. Juan Carlosowi Zuniga-Pfluckerowi (Department of Immunology, University of Toronto) za udostępnienie linii komórkowej OP9-DL1 oraz dr. Kentowi E. Vrannie (Department of Pharmacology, Penn State University College of Medicine) za pomoc w zaprojektowaniu niniejszego badania. Projekt ten jest finansowany z grantów o numerach K18CA151798 z National Cancer Institute, Barsumian Trust oraz Melanoma Research Foundation (J. Song).

<ol><li>Brenner, M. K., Heslop, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adoptive+T+cell+therapy+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Adoptive T cell therapy of cancer.</a> Curr. Opin. Immunol. 22, 251-257 (2010).</li>
<li>Hataye, J., Moon, J. J., Khoruts, A., Reilly, C., Jenkins, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Naive+and+memory+CD4%2B+T+cell+survival+controlled+by+clonal+abundance%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Naive and memory CD4+ T cell survival controlled by clonal abundance.</a> Science. 312, 114-116 (2006).</li>
<li>Seki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-7%2FSTAT5+cytokine+signaling+pathway+is+essential+but+insufficient+for+maintenance+of+naive+CD4+T+cell+survival+in+peripheral+lymphoid+organs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">IL-7/STAT5 cytokine signaling pathway is essential but insufficient for maintenance of naive CD4 T cell survival in peripheral lymphoid organs.</a> J. Immunol. 178, 262-270 (2007).</li>
<li>Stemberger, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+naive+CD8%2B+T+cell+precursor+can+develop+into+diverse+effector+and+memory+subsets%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">A single naive CD8+ T cell precursor can develop into diverse effector and memory subsets.</a> Immunity. 27, 985-997 (2007).</li>
<li>Siewert, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experience-driven+development%3A+effector%2Fmemory-like+alphaE%2BFoxp3%2B+regulatory+T+cells+originate+from+both+naive+T+cells+and+naturally+occurring+naive-like+regulatory+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Experience-driven development: effector/memory-like alphaE+Foxp3+ regulatory T cells originate from both naive T cells and naturally occurring naive-like regulatory T cells.</a> J. Immunol. 180, 146-155 (2008).</li>
<li>Wang, L. X., Plautz, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-primed%2C+in+vitro-activated+CD4%2B+effector+T+cells+establish+long-term+memory+without+exogenous+cytokine+support+or+ongoing+antigen+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Tumor-primed, in vitro-activated CD4+ effector T cells establish long-term memory without exogenous cytokine support or ongoing antigen exposure.</a> J. Immunol. 184, 5612-5618 (2010).</li>
<li>Hinrichs, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+effector+CD8%2B+T+cells+derived+from+naive+rather+than+memory+subsets+possess+superior+traits+for+adoptive+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Human effector CD8+ T cells derived from naive rather than memory subsets possess superior traits for adoptive immunotherapy.</a> Blood. 117, 808-814 (2011).</li>
<li>Alajez, N. M., Schmielau, J., Alter, M. D., Cascio, M., Finn, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+a+tumor-specific%2C+MHC-unrestricted+T-cell+receptor+expressed+on+effector+cells+of+the+innate+and+the+adaptive+immune+system+through+bone+marrow+transduction+and+immune+reconstitution%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of a tumor-specific, MHC-unrestricted T-cell receptor expressed on effector cells of the innate and the adaptive immune system through bone marrow transduction and immune reconstitution.</a> Blood. 105, 4583-4589 (2005).</li>
<li>Yang, L., Baltimore, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+in+vivo+provision+of+antigen-specific+T+cell+immunity+by+programming+hematopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Long-term in vivo provision of antigen-specific T cell immunity by programming hematopoietic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 4518-4523 (2005).</li>
<li>Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extrathymic+generation+of+tumor-specific+T+cells+from+genetically+engineered+human+hematopoietic+stem+cells+via+Notch+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Extrathymic generation of tumor-specific T cells from genetically engineered human hematopoietic stem cells via Notch signaling.</a> Cancer Res. 67, 2425-2429 (2007).</li>
<li>Boztug, K. Stem-cell gene therapy for the Wiskott-Aldrich syndrome. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBoztug%2C+K+%22N.+Engl.+J.+Med%22">N. Engl. J. Med</a>. Med, N. .E. ngl.J. . 363, 1918-1927 (2010).</li>
<li>Peerani, R., Zandstra, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enabling+stem+cell+therapies+through+synthetic+stem+cell-niche+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Enabling stem cell therapies through synthetic stem cell-niche engineering.</a> J. Clin. Invest. 120, 60-70 (2010).</li>
<li>Mendez-Ferrer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+and+haematopoietic+stem+cells+form+a+unique+bone+marrow+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal and haematopoietic stem cells form a unique bone marrow niche.</a> Nature. 466, 829-834 (2010).</li>
<li>Daley, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+the+generation+of+patient-specific+pluripotent+stem+cells+for+combined+gene+and+cell+therapy+of+hematologic+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Hematology+Am.+Soc.+Hematol.+Educ.+Program%22%5BJournal%5D)">Towards the generation of patient-specific pluripotent stem cells for combined gene and cell therapy of hematologic disorders.</a> Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program. , 17-22 (2007).</li>
<li>Boitano, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aryl+hydrocarbon+receptor+antagonists+promote+the+expansion+of+human+hematopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Aryl hydrocarbon receptor antagonists promote the expansion of human hematopoietic stem cells.</a> Science. 329, 1345-1348 (2010).</li>
<li>Himburg, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleiotrophin+regulates+the+expansion+and+regeneration+of+hematopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Pleiotrophin regulates the expansion and regeneration of hematopoietic stem cells.</a> Nat. Med. 16, 475-482 (2010).</li>
<li>Tanigaki, K., Honjo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+lymphocyte+development+by+Notch+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+immunology%22%5BJournal%5D)">Regulation of lymphocyte development by Notch signaling.</a> Nature immunology. 8, 451-456 (2007).</li>
<li>Zhao, T., Zhang, Z. N., Rong, Z., Xu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunogenicity+of+induced+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Immunogenicity of induced pluripotent stem cells.</a> Nature. 474, 212-215 (2011).</li>
</ol>

Nie zgłoszono żadnych konfliktów interesów.

W przypadku terapii opartych na ACT, optymalnym podejściem jest generowanie in vitro dużej liczby wysoce reaktywnych limfocytów T swoistych dla Ag w celu ponownego wprowadzenia ich in vivo. Chociaż nasza metoda in vitro pozwala na uzyskanie funkcjonalnych limfocytów T z komórek iPS, znaczna liczba komórek pochodzących z iPS obumiera w ciągu czterech tygodni, szczególnie w czwartym tygodniu. Wnioskujemy, że sygnały przeżycia z szlaku Notch pośredniczone przez DL1, a także IL-7 i FLt3L, są niewys...

<table><tbody><tr><td>Myszy C57BL/6J</td><td>Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>B6.129S7-&lt;em&gt;Rag1&lt;sup&gt;tm1Mom&lt;/sup&gt;/J&lt;/em&gt;</td><td>Jackson Laboratory</td><td>002216</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD3 (2C11)</td><td>BD Biosciences</td><td>553058</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD28 (37.51)</td><td>BD Biosciences</td><td>553295</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD3 (17A2)</td><td>BioLegend</td><td>100202</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD4 (GK1.5)</td><td>BioLegend</td><td>100417</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD8 (53-6.7)</td><td>BioLegend</td><td>100714</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD25 (3C7)</td><td>BioLegend</td><td>101912</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD44 (1M7)</td><td>BioLegend</td><td>103012</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-CD117 (2B8)</td><td>BioLegend</td><td>105812</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-TCR-&amp;#946; (H57597)</td><td>BioLegend</td><td>109220</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-IL-2 (JES6-5H4)</td><td>BioLegend</td><td>503810</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-IFN-&amp;#947; (XMG1.2)</td><td>BioLegend</td><td>505822</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>ABCD1234</td><td></td></tr><tr><td>&amp;alpha;-MEM</td><td>Invitrogen</td><td>A10490-01</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Hyclone</td><td>SH3007.01</td><td></td></tr><tr><td>Brefeldyna A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B7651</td><td></td></tr><tr><td>Polybrene</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>107689</td><td></td></tr><tr><td>GeneJammer</td><td>Integrated Sciences</td><td>204130</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do izolacji RNA</td><td>Qiagen</td><td>74104</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do izolacji DNA</td><td>Qiagen</td><td>69504</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do izolacji CD8</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-095-236</td><td></td></tr><tr><td>Bufor lizujący ACK</td><td>Lonza Inc.</td><td>10-548E</td><td></td></tr><tr><td>mFlt-3L</td><td>PeproTech Inc</td><td>250-31L</td><td></td></tr><tr><td>mIL-7</td><td>PeproTech Inc</td><td>217-17</td><td></td></tr><tr><td>Żelatyna</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G9391</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało FITC-anty-OVA</td><td>Rockland Immunochemicals</td><td>200-4233</td><td></td></tr><tr><td>Bufor do permeabilizacji</td><td>Biolegend</td><td>421002</td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehyd</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8775</td><td></td></tr><tr><td>Filtr 0,4 &amp;mu;m</td><td>EMD Millipore</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sorter komórkowy Moflo</td><td>Dako</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cytometr przepływowy Calibur</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cytometr przepływowy LSR II</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Restryktor dla myszy</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

kierunkowe różnicowanie indukowanych pluripotentnych komórek macierzystych w kierunku limfocytów t

Directed Differentiation of Induced Pluripotent Stem Cells towards T Lymphocytes

Adoptywne przeniesienie komórek (ACT) antygenowo swoistych cytotoksycznych limfocytów T (CTL) CD8+ stanowi obiecującą metodę leczenia wielu rodzajów nowotworów złośliwych 1. CTL mogą rozpoznawać komórki nowotworowe poprzez oddziaływanie antygenów guza z receptorami komórek T (TCR), a następnie uwalniać cytotoksyny oraz cytokiny w celu zniszczenia komórek nowotworowych. Wiadomo, że słabo zróżnicowane CTL o fenotypie podobnym do komórek pamięci centralnej (określane jako wysoce reaktywne) stanowią optymalną populację dla immunoterapii opartej na ACT, ponieważ posiadają one wysoki potencjał proliferacyjny, są mniej podatne na apoptozę niż komórki bardziej zróżnicowane i wykazują większą zdolność do odpowiedzi na cytokiny homeostatyczne 2-7. Jednak ze względu na trudności w uzyskaniu od pacjentów dużej liczby takich CTL, istnieje pilna potrzeba znalezienia nowego podejścia do generowania wysoce reaktywnych, Ag-swoistych CTL dla skutecznych terapii opartych na ACT.
Transdukcja TCR samoodnawiających się komórek macierzystych w celu rekonstrukcji immunologicznej wykazuje potencjał terapeutyczny w leczeniu chorób 8-10. Jednakże podejście polegające na pozyskiwaniu embrionalnych komórek macierzystych (ESCs) od pacjentów nie jest wykonalne. Choć wykorzystanie hematopoetycznych komórek macierzystych (HSCs) do celów terapeutycznych znajduje szerokie zastosowanie w klinice 11-13, HSCs charakteryzują się ograniczoną zdolnością do różnicowania i proliferacji, a ich namnażanie w hodowlach komórkowych in vitro jest utrudnione 14-16. Niedawno opracowana technologia komórek iPS oraz rozwój systemów in vitro do dostarczania genów umożliwiają generowanie komórek iPS od pacjentów bez konieczności stosowania metod chirurgicznych. Ponadto, podobnie jak ESCs, komórki iPS posiadają nieograniczoną zdolność do proliferacji in vitro oraz wykazują zdolność do różnicowania w komórki krwiotwórcze. W związku z tym komórki iPS mają większy potencjał do wykorzystania w immunoterapii opartej na ACT w porównaniu do ESCs lub HSCs.
W niniejszej pracy przedstawiamy metody generowania limfocytów T z komórek iPS in vitro oraz programowania in vivo swoistych dla antygenu CTL z komórek iPS w celu promowania immunologicznego nadzoru nad nowotworami. Stymulacja in vitro ligandem Notch indukuje różnicowanie komórek iPS w komórki T, a transdukcja genu TCR skutkuje różnicowaniem się komórek iPS w swoiste dla antygenu komórki T in vivo, co zapobiega wzrostowi guza. W ten sposób demonstrujemy swoiste dla antygenu różnicowanie komórek T z komórek iPS. Nasze badania zapewniają potencjalnie bardziej wydajne podejście do generowania swoistych dla antygenu CTL dla terapii opartych na ACT i ułatwiają opracowanie strategii terapeutycznych w leczeniu chorób.

Generowanie limfocytów T z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPS) stanowi alternatywne podejście do wykorzystania embrionalnych komórek macierzystych w immunoterapii opartej na limfocytach T. Metoda ta wykazuje, że dzięki zastosowaniu systemu indukcji in vitro lub in vivo, komórki iPS są zdolne do różnicowania się zarówno w konwencjonalne, jak i antygenowo swoiste limfocyty T.

Kierunkowe różnicowanie indukowanych pluripotentnych komórek macierzystych w kierunku limfocytów T

Adoptywny transfer komórek (ACT) antygenowo swoistych cytotoksycznych limfocytów T (CTL) CD8+ jest obiecującą metodą leczenia wielu rodzajów nowotworów złośliwych 1. Limfocyty CTL mogą ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest generowanie i charakterystyka limfocytów T z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (komórek IPS). Komórki IPS mogą być następnie różnicowane in vitro w systemie hodowlanym OP9 DL1, a następnie dojrzewać in vivo w myszy z niedoborem rag. Alternatywnie komórki mogą zostać zmodyfikowane genetycznie w celu nadekspresji TCR OT-I, a następnie przeniesione adoptywnie w celu rozwoju in vivo.Po sześciu tygodniach różnicowania in vivo myszy można poddać próbie poprzez dosytatyczne wstrzyknięcie komórek nowotworowych EEG seven, a następnie ocenić specyficzność antygenową limfocytów T pochodzących z iPS. Ostatecznie komórki iPS mogą różnicować się zarówno w konwencjonalne, jak i specyficzne antygenowo limfocyty T, z których te drugie są zdolne chronić zwierzęta przed wyzwaniem nowotworowym. Zastosowania tej techniki rozszerzają się w kierunku indywidualizowanej immunoterapii nowotworów.Metoda ta pozwala na generowanie dużej liczby reaktywnych przeciwko nowotworowi limfocytów T pochodzących z minimalnej ilości krwi pacjenta lub tkanki skóry. W dniu zerowym przenieść 5×10⁴ komórek iPS na 100-milimetrową płytkę hodowlaną zawierającą konfluen

directed-differentiation-induced-pluripotent-stem-cells-towards-t

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia i infekcje

Kierunkowa różnicowanie indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych w kierunku limfocytów T

Film demonstruje test z wykorzystaniem ludzkich komórek macierzystych CD8+ pochodzących z ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) w celu zahamowania replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV) u myszy. Te limfocyty T, zmodyfikowane za pomocą receptorów specyficznych dla HBV, są przenoszone do myszy transgenicznych. Kompetentne replikacyjnie plazmidy genomu HBV są następnie wstrzykiwane bezpośrednio do wątroby, umożliwiając wychwyt DNA wirusa. Gdy antygeny wirusowe ulegną...

Hamowanie replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B za pomocą limfocytów T specyficznych dla antygenu wirusowego

Ten film demonstruje test do generowania indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych CD8αβ+ pochodzących z indukowanych komórek macierzystych (iPSC) specyficznych dla antygenu nowotworowego. Specyficzne dla antygenu nowotworowego iPSC są hodowane na monowarstwie komórek zrębu i różnicowane w hematopoetyczne komórki progenitorowe (HPC). HPC są różnicowane w podwójnie dodatnie limfocyty T CD4 + CD8 + przy użyciu pożywki różnicowej. Komórki te są następnie stymulowane do generowania...

Generowanie pojedynczych dodatnich limfocytów T CD8 z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych

Mysie embrionalne komórki macierzyste mogą być różnicowane do limfocytów T in vitro za pomocą systemu kohodowli OP9-DL1. Powodzenie tej procedury wymaga zwrócenia szczególnej uwagi na konserwację odczynnika/ogniwa oraz kluczowych kroków wrażliwych na technikę. W tym miejscu omawiamy te krytyczne parametry i przedstawiamy szczegółowy protokół, aby zachęcić do przyjęcia tej technologii.

Wyprowadzanie limfocytów T in vitro z embrionalnych komórek macierzystych myszy

Ten protokół opisuje efektywną indukcję hemogennego śródbłonka i wielopotencjalnych hematopoetycznych komórek progenitorowych z ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych poprzez wymuszoną ekspresję czynników transkrypcyjnych.

Bezpośrednia indukcja hemogennego śródbłonka i krwi przez nadekspresję czynników transkrypcyjnych w ludzkich pluripotencjalnych komórkach macierzystych

Ten protokół opisuje, jak generować indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste (iPSC) z ludzkich obwodowych limfocytów T w warunkach wolnych od karmy, używając kombinacji wektorów matrigelu i wirusa Sendai zawierających czynniki przeprogramowujące.

Wytwarzanie indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych z ludzkich obwodowych limfocytów T przy użyciu wirusa Sendai w warunkach wolnych od żywiciela

Celem tego protokołu jest pokazanie protokołu przeprogramowania limfocytów naciekających guzy czerniaka na indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste.

Wytwarzanie indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych z ludzkich limfocytów naciekających nowotwór czerniaka

Prezentujemy tutaj metodę rozwoju funkcjonalnych limfocytów T regulatorowych specyficznych dla antygenu (Ag) (Treg) z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) do immunoterapii autoimmunologicznego zapalenia stawów w modelu mysim.

Rozwój limfocytów T regulatorowych specyficznych dla antygenu macierzystego przeciwko autoimmunizacji

Tutaj prezentujemy protokoły hodowli ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych (hPSC), używane do różnicowania hPSC na hematopoetyczne komórki progenitorowe CD34+. Metoda ta wykorzystuje specyficzną dla etapu manipulację kanoniczną sygnalizacją WNT w celu określenia komórek wyłącznie do ostatecznego lub pierwotnego programu krwiotwórczego.

Ukierunkowane różnicowanie pierwotnych i ostatecznych progenitorów hematopoetycznych z ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych

Ten artykuł opisuje nowatorską metodę generowania indukowanych indukowanych pluripotencjalnych emigrantów grasicy pochodzących z komórek macierzystych (iTE) za pomocą trójwymiarowego (3D) systemu hodowli grasicy. iTE to jednorodny podzbiór limfocytów T blisko spokrewniony z naiwnymi limfocytami T ze zdolnością do proliferacji, tworzenia pamięci i supresji guza.

Trójwymiarowy system hodowli grasicy do generowania indukowanych przez mysie pluripotencjalnych emigrantów grasicy pochodzących z antygenu nowotworowego specyficznych dla antygenu macierzystego

Ten artykuł opisuje metodę generowania funkcjonalnych, specyficznych dla antygenu nowotworowego, indukowanych, indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych pochodzących z CD8αβ+ dodatnich limfocytów T przy użyciu systemu kohodowli OP9/DLL1.

Wykorzystanie ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych do wytwarzania limfocytów T specyficznych dla antygenu nowotworowego

Prezentowany tutaj jest protokół skutecznego tłumienia replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV) u myszy poprzez wykorzystanie adoptywnego transferu komórek (ACT) limfocytów T specyficznych dla antygenu wirusowego (Ag) pochodzących z komórek macierzystych. Procedura ta może być dostosowana do potencjalnej immunoterapii zakażenia HBV opartej na ACT.

Limfocyty T specyficzne dla wirusa Ag pochodzące z komórek macierzystych hamują replikację HBV u myszy

Poznaj metodę różnicowania komórek iPS w limfocyty T na układzie OP9-DL1 in vitro i dojrzewanie in vivo w myszach rag-deficytowych. Technika umożliwia generowanie antygenowo specyficznych komórek T do immunoterapii nowotworowej.

Kierunkowe różnicowanie indukowanych pluripotentnych komórek macierzystych w kierunku limfocytów T

Przeglądaj więcej filmów