Name: Zrozumienie powstawania wzorca móżdżku (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-11-01T00:23:48.000+00:00
Duration: 13 min 18 s
Description: Poznaj mechanizmy rozwoju móżdżku i formowania wzorca w układzie nerwowym. Badania Dr. Kathy Millan łączą genetykę człowieka z neurobiologią rozwoju, odkrywając kluczowe geny takie jak LMX1A.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do ujawnienia.

zrozumienie formowania wzorców w móżdżku

Understanding Cerebellar Pattern Formation

Zrozumienie formowania wzorców w móżdżku

Nazywam się Kathy Millan. Jestem adiunktem na Uniwersytecie w Chicago w Katedrze Genetyki Ludzkiej oraz w Katedrze Neurologii. Zajmuję się rozwojem mózgu, a konkretnie rozwojem móżdżku, części mózgu znajdującej się z tyłu czaszki.Jest ono najbardziej znane z roli w rozwoju motorycznym, ale okazuje się, że bierze udział w wielu procesach. To naprawdę interesująca część mózgu. Formowanie wzorca to proces powstawania wzorca w systemie biologicznym. Jest to jedno z tych pojęć, których biolodzy rozwoju używają w sposób dość elastyczny, aby określić niemal wszystko.I nie jest do końca jasne, co to właściwie oznacza. Myślę, że każdy biolog rozwoju podałby inną wersję tego, co to dla mnie znaczy. Chodzi o to, w jaki sposób mózg, a w szczególności móżdżek, odróżnia górę od dołu oraz w jaki sposób definiuje lewą i prawą stronę.W jaki sposób decyduje się, która część struktury stanie się konkretnym elementem? A gdy zostaną już podjęte te krytyczne, fundamentalne decyzje we wczesnym embrionie, w jaki sposób wszystkie struktury komórkowe łączą się, by utworzyć precyzyjnie wzorzec spośród części mózgu, którą nazywamy móżdżkiem? Interesuje nas zatem rozwój móżdżku oraz informacje o wzorcowaniu w

understanding-cerebellar-pattern-formation

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Zrozumienie formowania się wzorców móżdżku

Przedstawiamy praktyczny przewodnik po wprowadzaniu tracerów in vivo, wykorzystując drogę rdzeniowo-móżdżkową jako system modelowy do zaprezentowania kluczowych kroków niezbędnych do skutecznej analizy obwodów neuronalnych u myszy. Szczegółowo opisujemy nasz wszechstronny protokół śledzenia, który wykorzystuje aglutyninę z zarodków pszenicy (WGA) sprzężoną z fluoroforami Alexa.

Ujawnianie topografii obwodów neuronalnych w wielu kolorach

Obwody neuronalne są zorganizowane topograficznie w przedziały funkcjonalne o specyficznych profilach molekularnych. W niniejszej pracy przedstawiamy praktyczne i techniczne kroki służące do ujawnienia globalnej topografii mózgu z wykorzystaniem wszechstronnego podejścia opartego na barwieniu immunohistochemicznym całych preparatów (wholemount). Demonstrujemy użyteczność tej metody, wykorzystując dobrze poznaną cytoarchitekturę i obwody móżdżku.

Immunohistochemia całego preparatu w celu ujawnienia złożonej topografii mózgu

Ten film demonstruje protokół różnicowania ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych w progenitorach móżdżku. Polega ona na przeniesieniu kolonii komórek macierzystych na bardzo niską płytkę przyczepową w celu utworzenia ciał zarodkowych, promowaniu różnicowania za pomocą czynników wzrostu, a następnie przeniesieniu ciał zarodkowych na płytkę pokrytą matrycą w celu adhezji. Kolejne kroki obejmują indukcję migracji komórek i dodanie pożywki do dojrzewania, aby kierować...

Technika generowania monowarstwy 2D komórek móżdżku z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych

Morfogeneza i migracja neuronów są kluczowymi wydarzeniami leżącymi u podstaw prawidłowego rozwoju mózgu. W tym miejscu opisujemy metody genetycznej manipulacji hodowanymi neuronami ziarnistymi móżdżku i rozwijającym się móżdżkiem w celu oceny morfologii i cech migracyjnych neuronów.

Manipulacja genetyczna neuronów ziarnistych móżdżku in vitro i in vivo w celu zbadania morfologii i migracji neuronów

Podczas rozwoju móżdżku po urodzeniu, niedojrzałe komórki ziarniste pochodzące ze strefy zarodkowej wykazują różne sposoby migracji, aby dotrzeć do miejsca docelowego i ustanowić sieci neuronowe. Protokół ten opisuje przygotowanie wycinków móżdżku i konfokalne podejście makroskopowe stosowane do badania czynników regulujących migrację neuronów.

Ex vivo Obrazowanie pourodzeniowej migracji komórek ziarnistych móżdżku za pomocą makroskopii konfokalnej

Zewnętrzna warstwa granulatu móżdżku jest miejscem największego wzmocnienia tranzytu w rozwijającym się mózgu. W tym miejscu przedstawiamy protokół ukierunkowany na modyfikację genetyczną tej warstwy w szczycie proliferacji przy użyciu elektroporacji ex vivo i hodowli plastrów móżdżku z embrionalnych zarodków piskląt dnia 14.

Ex vivo Hodowla wycinków móżdżku piskląt i przestrzennie ukierunkowana elektroporacja prekursorów komórek ziarnistych

Opisujemy uproszczony protokół różnicowania 3D dla hPSC, wykorzystujący zdefiniowane czynniki wzrostu pożywki i zredukowanej, zdolny do generowania agregatów komórkowych z wczesnymi strukturami neuroepitelicznymi i dodatni dla markerów związanych z móżdżkiem, a także opcjonalną modyfikację 2D do różnicowania komórek jako monowarstwę do generowania funkcjonalnych neuronów.

Usprawniony protokół różnicowania móżdżku 3D z opcjonalną modyfikacją 2D

Różne regiony móżdżku są zaangażowane w różne procesy behawioralne, jednak leżące u ich podstaw mechanizmy molekularne pozostają nieznane. W pracy opisano metodę powtarzalnego i szybkiego preparowania kory móżdżku półkul, przednich i tylnych obszarów robaka oraz głębokich jąder móżdżku w celu zbadania różnic molekularnych poprzez wyizolowanie RNA i zbadanie różnic w ekspresji genów.

Rozwarstwienie regionalne móżdżku do analizy molekularnej

Tutaj opisujemy metodę wizualizacji synaptogenezy ziarnistych neuronów w móżdżku myszy w trakcie poporodowego rozwoju mózgu, kiedy te komórki udoskonalają swoje struktury synaptyczne i tworzą synapsy, aby zintegrować się z ogólnym obwodem mózgu.

Wykorzystanie elektroporacji poporodowej in vivo do badania morfologii neuronów ziarnistych móżdżku i rozwoju synaps

Przedstawiono standardowy rurociąg do badania morfometrii istoty szarej móżdżku. Rurociąg łączy w sobie najnowocześniejsze podejścia o wysokiej rozdzielczości do zoptymalizowanej i zautomatyzowanej parcelacji móżdżku oraz rejestracji móżdżku na podstawie wokseli w celu wolumetrycznej oceny ilościowej.

Ustandaryzowany rurociąg do badania morfometrii istoty szarej móżdżku człowieka za pomocą strukturalnego rezonansu magnetycznego

Obecny protokół wyjaśnia tworzenie monowarstwy 2D komórek móżdżku z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych w celu zbadania wczesnych etapów rozwoju móżdżku.

Modelowanie rozwoju móżdżku człowieka in vitro w strukturze 2D

Poznaj mechanizmy rozwoju móżdżku i formowania wzorca w układzie nerwowym. Badania Dr. Kathy Millan łączą genetykę człowieka z neurobiologią rozwoju, odkrywając kluczowe geny takie jak LMX1A.

Zrozumienie formowania wzorców w móżdżku

Przeglądaj więcej filmów