Ocena struktury i funkcji prawej komory serca w mysim modelu zwężenia tętnicy płucnej za pomocą echokardiografii przezklatkowej

Ogólnym celem tej procedury jest opracowanie nieinwazyjnej metody oceny struktury i funkcji prawej komory w mysim modelu zwężenia tętnicy płucnej. Osiąga się to poprzez uprzednie uzyskanie za pomocą ultradźwięków, widoków w trybie przymostkowej osi długiej B i M, aby uzyskać ułamkowe skrócenie wymiaru prawej komory i grubość ściany prawej komory. Drugim krokiem jest uzyskanie widoku krótkiej osi przymostkowej na środkowym poziomie brodawkowatym w celu obliczenia zmiany obszaru ułamkowego.

Następnie uzyskuje się widok krótkiej osi przymostkowej na poziomie zastawki aortalnej, aby uzyskać grubość ścianki RV i szczytową prędkość tętnicy płucnej. Ostatnim krokiem jest uzyskanie zmodyfikowanego widoku długiej osi przymostkowej RV i PA Aby obliczyć szczytową prędkość tętnicy płucnej, obliczenia PA można wykonać z krótkiej i długiej osi. Ostatecznie, na podstawie powyższych obrazów, krok piąty, obliczenia i analizy danych można wykonać w trybie offline.

Główną zaletą tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami, takimi jak charakterystyka RV, jest to, że echokardiografia jest metodą nieinwazyjną. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w ocenie struktury i funkcji RV. Aby rozpocząć ten protokół, najpierw zdobądź ośmiotygodniowe samce czarnych myszy C 57 i pozwól im zaaklimatyzować się przez tydzień przed jakimikolwiek procedurami eksperymentalnymi.

Następnie w pełni znieczul zwierzęta i wykonaj niedrożność tętnicy płucnej zgodnie z wytycznymi A VMA i zatwierdzonymi przez Twoją instytucję protokołami iacuc. Należy pamiętać, że podczas obrazowania właściwy wybór znieczulenia, taki jak krótki czas trwania wziewnego izofluranu, ma kluczowe znaczenie dla utrzymania bicia serca w normalnym fizjologicznym tempie. Obrazy, jak pokazano tutaj, są zbierane za pomocą systemu vivo 2100.

Podobne obrazy można uzyskać za pomocą systemów obrazowania ultrasonograficznego innych producentów. Zaleca się, aby wszystkie obrazy były uzyskiwane i analizowane w sposób zaślepiony, gdy tylko jest to możliwe. Zacznij od użycia trybu B, aby uzyskać pełny widok długiej osi przymostkowej lewej komory ze zwierzęciem w pozycji leżącej.

Na peronie. Umieść sondę ultradźwiękową o mocy 40 megaherców, znaną również jako MS five 50 D na zwierzęciu pod kątem około 30 stopni w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara do lewej linii przymostkowej z wycięciem skierowanym w kierunku rozdęcia. Następnie wyreguluj kąt sondy, przechylając ją lekko wzdłuż osi Y, jak pokazano tutaj, aby uzyskać pełny widok komory lewej komory na środku ekranu.

Gdy odpowiednie punkty orientacyjne zostaną wyraźnie zwizualizowane, przełącz się w tryb M, na ekranie pojawi się linia wskaźnika. W ustawieniu w trybie M linia powinna być ustawiona tak, aby przechodziła przez najszerszą część prawej komory komory, używając aorty jako punktu orientacyjnego, jak pokazano tutaj zarówno w modelu niedrożności tętnicy płucnej, jak i pozorowanej myszy. W tym widoku ściana prawej komory i przegroda śródkomorowa powinny być wyraźnie widoczne, upewnij się, że głębokość ostrości leży pośrodku prawej komory komory.

Rejestruj dane z najwyższą możliwą liczbą klatek na sekundę do pomiaru wymiaru komory prawej komory, ułamkowego skrócenia i grubości ściany prawej komory w trybie offline. Następnie, aby uzyskać ułamkowe zmiany obszaru, przełącz się w tryb B. Następnie znajdź widok długiej osi, jak poprzednio, a następnie obróć sondę o 90 stopni zgodnie z ruchem wskazówek zegara Aby uzyskać widok krótkiej osi, przechyl sondę lekko wzdłuż osi X sondy, aby zapobiec zasłanianiu widoku mostka.

Następnie poruszaj się lekko w górę iw dół wzdłuż osi Y sondy. Aby uzyskać środkowy widok brodawkowaty, poszukaj widoku z największym wymiarem komory w tym widoku, mięśnie brodawkowate są zwykle zlokalizowane w pozycjach godziny drugiej i piątej, jak widać tutaj teraz z widoku krótkiej osi przymostkowej, przesuń sondę na osi Y w kierunku czaszki, aż przekrój zastawki aortalnej będzie widoczny na środku okna. Droga odpływu prawej komory powinna być widoczna na górze jako struktura w kształcie półksiężyca z zastawką trójdzielną oddzielającą prawą komorę od prawego przedsionka.

Jak pokazano tutaj, zapisz dane za pomocą ctor do pomiaru prawej komory. Grubość ścianki w trybie offline pozostaje w tym samym położeniu. Przełącz na tryb kolorowego dopplera i ustaw żółtą linię przerywaną PW równolegle do kierunku przepływu w naczyniu.

Zwróć uwagę, że kolory niebieski i czerwony wskazują odpowiednio przepływ od i w kierunku sondy. Następnie umieść kursor fali tętna na zwężonym obszarze. Dopuszczalne jest, aby kąt sondy był mniejszy niż 20 w celu uzyskania dokładnych danych rejestracyjnych pomiaru, przy użyciu ctor do pomiaru prędkości szczytowej PA w trybie offline.

Następnie, aby uzyskać zmodyfikowany widok długiej osi przymostkowej, kontynuuj ustawianie trybu B i ustaw sondę na prawej linii przymostkowej i powoli przechylaj sondę pod kątem około 30 do 45 stopni na osi Y sondy w kierunku klatki piersiowej, aby wyraźnie uwidocznić tętnicę płucną przecinającą aortę. Następnie przełącz się w tryb kolorowego dopplera i ustaw żółtą linię przerywaną PW równolegle do kierunku przepływu w naczyniu. Kąt Dopplera powinien być jak najbardziej zbliżony do zera stopni, zachowując przy tym kierunkowość równoległą do przepływu PA.

Umieść kursor PW na końcówce płatka zastawki płucnej i zarejestruj dane za pomocą ctor i zmierz szczytową prędkość PA. Grubość ściany prawej komory w trybie offline można obliczyć na podstawie danych w trybie B uzyskanych z widoku krótkiej osi przymostkowej prawej komory na poziomie aorty. Zacznij od wybrania narzędzia do śledzenia obszaru 2D, aby prześledzić obszar ściany prawej komory przy rozkurczu, jak pokazano tutaj na różowo.

Następnie użyj narzędzia do śledzenia odległości, aby prześledzić wewnętrzny i zewnętrzny obwód ściany toru odpływu prawej komory. Weź średnią obwodu wewnętrznego i zewnętrznego, grubość ściany prawej komory można obliczyć za pomocą równania widocznego tutaj. Spójne pomiary grubości ścianki prawej komory lub wymiarów można wykonać za pomocą wielu okien akustycznych zarówno w długiej, jak i krótkiej osi.

Wybór niektórych z tych okien będzie zależał od doświadczenia operatora i może uwzględniać pewną zmienność, jak widać tutaj. Funkcję skurczową prawej komory można mierzyć w blaszkach miażdżycowych, w ujęciu procentowym ułamkowego skrócenia lub w mięśniu brodawkowatym środkowym odpowiednio jako procentowej zmianie powierzchni frakcyjnej. Dylatację RV można zmierzyć w osi długiej i krótkiej jako wymiar komory prawej komory i obszar prawej komory.

W rozkurczu grubość ścianki wolnej od prawej komory jako marker przerostu RV można dokładnie określić za pomocą trybu M lub metody śledzenia obszaru. Podobnie, szczytową prędkość tętnicy płucnej można również uzyskać w trybie długiej osi przymostkowej lub krótkiej osi. Wiarygodne pomiary prędkości szczytowej PA, a tym samym gradientu ciśnienia szczytowego w PA, można uzyskać za pomocą kolorowego Dopplera zarówno w oknach akustycznych o krótkiej, jak i długiej osi.

Wreszcie, w tym badaniu pokazujemy, że nieinwazyjna echokardiografia jest realną alternatywą dla metody cewnikowania prawego serca w terminalnej końcówce, obecnie stosowanej jako złoty standard pomiaru RVSP dla pięciu zwierząt. Cewnikowanie wykonano w celu porównania z RVSP. Pomiary i obliczenia ciśnienia były bardzo porównywalne.

Po zmierzeniu technikę tę można wykonać w ciągu 15 do 20 minut, jeśli zostanie wykonana prawidłowo. Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać o utrzymaniu tętna myszy na poziomie fizjologicznym. Po tej procedurze można wykonać cewnikowanie w komorze żeber w celu uzyskania ciśnienia skurczowego w komorze żeber.

Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak mierzyć zmiany strukturalne i funkcjonalne w prawej komorze za pomocą echokardiografii u myszy po zwężeniu tętnicy płucnej.