Name: Użycie elektrody bipolarnej do stworzenia mysiego modelu padaczki skroniowej poprzez elektryczne rozppalenie ciała migdałowatego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-29T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 49 s
Description: Poznaj metodę tworzenia głębokich elektrod mózgowych do stymulacji i rejestracji EEG w modelu padaczki skroniowej u myszy. Protokół umożliwia badanie mechanizmów epileptycznych z ciała migdałowatego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Badania były wspierane przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (nr 82030037, 81871009) oraz Miejską Komisję Zdrowia w Pekinie (11000022T000000444685). Dziękujemy firmie TopEdit (www.topeditsci.com) za pomoc językową podczas przygotowania tego manuskryptu.

Ten eksperyment został zatwierdzony przez Komisję Etyki Zwierząt Doświadczalnych Szpitala Xuanwu Stołecznego Uniwersytetu Medycznego. Wszystkie myszy trzymano w laboratorium zwierzęcym szpitala Xuanwu Stołecznego Uniwersytetu Medycznego. Protokół ten podzielony jest na cztery części. Dwie pierwsze części wprowadzają w sposób budowy elektrody i obwodu elektrycznego za pomocą pierścienia ślizgowego do połączenia elektrod z aparaturą rejestrującą/stymulującą EEG. W trzeciej części opisano sposób działania implantacji elektrody, a w czwartej przedstawiono parametry zapisu i stymulacji EEG wykorzystane w modelu padaczki ciała migdałowatego.
1. Produkcja elektrod
<ol>
	<li>Przygotuj następujące wcześniej przygotowane materiały: dwa kawałki drutu wolframowego pokrytego teflonem o długości 3 cm (nieosłonięta średnica: 76,2 μm), jeden kawałek srebrnego drutu (goła średnica: 127 μm) o tej samej długości i jeden zestaw kołków rzędowych o grubości 2 x 2.</li>
	<li>Użyj zapalniczki, aby spalić jeden koniec każdego drutu wolframowego, aby usunąć 5 mm powłoki izolacyjnej. 
	UWAGA: Drut wolframowy ze zdjętą izolacją zmienia kolor na; Ta część drutu wolframowego jest określana jako górny koniec.</li>
	<li>Obierz odcinek bardzo cienkiego drutu wielożyłowego i owiń go od dołu do górnego końca, gdzie zaczyna ciemnieć, kontynuując do góry. Połącz ten bardzo cienki drut (o miękkiej teksturze) z drutem wolframowym, ściskając jeden koniec i delikatnie skręcając drugi koniec, co umożliwia łatwe splatanie ze sobą dwóch materiałów.</li>
	<li>Delikatnie pociągnij, aby upewnić się, że są szczelnie owinięte i odetnij nadmiar bardzo cienkiego drutu. Staraj się, aby drut wolframowy był prosty przez cały proces.</li>
	<li>Przymocuj kołek rzędowy do zacisku na stole spawalniczym dłuższym bokiem kołków skierowanym na zewnątrz. Użyj igły strzykawki, aby nabrać trochę pasty lutowniczej i nałóż ją na kołki. Podgrzać palnik spawalniczy do temperatury 320 °C; Rozpuść i posmaruj trochę bezołowiowego drutu cynowego końcówką palnika.</li>
	<li>Załóż górny koniec drutu wolframowego na jedną igłę kołków rzędowych i użyj lutu na palniku, aby przymocować drut wolframowy do kołka. 
	UWAGA: Bardzo trudno byłoby przyspawać drut wolframowy za pomocą kołków bezpośrednio bez pomocy bardzo cienkiego drutu.</li>
	<li>Przyspawaj kolejny drut wolframowy i kolejny srebrny drut do kołka rzędu w ten sam sposób, tak aby każdy drut odpowiadał igle (patrz <silna klasa = "xfig" > Rysunek 1,i).</li>
	<li>Wytnij dwie rurki termokurczliwe nieco dłuższe niż górny koniec drutu wolframowego. Umieść je na złączu lutowanym dwóch drutów wolframowych, upewniając się, że część przewodząca jest całkowicie pokryta rurką, tak aby obwód dwóch drutów wolframowych nie był umieszczony szeregowo. 
	UWAGA: Chociaż są trzy przewody, jeśli dwa z nich są izolowane, trzy przewody nie będą połączone szeregowo; Do srebrnego drutu można również dodać rurkę.</li>
	<li>Wyjmij elektrodę z zacisku stołu spawalniczego i delikatnie przytrzymaj elektrodę dużymi szczypcami, ponieważ elektrody łatwo tracą swój kształt podczas podgrzewania rurki termokurczliwej, używając zacisku o dobrej przewodności cieplnej z nieco większą siłą.</li>
	<li>Włącz kanał powietrzny i podgrzewaj, aż do osiągnięcia temperatury 320 °C. Przedmuchaj rurkę termokurczliwą przez kilka sekund, aż zostanie dokręcona (patrz Rysunek 1,ii).</li>
	<li>Jeśli igły oddzielą się od plastikowego korpusu podczas procesu spawania, połącz część spawalniczą i plastikowy korpus za pomocą kleju topliwego (patrz <silna klasa = "xfig" >Rysunek 1,iii). Uważaj, aby nie rozmazać go na interfejsie, ponieważ wpłynęłoby to na wstawianie interfejsu.</li>
	<li>Przytrzymaj dwa druty wolframowe i skręć je razem, trzymając ich końce w rozkroku (patrz <silna klasa="xfig">Rysunek 1,iv). Przyciąć skręcone druty wolframowe do długości około 10 mm tak, aby odstęp na końcach nie przekraczał 0.5 mm. 
	UWAGA: Ten krok można również wykonać przed implantacją elektrody, aby umożliwić elastyczną regulację długości elektrody.</li>
	<li>Podgrzej pistolet do klejenia i równomiernie nałóż klej wokół elektrody.</li>
	<li>Sprawdź elektrody za pomocą multimetru: umieść jeden pręt multimetru po niespawanej stronie kołków rzędu i delikatnie dotknij końcem drutu wolframowego lub drutu srebrnego do drugiego pręta, sprawdzając, czy obwód jest gładki. Upewnij się, że linie nie są umieszczone szeregowo.</li>
</ol>
2. Połączenie pierścienia ślizgowego i opis obwodu
UWAGA: Gdy elektrody myszy są podłączone do urządzenia EEG za pomocą w stanie swobodnego ruchu, mogą się splątać, gdy myszy poruszają się i obracają. Powoduje to, że stają się krótsze, co ostatecznie utrudnia myszom poruszanie się lub powoduje, że spadają z głów. W opisanej tutaj metodzie wprowadza się czterokanałowy pierścień ślizgowy, aby zapobiec wypadaniu. Cztery kanały są reprezentowane w czterech kolorach w Rysunek 1B.
<ol>
	<li>Oderwij 5 mm powłoki izolacyjnej na każdym końcu, aby odsłonić metalowy drut wewnątrz.</li>
	<li>Dodaj odcinek rurki termokurczliwej do każdego przewodu stojana.</li>
	<li>Zespawaj każdy przewód za pomocą wtyczki złącza urządzenia EEG.</li>
	<li>Rurkę termokurczliwą obkurczyć gorącym powietrzem.</li>
	<li>Dodaj odcinek rurki termokurczliwej do każdego drutu wirnika.</li>
	<li>Skręć ze sobą przewodzące części czerwonego i pomarańczowego drutu i przyspawaj je do złącza w głowicy, aby pasowały do kołka rzędowego.</li>
	<li>Przyspawaj pozostałe dwa druty na głowicy do każdego złącza. 
	UWAGA: Brązowy kanał, który odpowiada srebrnemu przewodowi, jest podłączony do urządzenia EEG w celu uziemienia. Kanały czerwony i pomarańczowy odbierają sygnały z tego samego przewodu wolframowego, a kanał pomarańczowy służy jako odniesienie dla urządzenia EEG. Sygnały w kanale czerwonym są bez znaczenia, ale muszą współistnieć z kanałem czarnym, aby utworzyć bodziec prądowy. Sygnały w czarnym kanale są prawdziwymi sygnałami elektrycznymi w mózgu. Różne obwody mogą być zaprojektowane z wielokanałowymi pierścieniami ślizgowymi, aby pasowały do różnych urządzeń.</li>
</ol>
3. Chirurgia implantacji
<ol>
	<li>zwierzęta
	<ol>
		<li>Do operacji należy użyć 8-tygodniowych samców myszy C57BL/6 typu dzikiego o wadze 24-26 g.</li>
		<li>Trzymaj je w 12-godzinnym cyklu jasno-ciemnym (czas świecenia: 8:00-20:00) w środowisku o kontrolowanej temperaturze (22 ± 1 °C) i zapewnij wodę i paszę ad libitum.</li>
		<li>Użyj dodatkowej maty grzewczej, aby utrzymać zwierzęta w cieple podczas operacji.</li>
		<li>Po zabiegu należy wstrzyknąć meloksykam podskórnie (10 mg/kg) jako pierwsze podanie leków przeciwbólowych. Następnie umieść zwierzęta w oddzielnych klatkach, aby zoptymalizować regenerację. Dodaj meloksykam do diety zwierzęcia przez pierwszy tydzień po zabiegu.</li>
		<li>Po eksperymencie wstrzyknij do lewej komór myszy 4% paraformaldehydu w znieczuleniu i zbierz tkanki mózgowe w celu histologicznej weryfikacji celu elektrody.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zważ mysz i znieczul ją przez dootrzewnowe wstrzyknięcie 1% roztworu pentobarbitalu. Wysterylizuj wszystkie narzędzia chirurgiczne i materiały eksploatacyjne, które mają być używane, w tym wiertła, elektrody, cement dentystyczny itp., przez autoklawowanie.</li>
	<li>Gdy mysz jest całkowicie znieczulona, ogol włosy od oka do ucha za pomocą brzytwy.</li>
	<li>Umieść mysz na ramce stereotaktycznej. Włóż przednie górne zęby do siekacza i włóż oba nauszniki równie głęboko do uszu. Nałóż maść do oczu z erytromycyną na oczy, aby zapobiec suchości i ślepocie spowodowanej jasnym światłem podczas zabiegu.</li>
	<li>Zdezynfekuj obszar operacyjny trzema naprzemiennymi wacikami z jodoforu i 75% alkoholu okrężnymi ruchami. Następnie wykonaj strzałkowe nacięcie do przodu od środka tego nacięcia i odetnij skórę po obu stronach nacięcia, aby utworzyć trójkątne okno.</li>
	<li>Zwiń mały kawałek bawełny w kulkę i zwilż go 3% wodą utlenioną. Usuń tkankę miękką przyczepioną do czaszki, delikatnie pocierając odsłonięty obszar małym wacikiem, aż przednie i tylne ciemiączko będą wyraźnie widoczne.</li>
	<li>Dostosuj wysokość przednią i tylną tak, aby ciemiączko przednie i tylne znajdowało się w pozycji poziomej. Rozważ położenie przedniego ciemiączka jako początek osi.</li>
	<li>Przymocuj ze stali nierdzewnej do lewej czaszki móżdżku, używając wiertła, aby uzyskać płaską powierzchnię. Upewnij się, że śruba wystaje do połowy z czaszki.</li>
	<li>Upewnij się, że współrzędne rozpałki ciała migdałowatego to −1.67 mm z tyłu, −2.7 mm bocznie i −4.9 mm brzusznie od bregmy. Dostosuj urządzenie stereotaktyczne, aby zlokalizować to miejsce i oznaczyć je.</li>
	<li>Wywierć otwór w zaznaczonym miejscu za pomocą wiertła do czaszki o średnicy 0,5 mm.</li>
	<li>Przymocuj elektrody do pręta ustalającego urządzenia stereotaktycznego, umieść elektrodę pionowo nad otworem i powoli opuść pozycję do -4.9 mm. Owiń srebrny drut wokół trzy razy, uważając, aby nie potrząsnąć korpusem elektrody podczas pracy.</li>
	<li>Wymieszaj cement dentystyczny i delikatnie nałóż go na elektrodę i powierzchnię czaszki. Gdy cement dentystyczny stwardnieje, zmodyfikuj zewnętrzną stronę, aż cement otaczający stałą elektrodę zamieni się w stożek.</li>
	<li>Gdy cement stwardnieje, zwolnij elektrodę z urządzenia stereotaktycznego. Podskórnie podawać meloksykam w dawce 10 mg/kg mc. w celu złagodzenia dyskomfortu spowodowanego bólem u zwierząt. Meloksykam należy podawać do pokarmu dla zwierząt w celu uzyskania efektu przeciwbólowego w pierwszym tygodniu po zabiegu. Wyjmij mysz i umieść ją z powrotem w klatce, trzymając ją oddzielnie od innych myszy.</li>
</ol>
4. Rozpałka elektryczna
<ol>
	<li>Pozwól myszom odpocząć przez co najmniej 1 tydzień po zabiegu przed rozpaleniem, aby umożliwić powrót do zdrowia po operacji i ustąpienie stanu zapalnego. 
	UWAGA: Ogólnie rzecz biorąc, myszy, które nie wyzdrowiały odpowiednio, nie reagują dobrze na rozpałkę.</li>
	<li>Umieść mysz w specjalnie zaprojektowanym pudełku z wsuwanymi łączącymi elektrodę na głowie myszy z urządzeniem EEG. Przeprowadź przez otwór w pokrywie pudełka i dostosuj długość pozostawioną w pudełku, aby umożliwić swobodne poruszanie się myszy.</li>
	<li>Włącz urządzenie EEG i sprawdź, czy działa prawidłowo. Ustaw stymulator tak, aby dostarczał monofazowe impulsy fali prostokątnej o długości 1 ms przy 60 Hz przez czas trwania ciągu 1 s.</li>
	<li>Zacznij od natężenia prądu 50 μA dla pierwszej stymulacji; monitoruj EEG pod kątem wyładowań, które charakteryzują się skokami o wysokiej częstotliwości. Jeśli nie obserwuje się wyładowania wtórnego, dodaj 25 μA do następnego bodźca i kontynuuj ten proces co 10 minut, aż do zaobserwowania wyładowania końcowego i trwającego 5 s. 
	UWAGA: Jeśli eksperyment nie wymaga rozładowania, krok 4.4 można pominąć; 300 μA jest wystarczająco mocne do rozpalenia.</li>
	<li>Stymuluj mysz prądem o intensywności określonej w kroku 4.3 co 15 minut, nie częściej niż 20 razy dziennie.</li>
	<li>Monitoruj reakcje behawioralne na bodziec. 
	UWAGA: Wystąpienie trzech następujących po sobie epizodów stopnia V jest uważane za pełne rozpałkę, w połączeniu z rangą Racine standard17.</li>
</ol>

<ol><li>Kurita, T., Sakurai, K., Takeda, Y., Horinouchi, T., Kusumi, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Very+long-term+outcome+of+non-surgically+treated+patients+with+temporal+lobe+epilepsy+with+hippocampal+sclerosis%3A+A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Very long-term outcome of non-surgically treated patients with temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis: A retrospective study.</a> PLoS One. 11 (7), 0159464(2016).</li>
<li>Choy, M., Duffy, B. A., Lee, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+study+of+networks+in+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Optogenetic study of networks in epilepsy.</a> Journal of Neuroscience Research. 95 (12), 2325-2335 (2017).</li>
<li>Aroniadou-Anderjaska, V., Fritsch, B., Qashu, F., Braga, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+and+pathophysiology+of+the+amygdala+in+epileptogenesis+and+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Research%22%5BJournal%5D)">Pathology and pathophysiology of the amygdala in epileptogenesis and epilepsy.</a> Epilepsy Research. 78 (2-3), 102-116 (2008).</li>
<li>Smith, P. D., McLean, K. J., Murphy, M. A., Turnley, A. M., Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seizures%2C+not+hippocampal+neuronal+death%2C+provoke+neurogenesis+in+a+mouse+rapid+electrical+amygdala+kindling+model+of+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Seizures, not hippocampal neuronal death, provoke neurogenesis in a mouse rapid electrical amygdala kindling model of seizures.</a> Neuroscience. 136 (2), 405-415 (2005).</li>
<li>Reyes, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amygdala+enlargement%3A+Temporal+lobe+epilepsy+subtype+or+nonspecific+finding%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Research%22%5BJournal%5D)">Amygdala enlargement: Temporal lobe epilepsy subtype or nonspecific finding.</a> Epilepsy Research. 132, 34-40 (2017).</li>
<li>Fan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+surgical+treatment+of+non-lesional+temporal+lobe+epilepsy+with+unilateral+amygdala+enlargement%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and surgical treatment of non-lesional temporal lobe epilepsy with unilateral amygdala enlargement.</a> Neurological Sciences. 42 (6), 2353-2361 (2021).</li>
<li>Dhir, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pentylenetetrazol+%28PTZ%29+kindling+model+of+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Pentylenetetrazol (PTZ) kindling model of epilepsy.</a> Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 9, Unit 9 37(2012).</li>
<li>Van Erum, J., Van Dam, D., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PTZ-induced+seizures+in+mice+require+a+revised+Racine+scale%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">PTZ-induced seizures in mice require a revised Racine scale.</a> Epilepsy & Behavior. 95, 51-55 (2019).</li>
<li>Carriero, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guinea+pig+model+of+mesial+temporal+lobe+epilepsy+following+nonconvulsive+status+epilepticus+induced+by+unilateral+intrahippocampal+injection+of+kainic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">A guinea pig model of mesial temporal lobe epilepsy following nonconvulsive status epilepticus induced by unilateral intrahippocampal injection of kainic acid.</a> Epilepsia. 53 (11), 1917-1927 (2012).</li>
<li>Levesque, M., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+kainic+acid+model+of+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The kainic acid model of temporal lobe epilepsy.</a> Neuroscience Biobehavioral Reviews. 37, 10 Pt 2 2887-2899 (2013).</li>
<li>Fujita, A., Ota, M., Kato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+volatile+metabolites+of+amygdala-kindled+mice+reveal+novel+biomarkers+associated+with+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Urinary volatile metabolites of amygdala-kindled mice reveal novel biomarkers associated with temporal lobe epilepsy.</a> Scientific Reports. 9 (1), 10586(2019).</li>
<li>Li, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spatiotemporal+dynamics+of+phase+synchronization+during+epileptogenesis+in+amygdala-kindling+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The spatiotemporal dynamics of phase synchronization during epileptogenesis in amygdala-kindling mice.</a> PLoS One. 11 (4), 0153897(2016).</li>
<li>Wang, Y., Wei, P., Yan, F., Luo, Y., Zhao, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+epilepsy%3A+A+phenotype-oriented+review%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Animal models of epilepsy: A phenotype-oriented review.</a> Aging and Disease. 13 (1), 215-231 (2022).</li>
<li>Fallah, M. S., Dlugosz, L., Scott, B. W., Thompson, M. D., Burnham, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiseizure+effects+of+the+cannabinoids+in+the+amygdala-kindling+model%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Antiseizure effects of the cannabinoids in the amygdala-kindling model.</a> Epilepsia. 62 (9), 2274-2282 (2021).</li>
<li>Chipika, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amygdala+pathology+in+amyotrophic+lateral+sclerosis+and+primary+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Neurological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Amygdala pathology in amyotrophic lateral sclerosis and primary lateral sclerosis.</a> Journal of the Neurological Sciences. 417, 117039(2020).</li>
<li>Kuchukhidze, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emotional+recognition+in+patients+with+mesial+temporal+epilepsy+associated+with+enlarged+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Emotional recognition in patients with mesial temporal epilepsy associated with enlarged amygdala.</a> Frontiers in Neurology. 12, 803787(2021).</li>
<li>Soper, C., Wicker, E., Kulick, C. V., N'Gouemo, P., Forcelli, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+activation+of+superior+colliculus+neurons+suppresses+seizures+originating+in+diverse+brain+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Optogenetic activation of superior colliculus neurons suppresses seizures originating in diverse brain networks.</a> Neurobiology of Disease. 87, 102-115 (2016).</li>
<li>Devinsky, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Epilepsy.</a> Nature Reviews Disease Primers. 4, 18024(2018).</li>
<li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+between+thalamus+and+hippocampus+in+termination+of+amygdala-kindled+seizures+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Computational+and+Mathematical+Methods+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Interaction between thalamus and hippocampus in termination of amygdala-kindled seizures in mice.</a> Computational and Mathematical Methods in Medicine. 2016, 9580724(2016).</li>
<li>Ghotbedin, Z., Janahmadi, M., Mirnajafi-Zadeh, J., Behzadi, G., Semnanian, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+low+frequency+stimulation+of+the+kindling+site+preserves+the+electrophysiological+properties+of+the+rat+hippocampal+CA1+pyramidal+neurons+from+the+destructive+effects+of+amygdala+kindling%3A+the+basis+for+a+possible+promising+epilepsy+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Stimulation%22%5BJournal%5D)">Electrical low frequency stimulation of the kindling site preserves the electrophysiological properties of the rat hippocampal CA1 pyramidal neurons from the destructive effects of amygdala kindling: the basis for a possible promising epilepsy therapy.</a> Brain Stimulation. 6 (4), 515-523 (2013).</li>
<li>Hristova, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medial+septal+GABAergic+neurons+reduce+seizure+duration+upon+optogenetic+closed-loop+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Medial septal GABAergic neurons reduce seizure duration upon optogenetic closed-loop stimulation.</a> Brain. 144 (5), 1576-1589 (2021).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Padaczka to grupa chorób o wielorakich objawach i różnych przyczynach18; Należy zauważyć, że żaden pojedynczy model nie może być stosowany dla wszystkich rodzajów padaczki, a badacze muszą wybrać odpowiedni model do swojego konkretnego badania. Niniejsze badania przedstawiają jedną z najbardziej dostępnych metod wytwarzania elektrod. Różne części tej metody można dostosować do różnych warunków eksperymentalnych.
Metoda ta wykorzystuje elektrody z funkcją zarówno stymula...

Padaczka skroniowa (TLE) jest najbardziej rozpowszechnionym typem padaczki i wiąże się z wysokim ryzykiem przekształcenia się w padaczkę lekooporną. Chirurgia, taka jak selektywna amygdalohippokampektomia, jest skutecznym sposobem leczenia TLE, a epileptogeneza i ictogeneza choroby są nadal badane1,2. Wykazano, że patogeneza TLE występuje nie tylko w hipokampie, ale także w szerokim zakresie w ciele migdałowatym3,4. Na przykład, zarówno stwardnienie ciała migdałowatego, jak i powiększenie ciała migdałowatego były często zgłaszane jako źródło napadów TLE5,6. Nie można lekceważyć znaczenia ciała migdałowatego; Model ciała migdałowatego jest niezbędny do badania epileptogenezy i pilnie potrzebna jest wyraźna ilustracja tego modelu.
Zaproponowano kilka podejść do wywoływania napadów w modelach zwierzęcych. W przeszłości leki przeciwdrgawkowe wstrzykiwano dootrzewnowo we wczesnym stadium7. Chociaż metoda ta była wygodna, lokalizacja ognisk padaczkowych była niepewna. Wraz z rozwojem technologii stereotaktycznej i szczegółowego atlasu mózgów zwierząt, zastosowano wewnątrzczaszkowe wstrzykiwanie leków w celu rozwiązania problemu lokalizacji8. Jednak brak interwencji w przypadku ciężkich napadów w fazie ostrej skutkował wysoką śmiertelnością, a przewlekłym napadom spontanicznym towarzyszył problem niestabilnej częstości napadów międzynapadowych i napadów9,10. Wreszcie opracowano metodę rozpalania elektrycznego; Metoda ta okresowo kilkakrotnie stymuluje określone obszary mózgu, umożliwiając wywołanie napadów z określoną kontrolą zarówno lokalizacji, jak i czasu wystąpienia11.
Zaletą tej metody jest to, że wewnątrzczaszkowe wszczepienie elektrod jest minimalnie inwazyjne12. Co więcej, nasilenie napadu można kontrolować poprzez ustanie bodźców, co zmniejsza śmiertelność spowodowaną napadami. Zmiany te rozwiązały niedociągnięcia poprzednich podejść. Warto zauważyć, że model ten może odpowiednio naśladować napady padaczkowe u ludzi i jest szczególnie odpowiedni do badania stanu padaczkowego (SE) ze względu na jego zdolność do szybkiego wywoływania SE13. Może być również stosowany do badań przesiewowych leków przeciwpadaczkowych14 oraz w badaniach nad mechanizmem padaczki. Wreszcie, dobrze wiadomo, że ciało migdałowate jest ściśle związane z modulacją pamięci, przetwarzaniem nagrody i emocjami15. Zaburzenia tych funkcji psychicznych są często spotykane u pacjentów z padaczką, dlatego model padaczki ciała migdałowatego może być lepszym wyborem do badania problemów emocjonalnych w padaczce16.

<table><tbody><tr><td>Alexa Fluor 488-sprzężony z osiołkiem anty-króliczek IgG</td><td>invitrogen</td><td>A-21206</td><td></td></tr><tr><td>przeciwciało c-Fos</td><td></td><td>ab222699</td><td></td></tr><tr><td>Wiertło czaszkowe</td><td>SANS</td><td>SA302</td><td></td></tr><tr><td>cement dentystyczny</td><td>NISSIN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sprzęt do rejestracji i stymulacji EEG</td><td>Neuracle Technology (Changzhou) Co., Ltd</td><td>NSHHFS-210803</td><td></td></tr><tr><td>bezołowiowy drut cynowy</td><td>BAKON</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nagłówek pinowy/żeński</td> Rozstaw <td>XIANMISI</td><td></td><td>: 1,27 mm</td></tr><tr><td>Srebrny drut</td><td>Systemy AM</td><td>786000</td><td></td></tr><tr><td>Pierścień ślizgowy</td><td>Senring Electronics Co., Ltd</td><td>SNM008-04</td><td></td></tr><tr><td>Drut wolframowy</td><td>Systemy AM</td><td>796000</td><td></td></tr><tr><td>ultracienki drut wielostanowiskowy</td><td>Shenzhen Drut Chengxing i </td><td>UL10064-FEP</td><td></td></tr><tr><td>sprzęt spawalniczy</td><td>BAKON</td><td>BK881</td><td></td></tr></tbody></table>

użycie elektrody bipolarnej do stworzenia mysiego modelu padaczki skroniowej poprzez elektryczne rozppalenie ciała migdałowatego

Using a Bipolar Electrode to Create a Temporal Lobe Epilepsy Mouse Model by Electrical Kindling of the Amygdala

Ciało migdałowate jest jednym z najczęstszych źródeł napadów, a mysi model ciała migdałowatego jest niezbędny do zilustrowania padaczki. Jednak niewiele badań szczegółowo opisało protokół eksperymentalny. W artykule przedstawiono cały proces tworzenia modeli epilepsji z elektrycznego rozpalania ciała migdałowatego, wraz z wprowadzeniem metody wytwarzania elektrod bipolarnych. Elektroda ta może zarówno stymulować, jak i rejestrować, zmniejszając uszkodzenia mózgu spowodowane wszczepieniem oddzielnych elektrod do stymulacji i nagrywania. Do długotrwałej rejestracji elektroencefalogramu (EEG) zastosowano pierścienie ślizgowe, aby wyeliminować przerwy w zapisie spowodowane splątaniem się i odpadaniem.
Po okresowej stymulacji (60 Hz, 1 s co 15 min) ciała migdałowatego podstawno-bocznego (AP: 1,67 mm, L: 2,7 mm, V: 4,9 mm) przez 19,83 ± 5,742 razy, u sześciu myszy zaobserwowano pełne rozppalenie (zdefiniowane jako indukcja trzech ciągłych epizodów stopnia V sklasyfikowanych według skali Racine'a). Przez cały proces rozpalania rejestrowano wewnątrzczaszkowe EEG, a po rozpaleniu obserwowano wydzielinę padaczkową w ciele migdałowatym trwającą 20-70 s. Dlatego jest to solidny protokół modelowania padaczki wywodzącej się z ciała migdałowatego, a metoda jest odpowiednia do ujawnienia roli ciała migdałowatego w padaczce płata skroniowego. Badania te stanowią wkład w przyszłe badania nad mechanizmami padaczki mezjalnego płata skroniowego i nowymi lekami przeciwpadaczkowymi.

Elektroda i obwód umożliwiają rejestrację EEG oraz pełnią funkcję stymulującą (Rysunek 1); taka konfiguracja pozwala uniknąć komplikacji związanych z oddzielnym implantowaniem elektrod rejestrujących i stymulujących oraz minimalizuje uszkodzenia tkanki mózgowej. Zastosowanie pierścieni ślizgowych umożliwia połączenie elektrod ze wszystkimi rodzajami urządzeń.
Przeprowadzono operację implantacji elektrod u sześciu zdrowych, dorosłych samców myszy C57BL/6, a stymula...

Ciało migdałowate odgrywa kluczową rolę w padaczce skroniowej, która wywodzi się z tej struktury i z niej się rozprzestrzenia. Ten artykuł zawiera szczegółowy opis wytwarzania głębokich elektrod mózgowych z funkcjami zarówno rejestrującymi, jak i stymulującymi. Wprowadza model padaczki przyśrodkowego płata skroniowego wywodzącej się z ciała migdałowatego.

Użycie elektrody bipolarnej do stworzenia mysiego modelu padaczki skroniowej poprzez elektryczne rozppalenie ciała migdałowatego

The amygdala is one of the most common origins of seizures, and the amygdala mouse model is essential for the illustration of epilepsy. However, few ...

W protokole tym zaproponowano model padaczki, w której pochodzeniu występuje ciało migdałowate. Otwiera to drogę do badania mezjalnych struktur płata skroniowego. Model ten może być interpretowany jako podstawa eksperymentu.Ponieważ protokół ten jest tanią i wydajną metodą, można go szybko przeprowadzić w większości laboratoriów. Procedurę zademonstruje Yongchang Lu, doktorant w naszym laboratorium. Zacznij od zebrania wstępnie przygotowanych elementów, zaczynając od dwucentymetrowych kawałków drutu wolframowego pokrytego teflonem o średnicy niedźwiedzia 76,2 mikrometra.Jeden kawałek srebrnego drutu o średnicy niedźwiedzia 127 mikrometrów o tej samej długości i jeden zestaw dwóch na dwa kołki linowe. Użyj zapalniczki, aby spalić jeden koniec każdego drutu wolframowego, aby usunąć pięć milimetrów powłoki izolacyjnej. Obierz odcinek bardzo cienkiego drutu wielożyłowego.Rozwiń od dołu do górnego końca, gdzie zaczyna się, kontynuując do góry. Połącz ten bardzo cienki drut i drut wolframowy, ściskając jeden koniec i delikatnie skręcając drugi, umożliwiając łatwe splatanie ze sobą dwóch materiałów. Delikatnie pociągnij, aby upewnić się, że druty są szczelnie owinięte i odetnij nadmiar bardzo cienkiego drutu.Staraj się, aby drut wolframowy był prosty przez cały proces. Przymocuj kołek linowy do zacisku na stole spawalniczym dłuższym bokiem kołków skierowanym na zewnątrz. Użyj igły strzykawki, aby nabrać trochę pasty lutowniczej i nałóż ją na kołki.Podgrzej palnik spawalniczy do 320 stopni Celsjusza. Rozpuść i posmaruj trochę bezołowiowego drutu cynowego za pomocą końcówki palnika. Załóż górny koniec drutu wolframowego na jedną igłę kołków linowych i użyj lutu na palniku, aby przymocować drut wolframowy do kołka.Przyspawaj kolejny drut wolframowy i kolejny srebrny drut do kołka linowego w ten sam sposób, tak aby każdy drut odpowiadał igły. Wytnij dwie rurki termokurczliwe nieco dłuższe niż górny koniec drutu wolframowego. Umieść je na złączu lutowanym dwóch drutów wolframowych, upewniając się, że część przewodząca jest całkowicie pokryta rurką, tak aby obwód dwóch drutów wolframowych nie był umieszczony szeregowo.Wyjmij elektrodę ze stołu spawalniczego clamp i delikatnie przytrzymaj elektrodę dużymi szczypcami, ponieważ elektrody mogą łatwo stracić swój kształt podczas podgrzewania rurki termokurczliwej. Użyj zacisku o dobrej przewodności cieplnej z nieco większą siłą. Włącz kanał powietrzny i podgrzewaj, aż osiągniesz temperaturę 320 stopni Celsjusza.Przedmuchuj rurkę termokurczliwą przez kilka sekund, aż zostanie dokręcona. Wzmocnij elektrodę klejem topliwym. Przytrzymaj dwa druty wolframowe i skręć je razem, trzymając ich końce osobno.Przytnij skręcone druty wolframowe do około 10 milimetrów długości, tak aby odstęp na końcach nie przekraczał 0,5 milimetra. Sprawdź elektrody za pomocą multimetru, umieszczając jeden pręt multimetru po niespawanej stronie kołków liny i delikatnie dotykając końcem drutu wolframowego lub drutu srebrnego do drugiego pręta. Sprawdzanie, czy obwód jest płynny.Upewnij się, że linie nie są umieszczone szeregowo. Oderwij pięć milimetrów powłoki izolacyjnej na każdym końcu, aby odsłonić metalowy drut w środku. Dodaj odcinek rurki termokurczliwej do każdego przewodu rozrusznika.Zespawaj każdy przewód za pomocą wtyczki złącza urządzenia EEG. Rurkę termokurczliwą obkurczyć gorącym powietrzem. Dodaj odcinek rurki termokurczliwej do każdego drutu wirnika.Skręć ze sobą przewodzące części czerwonego i pomarańczowego drutu i przyspawaj je do złącza i głowicy, aby pasowały do kołka liny. Przyspawaj pozostałe dwa druty na głowicy do każdego złącza. Zważ mysz.Gdy mysz jest w pełni znieczulona, ogol włosy od oka do ucha maszynką do golenia. Umieść mysz na ramce stereotaktycznej. Włóż przednie górne zęby do siekacza i włóż oba paski do uszu na równą głębokość do uszu.Nałóż maść do oczu z erytromycyną na oczy, aby zapobiec suchości i ślepocie spowodowanej jasnym światłem podczas zabiegu. Zdezynfekuj obszar operacyjny co najmniej trzy razy naprzemiennie wacikami z jodoforem i 75% alkoholem. Wykonaj nacięcie podłużne, aby całkowicie odsłonić obszar operacyjny lub wykonaj trójkątne nacięcie, o ile odsłania przednie i tylne ciemiączka oraz miejsca implantacji elektrod.Zwiń mały kawałek bawełny w kulkę i zwilż go 3% nadtlenkiem wodoru. Usuń tkankę miękką przyczepioną do czaszki, delikatnie pocierając odsłonięty obszar małym wacikiem, aż zobaczysz przednie i tylne ciemiączko. Dostosuj wysokość przednią i tylną tak, aby ciemiączko przednie i tylne było poziome.Rozważ położenie przedniego ciemiączka jako początek osi. Przymocuj ze stali nierdzewnej do lewej czaszki móżdżku. Ustaw współrzędne rozpałki ciała migdałowatego z bregmy i dostosuj urządzenie stereotaktyczne, aby zlokalizować to miejsce i oznaczyć je.Wywierć otwór w miejscu marszu wiertłem do czaszki o średnicy 0,5 milimetra. Przymocuj elektrody do pręta ustalającego urządzenia stereotaktycznego. Umieść elektrodę pionowo nad otworem i powoli obniż pozycję do minus 4.9 milimetra.Owiń srebrny drut wokół trzykrotnie. Uważaj, aby nie potrząsnąć korpusem elektrody podczas pracy. Wymieszaj cement dentystyczny i delikatnie nałóż go na elektrodę i powierzchnię czaszki.Gdy cement dentystyczny stwardnieje, zmodyfikuj zewnętrzną stronę, aż cement otaczający stałą elektrodę zamieni się w stożek. Następnie zwolnij elektrodę z urządzenia stereotaktycznego. Wyjmij mysz i umieść ją z powrotem w klatce.Trzymanie go oddzielnie od innych myszy. Umieść mysz w specjalnie zaprojektowanym pudełku z ślizgowymi łączącymi elektrodę na głowie myszy z urządzeniem EEG. Przeprowadź przez otwór w pokrywie pudełka i dostosuj długość pozostawioną w pudełku, aby umożliwić swobodne poruszanie się myszy.Włącz urządzenie EEG i upewnij się, że działa poprawnie. Ustaw parametry stymulatora tak, aby dostarczały jednomilisekundowe monofazowe impulsy fali prostokątnej o częstotliwości 60 Hz przez jedną sekundę przez 10 cykli stymulacji. Zacznij od natężenia prądu 50 mikroamperów dla pierwszej stymulacji.Monitoruj EEG po wyładowaniu charakteryzującym się skokami o wysokiej częstotliwości. Jeśli nie zaobserwuje się wyładowania po wyładowaniu, dodaj 25 mikroamperów do następnego bodźca i kontynuuj ten proces co 10 minut, aż do zaobserwowania wyładowania po wyładowaniu i będzie trwało pięć sekund. Stymuluj mysz określonym natężeniem prądu co 15 minut, nie częściej niż 20 razy dziennie.Monitoruj reakcje behawioralne na bodziec. Operację wszczepienia elektrody przeprowadzono na sześciu zdrowych dorosłych samcach C57 czarnych 6 myszach, a stymulację elektryczną wykonano dwa tygodnie po operacji. Poziom napadów behawioralnych stopniowo wzrastał wraz ze wzrostem liczby bodźców i rejestrowano liczbę bodźców wymaganych do całkowitego rozpalenia.EEG po wyładowaniach trwało od pięciu do 15 sekund. Następnie nasiliły się samoistne wyładowania wewnątrzczaszkowe i zaczęły się objawy behawioralne. Czas trwania napadu był zwykle krótszy niż jedna minuta, co zmniejsza ryzyko zgonu z powodu ciężkich drgawek prowadzących do bezdechu.Ekspresję c-Fos w tkance mózgowej wykryto za pomocą immunohistochemii dwie godziny po całkowitym rozpałszczeniu. Wyniki pokazują, że ekspresja c-Fos w ipsilateralnym ciele migdałowatym znacznie wzrosła, weryfikując wykonalność tego modelu. Odstęp między końcami drutu wolframowego nie powinien przekraczać pół milimetra, w przeciwnym razie nie przedostanie się przez otwór mózgowy.Długość elektrody nie powinna być zbyt długa, w przeciwnym razie wpłynie to na aktywność myszy.

using-bipolar-electrode-to-create-temporal-lobe-epilepsy-mouse-model

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Ten film demonstruje technikę wszczepiania zespołu elektrod do mózgu myszy. Zespół zawiera elektrody bipolarne do rejestrowania aktywności z hipokampa i elektrodę odniesienia do uzyskiwania podstawowej aktywności z móżdżku. Znieczuloną mysz umieszcza się na stereotaktycznej ramie, a zespół elektrod wszczepia się w docelowy obszar mózgu. Następnie zwierzę może dojść do siebie przed wykonaniem zapisu elektrofizjologicznego.

Wszczepienie zespołu elektrod do mózgu myszy w celu zapisu elektrofizjologicznego

Ten film pokazuje proces wywoływania padaczki u myszy za pomocą zastrzyków z pentylenotetrazolu (PTZ), antagonisty receptora GABA-A. Wielokrotne dootrzewnowe podawanie PTZ stopniowo obniża próg drgawkowy poprzez hamowanie napływu jonów chlorkowych, zakłócanie hamowania neurotransmisji i prowadzenie do nadpobudliwości neuronów, które wywołują drgawki. Proces ten prowadzi do rozpalenia i rozwoju napadów samoistnych, naśladujących przewlekłą padaczkę.

Ustalenie modelu napadów padaczkowych indukowanych pentylenotetrazolem u myszy

Źródło: Slezia, A. i wsp. Elektroforetyczne dostarczanie kwasu γ-aminomasłowego (GABA) do ogniska padaczkowego zapobiega napadom padaczkowym u myszy. J. Vis. Exp. (2019 rok)Ten film pokazuje elektroforetyczne dostarczanie kwasu gamma-aminomasłowego (GABA) w celu zahamowania aktywności napadowej u znieczulonej myszy. Przedstawiono w nim etapy związane z implantacją sondy, rejestracją aktywności neuronalnej, indukcją napadów i kontrolowanym dostarczaniem GABA za pomocą mikroprzepływowej pompy...

Elektroforetyczne dostarczanie GABA do ogniska padaczkowego znieczulonej myszy

Tutaj demonstrujemy użycie bezprzewodowej technologii umożliwiającej elektroencefalogram (EEG) w modelach chorób ludzkich noworodków gryzoni. Dzięki telemetrii nie ma obciążających połączeń, co pozwala na naturalne zachowania.

Długotrwałe, ciągłe monitorowanie EEG w modelach chorób człowieka u małych gryzoni przy użyciu systemu nadajników bezprzewodowych Epoch

Ten protokół opisuje metodę chemicznego rozpalania pentylenotetrazolu i dostarcza mysi model padaczki. Protokół ten może być również wykorzystany do badania podatności na indukcję i patogenezę napadów padaczkowych po napadach padaczkowych u myszy.

Model rozpałki indukowany pentylenotetrazolem

Ten szczegółowy protokół opisuje umieszczanie elektrod stymulacji przezczaszkowej na kości skroniowej w celu zbadania krótko- i długoterminowych efektów przezczaszkowej stymulacji elektrycznej u swobodnie poruszających się szczurów.

Przewlekła przezczaszkowa stymulacja elektryczna i zapis wewnątrzkorowy u szczurów

Ten manuskrypt opisuje metodę wywoływania stanu padaczkowego poprzez ogólnoustrojowe wstrzykiwanie pilokarpiny oraz monitorowania spontanicznych nawracających napadów u żywych zwierząt za pomocą bezprzewodowego systemu telemetrii wideo i elektroencefalogramu. Protokół ten może być wykorzystany do badania patofizjologicznych mechanizmów przewlekłej padaczki, epileptogenezy i ostrych napadów.

Pilokarpinowy model padaczki skroniowej i monitorowanie EEG z wykorzystaniem systemu radiotelemetrycznego u myszy

Ilustrujemy, jak przeprowadzić rejestrację i elektryczną modulację aktywności padaczkowej indukowanej przez 4-aminopirydynę w wycinkach mózgu gryzoni za pomocą układów mikroelektrod. Niestandardowa komora rejestracyjna utrzymuje żywotność tkanek podczas długotrwałych sesji eksperymentalnych. Mapowanie elektrod na żywo i wybór par stymulujących odbywa się za pomocą niestandardowego graficznego interfejsu użytkownika.

Rejestracja i modulacja aktywności padaczkowej w wycinkach mózgu gryzoni sprzężonych z układami mikroelektrod

Wyzwaniem badań nad padaczką jest opracowanie nowych metod leczenia dla pacjentów, u których klasyczna terapia jest niewystarczająca. Korzystając z nowego protokołu - za pomocą wszczepialnego systemu dostarczania leków - jesteśmy w stanie kontrolować napady padaczkowe u znieczulonych myszy poprzez elektroforetyczne dostarczanie GABA do ogniska padaczkowego.

Elektroforetyczne dostarczanie kwasu γ-aminomasłowego (GABA) do ogniska padaczkowego zapobiega napadom padaczkowym u myszy

Ten systematyczny protokół opisuje nowy zwierzęcy model padaczki pourazowej po powtarzającym się łagodnym urazowym uszkodzeniu mózgu. Pierwsza część szczegółowo opisuje etapy indukcji urazowego uszkodzenia mózgu przy użyciu zmodyfikowanego modelu spadku masy ciała. Druga część zawiera instrukcje dotyczące podejścia chirurgicznego dla jedno- i wielokanałowych systemów akwizycji danych elektroencefalograficznych.

Wywoływanie padaczki pourazowej w mysim modelu powtarzalnego rozlanego urazowego uszkodzenia mózgu

Ten raport opisuje metody generowania modelu padaczki skroniowej na podstawie elektrycznego rozpalenia transgenicznych myszy VGAT-Cre. Rozpalone myszy VGAT-Cre mogą być przydatne w określaniu, co powoduje padaczkę i w badaniach przesiewowych nowych terapii.

Przygotowanie i wszczepienie elektrod dla elektrycznie zapalających myszy VGAT-Cre w celu wygenerowania modelu padaczki skroniowej

Poznaj metodę tworzenia głębokich elektrod mózgowych do stymulacji i rejestracji EEG w modelu padaczki skroniowej u myszy. Protokół umożliwia badanie mechanizmów epileptycznych z ciała migdałowatego.

Użycie elektrody bipolarnej do stworzenia mysiego modelu padaczki skroniowej poprzez elektryczne rozppalenie ciała migdałowatego (Wideo) | JoVE Journal

Użycie elektrody bipolarnej do stworzenia mysiego modelu padaczki skroniowej poprzez elektryczne rozppalenie ciała migdałowatego

Przeglądaj więcej filmów