Single-Molecule Diffusion and Assembly on Polymer-Crowded Lipid Membranes

Satyaghosh Maurya; Vishwesh Haricharan Rai; Aditya Upasani; Saurabh Umrao; Diksha Parwana; Rahul Roy

doi:10.3791/64243

Dyfuzja i montaż pojedynczych cząsteczek na błonach lipidowych stłoczonych w polimerach

JoVE Journal
Biochemistry
Author Produced

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biochemistry

Single-Molecule Diffusion and Assembly on Polymer-Crowded Lipid Membranes

Dyfuzja i montaż pojedynczych cząsteczek na błonach lipidowych stłoczonych w polimerach

Full Text

2,945 Views

10:43 min

July 19, 2022

DOI: 10.3791/64243-v

Satyaghosh Maurya¹, Vishwesh Haricharan Rai¹, Aditya Upasani¹, Saurabh Umrao^1,2, Diksha Parwana¹, Rahul Roy^1,3

¹Department of Chemical Engineering,Indian Institute of Science, ²Holonyak Micro & Nanotechnology Lab,University of Illinois, Urbana-Champaign, ³Center for BioSystems Science and Engineering,Indian Institute of Science

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Tutaj przedstawiono protokół do wykonywania i analizy wiązania, mobilności i składania pojedynczych cząsteczek na sztucznych zatłoczonych błonach lipidowych za pomocą mikroskopii smTIRF (smTIRF) z wykorzystaniem pojedynczej cząsteczki całkowitego wewnętrznego odbicia.

Błony komórkowe są bardzo zatłoczone ze względu na obecność wbudowanych białek i cukrów. Demonstrujemy obrazowanie pojedynczych cząsteczek na syntetycznych dwuwarstwach lipidowych z zatłoczonym nośnikiem. Platforma ta jest przydatna do badania wpływu stłoczenia na reakcje biomolekularne błony na poziomie molekularnym.

Protokół wyjaśnia analizę wiązania, dyfuzji i składania biomolekuł błonowych. Powodzenie eksperymentu zależy od rygorystycznego oczyszczenia podłoża, uniknięcia uszkodzenia dwuwarstwy i utrzymania wysokiego stosunku sygnału do szumu w obrazowaniu pojedynczych cząsteczek. Procedurę demonstrują ze mną Aditya Upasani i Vishwesh Haricharan Rai, absolwenci laboratorium.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Dyfuzja pojedynczych cząsteczek montaż błony lipidowe stłoczone polimerami protokół obrazowania reakcje biomolekularne błony czyszczenie podłoża konserwacja dwuwarstwowa komory mikroprzepływowe lipidy POPC lipidy DOPE-PEG wytwarzanie pęcherzyków sonikacja dodawanie chlorku wapnia